Что сбивает температуру: Парацетамол: для чего нужен, как действует и как пить парацетамол в таблетках

Грипп — частный случай ОРВИ. Есть множество острых респираторно-вирусных инфекций и грипп только одна из них. То есть, если у вас грипп — у вас ОРВИ, но если у вас ОРВИ — это необязательно грипп.

Нет. Первый случай болезни, очень напоминающей грипп, описан еще Гиппократом в 412 году до нашей эры. А так как Гиппократ был первым, кому пришло в голову описывать болезни, скорее всего, грипп сопровождал человечество с древнейших времен.

По данным «Всемирной организации здравоохранения», ежегодно в мире болеют гриппом около шести миллионов человек. Причем это только тяжелые случаи и только среди людей, которые обратились к врачу. На самом деле это число можно смело умножать на пять.

Увы, но умирают. По данным той же ВОЗ, в год фиксируется от 290 до 650 тысяч смертей от инфекции и связанных с ней осложнений.

В первую очередь это люди старше 65 лет, дети до пяти лет, беременные женщины, а также страдающие от хронических болезней печени, почек, сердца и других органов, ВИЧ-инфицированные.

Внезапная высокая температура, кашель (обычно сухой), головная боль, мышечные боли и боли в суставах, боль в горле и насморк. Кашель может быть тяжелым и длиться две недели и более.

Так как вирус чрезвычайно изменчив, то сделать препарат, который после применения сразу бы давал пожизненный иммунитет, невозможно. Каждый год медики прогнозируют, какие именно разновидности наиболее актуальны в этом сезоне, и разрабатывают вакцину. Обычно прививают сразу от трех-четырёх подтипов. Причем прогноз обычно точный, так как ВОЗ постоянно следит за циркуляцией вирусов и выделяет новые штаммы.

Это исключено. В вакцине нет не только живых вирусов, но и целых. Только фрагменты. Заболеть от вакцины так же вероятно, как то, что вас забодает котлета.

Нет. Да и с чего бы? Вакцина для того и нужна, чтобы запустить работу иммунной системы. По статистике люди, которые регулярно прививаются от гриппа, мало того, что не болеют простудой чаще, так еще и имеют повышенную устойчивость к респираторным заболеваниям.

Тут важно понимать, что иммунитет бывает двух видов: специфический и неспецифический.

Первый получается только в ответ на болезнь или вакцину при непосредственном контакте с возбудителем болезни. Собственно, поэтому и существуют вакцины. Ни травками, ни зарядкой его не выработать.

Второй, то есть не специфический, штука врожденная и направлена она на борьбу с любыми «чужаками». Главная его задача — вообще не допустить вторжение, отлавливая диверсантов на коже и слизистых. Если же пришельцы все-таки прорвались в организм, действует система эффективно, но грубо. Жар, рвота, диарея — все это ответ неспецифического иммунитета на вмешательство извне. 

В борьбе с серьезными инфекциями неспецифический иммунитет — лишь способ дождаться, когда специфический изучит инфекцию и создаст антитела для борьбы именно с ней.

Зато неспецифический иммунитет можно укрепить, укрепляя общее здоровье. Зарядка, сбалансированное питание, отказ от вредных привычек уменьшают вероятность заболеть. Но если вы все же заболели, вас спасет только специфическая иммунная система.

Или не справится. Тут возможны оба варианта и более 200 тысяч умирающих ежегодно тому подтверждение.

Нет, и это хорошо. Дело в том, что ученые еще не до конца понимают, как именно работает неспецифический иммунитет. И, если бы травы и БАДы действовали, то последствия могли бы быть самыми непредсказуемыми. К счастью, они не действуют.

• Регулярно мыть руки 
• Не трогать лицо
• Избегать контактов с больными

Увы, нет. Маска нужна не здоровому, а больному, чтобы тот при чихании и кашле не разбрызгивал зараженную слюну. А от вируса только маска все равно не защитит, так как оставляет открытой слизистую глаз, на которой вирус может прекрасно жить и размножаться.

Другое дело — противоаэрозольный респиратор и плавательные очки, а лучше противогаз. Но сами подумайте, стоит ли оно того, или проще сделать прививку.

Вопреки названию простуда не происходит из-за переохлаждения. Ее вызывают вирусы. А вирусу все равно, в шапке ты или без.

Повторим еще раз: переохлаждение не ведет к болезни. А вот сидеть в наглухо закупоренной комнате, где плодятся бактерии и вирусы, не очень полезно. Проветривайте и не бойтесь сквозняков.

Во-первых, идите к врачу. Грипп — штука серьезная. И не занимайтесь самолечением. Ну а из остальных рекомендаций — пейте больше жидкостей и побольше лежите, это вы и так знаете.

Лучше примите другого врача. «Арбидол», «Кагоцел» и уж тем более «Анаферон», «Антигриппин» и «Оциллококцинум» вас точно не вылечат. Полный список расстрельных препаратов можно узнать здесь.

Гомеопатия вообще ничего не лечит. Действие этих препаратов не доказано и даже теоретически маловероятно. Для примера можно рассказать историю про уже упомянутый «Оциллококцинум».

Все началось в 1919 году, когда гомеопат Жозеф Руа, рассматривая в микроскоп кровь больных испанкой, заметил в их крови бактерии, похожие очертаниями на клетки печени барбарийской утки.

Так как по правилам гомеопатии подобное лечится подобным, он изготовил из ее печени лекарство от гриппа.

А теперь внимание:
1. грипп вызывается не бактерией, а вирусом
2. при разведении в двухсотой степени в одной дозе не остается ни одной клетки действующего вещества
3. никаких барбарийских уток в природе нет
Вот такая гомеопатия.

Нет. Как показали исследования, никакого эффекта это не дает. Хотя авитаминоз действительно снижает иммунитет, но если он у вас есть, вы это заметите и без гриппа. Как минимум начнется цинга.

Нет. Антибиотики убивают бактерии, а грипп — вирус. Конечно, ослабленный гриппом организм может подвергнуться и бактериальной инфекции, но заметить ее и прописать антибиотики — задача врача. Профилактического эффекта антибиотики не имеют.

Нет. Все это чистой воды имитация лечения. Греть при воспалении вообще ничего не стоит.

Нет. Все это переварится в желудке и никакого действия не окажет. А алкоголь еще и даст нагрузку на печень, которой и так не сладко. Туда же и чудотворный чеснок. Как показали исследования, некоторый антисептический эффект от него есть, но, чтобы он проявился, вам придется съесть его несколько тонн.

Надо. Но только если температура выше 38, долго держится и причиняет сильный дискомфорт. Любые лекарства имеют побочные эффекты и лучше ими не злоупотреблять. Парацетамол, например, чемпион по лекарственным гепатитам. А аспирин строго не рекомендован детям.

Можно обтирать больного теплой водой, это снимает жар. Но именно водой, без добавок, и именно теплой. И только если температура не экстремально высока. При 39 — таблетки и скорая. Не рискуйте.

Жар у младенцев и малышей | Pampers

Температура может указывать на то, что организм ребенка борется с инфекцией. Сама по себе температура не означает обязательной болезни. Небольшое повышение температуры является естественным защитным механизмом тела от незначительных детских заболеваний. Так что делать при высокой температуре у ребенка – сбивать или нет?

К появлению жара у младенца (до 2 месяцев) необходимо отнестись серьезно. Ректальная температура малыша больше 38 градусов Цельсия считается повышенной. В этом возрасте еще не рекомендуется использовать ушной термометр.

Если у ребенка младше 2 месяцев повышена температура, снимите с него один слой одежды и снова измерьте температуру через 15–20 минут. Если за это время она не снизится, а у малыша пропадет аппетит, он будет выглядеть сонным или слишком возбужденным – обратитесь к врачу!

Когда доктор будет осматривать ребенка, он сам задаст вам необходимые вопросы по поводу состояния малыша. Но чтобы врач имел четкое представление о ситуации, сообщите ему, хорошо ли ребенок ест, как он спит и просыпается, нет ли других признаков для беспокойства. Также обязательно поставьте доктора в известность, если ребенок контактировал с заболевшими людьми в последние две недели или у него есть хронические заболевания.

Как правило, температура выше 39,4 градуса по Цельсию сопровождает более серьезные заболевания, и в такой ситуации необходимо ориентироваться на общее состояние ребенка.

Если ребенок старше трех месяцев, при повышении температуры выше 38,5 градусов можете дать ему детский парацетамол или ибупрофен, чтобы снизить жар и дискомфорт. Никогда не давайте детям аспирин! Также снизить жар можно искупав малыша в теплой воде, но при условии, что у него нет озноба. Дрожь означает повышение температуры, и ванна, в этом случае, может только усугубить ситуацию.

Внимательно следите за температурой ребенка. Если она не падает или растет после приема лекарства, обязательно обратитесь к врачу!

Обезвоживание при высокой температуре тела во время ОРВИ и гриппа

Считается, что повышение температуры тела — самый распространенный симптом болезни у детей. У каждого ребенка хотя бы 1 раз в год отмечается заболевание, которое сопровождается повышением температуры тела (лихорадочным состоянием).

Острые респираторные вирусные ининфекционные заболевания (ОРВИ) и ГРИПП- это наиболее частые заболевания, которые сопровождаются повышением температуры  тела (лихорадкой) как у детей, так и у взрослых. Основной опасностью лихорадки при ГРИППЕ и ОРВИ является обезвоживание.

Известно, что на каждый 1°C повышения температуры потери жидкости организмом возрастают примерно на 10 % от обычных ежедневных потерь. Потери жидкости идут с потом, в т.ч. при применении жаропонижающих средств и с выдыхаемым воздухом.

Организм теряет воду и соли натрия.

При этом возрастает нагрузка на сердце и сосуды, что в целом негативно отражается на самочувствии ребенка и врослого человека. У детей младшего возраста на фоне высокой температуры и обезвоживания могут развиться судороги.

Признаками обезвоживания могут служить сухость губ, языка, слизистых рта и носа, нарушения увлажнения глаз, снижение эластичности кожи на тыльной поверности кистей и стоп.

Правильный питьевой режим способен поддержать организм болеющего человека и предотвратить возможные осложнения.

Питье только воды или разных не предназначенных для устранения явлений обезвоживания напитков зачастую не может решить проблему, поскольку организм теряет воду и соли и определенном соотношении.

Часть выпитой суточной жидкости должна  быть представленна глюкозо-солевыми растворами с подходящей для этого случая концентрацией, например Регидрон Био.

Соли, входящие в Регидрон Био восполнят потерю солей организмом. Глюкоза поможет солям проникнуть из кишечника в кровь. Молочно кислые бактерии Lactobacillus rhamnosus GG, которые содержатся в Регидрон Био положительно влияют на биоценоз кишечника и улучшают иммунное сопротивление организма вирусной инфекции.

ОДИН ВЕНТИЛЯТОР МОЖЕТ БЫТЬ НЕ САМЫМ КЛАССНЫМ ВЕЩАНИЕМ

Q — Моя мама всегда говорила мне не обмахиваться веером в жаркие дни; она сказала, что усилие размахивания вентилятором создает больше тепла, чем может отвести прохладный ветерок; так что обмахивание веером действительно сделало тебя горячее. Затем я услышал, что тепло, выделяемое веером, сохраняется в мышцах; так что вы не « почувствуете » это. Кто прав?

A — Если вы просите меня выбрать между вашей мамой и вашим анонимным экспертом по мышцам, я выберу кровного родственника.

Кровь — вот что опровергает теорию аккумулирования тепла. Мышцы не накапливают тепло; кровь быстро отводит тепло от мышц и отправляет его в Body Central для обработки и распределения. (Надеюсь, я здесь не слишком техничен.) Когда вы тренируетесь в жаркий день, вам становится жарко, а не конкретная группа мышц как таковая.

Однако мама тоже не на высоте. Верно, что обдувание увеличивает тепловыделение человека. Но во многих случаях это того стоит.При правильном использовании преимущества охлаждения при использовании вентилятора перевешивают требуемые начальные вложения в работу.

Доктор Ральф Голдман — главный научный сотрудник Multi-Tech Corp., фирмы из Массачусетса, которая занимается оценкой тепловых свойств одежды. Он также является доктором физиологии, который 30 лет изучал переносимость человеком жары, холода и работы. Это тот человек, который в 1982 году сказал НФЛ, что можно сыграть в знаменитом матче плей-офф Цинциннати Бенгалс — Сан-Диего Чарджерс, в котором температура перед игрой составляла минус 9 градусов, а коэффициент охлаждения ветром составлял минус 54.

Голдман говорит, что при обмахивании веером выделяется около 25 калорий тепла в час, чего достаточно, чтобы повысить температуру поверхности на 1 градус. Таким образом, вентилятор должен охладить кожу по крайней мере на 1 градус, чтобы добиться безубыточности, и предпочтительно на 2 или более градусов, чтобы усилия окупились.

По словам Голдмана, сделать это несложно.

«Вокруг каждого физического объекта, включая тело, есть очень важная пленка неподвижного воздуха — слой поверхностного воздуха», — говорит он. » Он служит изоляцией и фактически сохраняет больше тепла, чем, скажем, рубашка и брюки.Движение воздуха, будь то ветер или движение тела, уменьшает толщину или удаляет этот слой неподвижного воздуха ».

Используя в основном непонятные (для меня) цифры, он подсчитал, что обмахивание веером в 86-градусный день уберет 60 калорий тепла в час, охладив кожу на 2 полных градуса.

Это предполагает несколько вещей. Предполагается, что окружающий воздух по-прежнему остается

— вентиляция менее эффективна, когда дует ветер. Предполагается, что вы обмахиваетесь веером с некоторой степенью эффективности, а не размахиваете платком, как сумасшедший.И это предполагает, что погода не слишком суровая.

«Польза от вентиляции зависит от того, насколько жарко», — говорит Голдман. » Если температура воздуха выше, чем температура кожи, которая обычно составляет 95 градусов, весь этот дополнительный воздух, проходящий по вашей коже, сделает вас горячее, потому что вы удалите этот изолирующий слой неподвижного воздуха, который теперь является изолирующим. ты от жары. Когда вы снимаете этот слой в присутствии еще более горячего воздуха, вам становится еще жарче ».

Fanning имеет еще одно охлаждающее преимущество: он ускоряет испарение пота.При подходящих условиях это может добавить еще 2 градуса потери тепла за час, в результате чего общая потеря составит 3 градуса (4 градуса минус 1 градус затраченных усилий).

Но при неблагоприятных условиях обмахивание веером бесполезно.

«Когда воздух очень влажный, вентилятор бесполезен», — говорит Голдман. ‘Воздух настолько влажный, что не может впитать дополнительную влагу — пот не испаряется; так что вы не сможете избавиться от лишнего тепла. Я бы прикинул, что если бы температура была 80 градусов, а влажность 75 процентов или больше, обмахивание не помогло бы.»

Поможет техника и оборудование. Гольдман советует обмахивать руками длинными нежными движениями запястья; чем менее интенсивно обдувается веером, тем меньше выделяется тепло. Из всего, что угодно, можно сделать вентилятор исправным, но любой материал можно улучшить, согнув его, как восточные складывающиеся вееры — складки увеличивают площадь поверхности вентилятора и помогают ему перемещать больше воздуха.

Следствием теории «обмахивание веером только разогревает» является представление о том, что фанатик может обмануть себя, думая, что он круче, когда это не так.Нет, говорит Гольдман.

» Если прохладнее, значит работает; если вы этого не сделаете, это не так », — говорит он. Фактически, обмахивание веером — одно из немногих занятий, для которых «Если тебе нравится, делай это» — правильный и ответственный совет.

Почему дует ветер? | NOAA SciJinks — Все о погоде

Краткий ответ:

Газы перемещаются из областей с высоким давлением в области с низким давлением. И чем больше разница между давлениями, тем быстрее воздух будет двигаться от высокого к низкому давлению.Этот порыв воздуха — это ветер, который мы испытываем.

Ветер — это часть погоды, с которой мы сталкиваемся постоянно, но почему это происходит на самом деле? В один прекрасный день воздух будет неподвижен, а в следующий раз сильные порывы ветра могут повалить деревья. Что здесь происходит?

Основная причина ветра немного удивительна. На самом деле это температура . В частности, разница в температуре в разных регионах.

Как из-за разницы температур дует ветер?

Газы, из которых состоит наша атмосфера, делают интересные вещи при изменении температуры. Когда газы нагреваются, атомы и молекулы движутся быстрее, расширяются и поднимаются. Вот почему пар, выходящий из кастрюли с кипящей водой, всегда идет вверх. Когда воздух холоднее, газы становятся медленнее и ближе друг к другу. Холодный воздух опускается.

Солнце нагревает воздух, но это происходит неравномерно. Поскольку солнце падает на разные части Земли под разными углами, и поскольку на Земле есть океаны, горы и другие особенности, некоторые места теплее других.Из-за этого мы получаем карманы теплого и холодного воздуха.

Разные температуры приводят к разному давлению

Поскольку газы ведут себя по-разному при разных температурах, это означает, что вы также получаете карманы с высокого давления и карманы с низкого давления . В областях с высоким давлением газов в воздухе больше. В зонах низкого давления газы немного более разбросаны.

Вы могли подумать, что теплый воздух приведет к более высокому давлению, но на самом деле все наоборот.Поскольку теплый воздух поднимается вверх, он оставляет за собой область низкого давления , за собой .

Вот и ветер!

Теперь мы переходим к той части, где бывает ветер. Газы перемещаются из зон высокого давления в зоны низкого давления. И чем больше разница между давлениями, тем быстрее воздух будет двигаться от высокого к низкому давлению. Этот порыв воздуха — это ветер, который мы испытываем.

Но почему воздух вообще движется?

Вам может быть интересно, почему воздух вообще переходит с высокого давления на низкое.Это то, что происходит в природе постоянно: вещи всегда стараются уравновеситься. Он называется диффузия .

Это делают даже люди! Когда люди садятся в автобус, все ли они сначала садятся на одну сторону автобуса? Сидят ли незнакомцы рядом друг с другом, когда много открытых мест? Ни за что. Люди хотят разойтись как можно шире.

В следующий раз, когда вы почувствуете дуновение ветра, подумайте, куда он идет, и какие температура и давление заставляют его это делать.

Хотите узнать больше о ветре? Узнайте, как образуются ураганы и торнадо. А затем ознакомьтесь с симуляциями, в которых вы можете создать ураган и управлять торнадо.

Температура в духовке и описание процесса выпечки — Пекарня Колибри

Духовка — это, пожалуй, самый важный фактор, влияющий на результат выпечки.

Выпечка при правильной температуре важна не только для определения времени выпечки, но также влияет на конечное качество ваших тортов.

Что мне нужно знать о выпечке в духовках без вентилятора и в духовках с вентилятором?

Мы тестируем наши рецепты в обычной духовке без вентилятора. Если вы выпекаете в духовке с вентилятором, помните, что в этих духовках готовятся быстрее. Обратитесь к буклету с инструкциями производителя вашей духовки, чтобы получить лучший совет с точки зрения изменения времени выпечки.

Как правило, если вы потеряли эти инструкции, вы можете снизить температуру на 10 процентов, чтобы немного снизить температуру.Просто следуйте рецепту, как написано, и запекайте за то же время приготовления.

Мои кексы превращаются в вулканы, что происходит?

Это происходит при слишком высокой температуре и часто возникает в духовках с вентилятором, которые более горячие, чем обычные духовки.

В следующий раз, когда будете печь кексы, выключите духовку примерно на 10 процентов и посмотрите, как у вас получается.

Как проверить температуру в духовке?

Вы можете проверить, насколько горячая (или остыла) ваша духовка, с помощью термометра для духовки.Мы клянемся этим комплектом, и это может иметь большое значение для вашей выпечки, если вы знаете, что ваша духовка правильно откалибрована для температуры, предложенной в рецепте.

Их дешево купить и поставить на полку в духовке или повесить на полку. Чтобы использовать термометр для духовки, поместите термометр в духовку, прежде чем включать ее. Закройте дверцу духовки, включите духовку и дайте ей разогреться. Когда она нагреется, посмотрите на термометр духовки через окошко.

Он даст вам точные показания, чтобы вы могли повышать или понижать температуру оттуда, чтобы получить правильную температуру, рекомендованную рецептом.

Когда вы уверены, что показания температуры на термометре постоянны и соответствуют показаниям, предложенным в вашем рецепте, используйте перчатки для духовки, чтобы вынуть термометр из духовки и дать ему остыть в безопасном и недоступном для детей месте. очень горячо.

Поставьте формы в духовку, и вы готовы приступить к выпечке.

Как температура в духовке влияет на окончательную выпечку?

Как правило, более высокая температура придаст бисквитному или кондитерскому изделию более золотистую и хрустящую корочку, а низкая температура сделает бисквит более пушистым и менее золотистым.Некоторым пирогам требуется золотистая корочка, а другим — мягко приготовленным и воздушным.

Разработчики рецептов всегда проверяют, какие температуры дают желаемую конечную текстуру, поэтому доверяйте рецепту в первую очередь и корректируйте в следующий раз, если вы предпочитаете немного другой результат.

Какие еще факторы влияют на температуру и время приготовления при следовании рецепту?

Существует множество различных факторов, которые определяют, насколько быстро или медленно готовится ваша выпечка в духовке.Вот некоторые из них:

1. Вспомогательные вещества — некоторые вещества для выпечки предназначены для активации при определенной температуре, и пироги не начинают подниматься, пока эта температура не будет достигнута. Для получения дополнительной информации о привлечении агентов посетите нашу страницу часто задаваемых вопросов здесь.
2. Форма и объем емкости — глубина емкости и объем смеси, а также форма емкости влияют на скорость ее приготовления. Например, гигантский кекс по краям склонен к высыханию, поскольку они намного тоньше, чем центр торта.
3. Влагосодержание и жирность — в зависимости от рецепта вы можете захотеть сохранить там немного влаги (например, пирожные и печенье), или вы можете захотеть, чтобы вся влага испарилась и ваша выпечка оставалась хрустящей (например, выпечка).
4. Ингредиенты и pH — высокое содержание сахара и крахмала может означать, что пирожные более склонны к быстрой карамелизации (и подгоранию), поэтому температуру приготовления часто регулируют в зависимости от ингредиентов. Пироги с большим количеством яиц имеют более высокое содержание белка, и это может сделать торт эластичным, если выпекать его при слишком высокой температуре.

Как приготовить тестовые торты?

Возьмите металлическую шпажку и вставьте ее в центр губки. Если банка неглубокая, вставьте ее под углом, чтобы покрыть большую часть шампура. Если вы можете аккуратно удалить его с губки, готово.

Если смесь для выпечки осталась на вертеле, дайте ей пропекться еще несколько минут и повторите попытку. При легком нажатии губка должна отскочить назад, и визуально губка должна иметь хороший цвет.

Таблица преобразования температуры печи

Gas Mark 1 — 140 ° C / 120 ° F / 140 ° C Вентилятор (температура охлаждения)

Gas Mark 2 — 300 ° F / 150 ° C / 130 Вентилятор

Gas Mark 3 — 325 ° F / 170 ° C / 150 Вентилятор (умеренная температура)

Gas Mark 4 — 350 ° F / 180 ° C / 160 Вентилятор

Gas Mark 5 — 375 ° F / 190 ° C / 170 Вентилятор (умеренно высокая температура)

Gas Mark 6 — 400 ° F / 200 ° C / 180 Вентилятор

Gas Mark 7 — 220 ° C / 200 Вентилятор (горячая температура)

Gas Mark 8 — 450 ° F / 230 ° C / 210 Вентилятор

Gas Mark 9-475 ° F / 240 ° C / 220 Вентилятор (очень высокая температура)

Таблица преобразования круглого олова / квадратного олова

Квадратные банки вмещают примерно на 25% больше, чем круглые банки того же размера.Вы можете решить, как превратить форму из круглой формы в квадратную, уменьшив ее на 1 дюйм / 2 см.

Благодаря краям в квадратных формах торты могут сушить по углам, так что будьте осторожны.

Круглая банка / квадратная банка

6 дюймов или 15 см / 5 дюймов или 13 см

8 дюймов или 20 см / 7 дюймов или 18 см

9 дюймов или 23 см / 8 дюймов или 20 см

11 дюймов или 28 см / 10 дюймов или 25,5 см

Перейдите по ссылке на наше общее руководство по странице преобразования торта.Для быстрого устранения неполадок посетите нашу страницу часто задаваемых вопросов по выпечке.

Не позволяйте летнему зною сбивать вас с ног

Что такое тепловые заболевания и как их предотвратить

Писатель / д-р Карен Кревье, врач скорой медицинской помощи в больнице IU Health West Hospital

Между высокими температурами и влажностью на Среднем Западе июль, как правило, один из самых жарких месяцев в году. Важно знать о заболеваниях, связанных с жарой, и о том, как их предотвратить, при этом наслаждаясь летним солнцем.

Тепловые болезни

Существует четыре основных тепловых заболевания: тепловой удар, тепловое истощение, тепловые судороги и тепловая сыпь. Тепловой удар возникает, когда тело не может контролировать свою температуру из-за чрезмерной жары и влажности. Во время теплового удара вашему телу трудно остыть, потому что пот не испаряется так быстро, как обычно. Симптомы теплового удара включают тошноту, головную боль, учащенный пульс, снижение уровня сознания и даже галлюцинации.У пациентов с тепловым ударом может быть потная или сухая кожа.

Тепловое истощение — это результат того, что ваше тело теряет соль и воду из-за чрезмерного потоотделения. Симптомы включают сильное потоотделение, мышечные спазмы, головную боль, тошноту, бледность кожи, учащенное и поверхностное дыхание и головокружение. Тепловой удар и истощение — самые серьезные типы заболеваний, связанных с жарой.

Когда мы потеем, наши мышцы также теряют соль и воду, что может вызвать тепловые судороги или мышечную боль. Сильное потоотделение также может раздражать кожу, вызывая тепловую сыпь или небольшие красные бугорки или волдыри на коже.Тепловая сыпь часто появляется на груди и шее.

Лечение

Если вы или кто-то из ваших знакомых страдает тепловым ударом, немедленно позвоните 9-1-1. Лучшим способом лечения теплового удара является ледяная ванна для охлаждения тела. Хотя это наиболее эффективный метод охлаждения, в настоящий момент это может оказаться сложной задачей. Чтобы помочь телу остыть, обрызгайте его водой, а затем воспользуйтесь вентиляторами, чтобы облегчить испарение. Во время теплового удара люди подвержены риску судорог.Убедитесь, что они лежат и находятся в безопасном положении.

При тепловом истощении и судорогах найдите прохладное место в помещении или тенистое место на улице, чтобы сесть, отдохнуть и попить воды. Охлаждение кожи также поможет избавиться от тепловой сыпи. Если симптомы продолжают ухудшаться, несмотря на охлаждение, обратитесь к лечащему врачу для записи на прием.

Профилактика

Один из лучших способов предотвратить тепловые заболевания — избегать обезвоживания. Установите будильник каждые 15 минут как напоминание о необходимости пить воды на улице в условиях сильной жары и влажности.Помимо обезвоживания, важно делать перерывы в затененном, прохладном месте и следить за своей одеждой. Выбирайте свободную дышащую одежду, которая не прилипает к коже.

Малая интерферирующая РНК сбивает фактор теплового шока-1 (HSF-1) и усиливает провоспалительную активацию NF-κB и AP-1 в гладкомышечных клетках сосудов | Сердечно-сосудистые исследования

Аннотация

Цели: Тепловой шок и повышенная экспрессия белков теплового шока подавляют активацию провоспалительного фактора транскрипции NF-κB.Мы предположили, что подавление экспрессии фактора теплового шока-1 (HSF-1) с помощью технологии РНКи усугубит вызванное ангиотензином (Ang) II воспалительное повреждение гладкомышечных клеток сосудов (VSMC).

Методы: Клетки аорты А10 крысы и клетки гладких мышц кишечника человека выращивали без трансфекции или с трансфекцией малой интерферирующей РНК HSF-1 (миРНК) или миРНК отрицательного контроля. Клетки стимулировали Ang II (100 нМ) для активации сигнального пути NF-κB.

Результаты: siRNA HSF-1 значительно подавляла экспрессию HSF-1 и одного из последующих белков теплового шока (Hsp), Hsp27, в обеих клеточных линиях. SiRNA HSF-1 также влияла на клетки, подвергшиеся воздействию теплового шока или обработки Ang II. Ang II индуцировал активацию NF-κB и AP-1 в нетрансфицированных VSMC, однако Ang II индуцировал значительно более высокую активность этих провоспалительных факторов транскрипции в клетках, трансфицированных HSF-1 siRNA. Контрольная миРНК не оказывала явного влияния на экспрессию HSF-1 и Hsp27 и на активацию NF-κB и AP-1, индуцированную Ang II.

Выводы: Эти данные показывают, что подавление HSF-1 усугубляет вызванное Ang II воспаление в VSMC, и предполагает, что белки теплового шока защищают от воспалительного повреждения путем подавления провоспалительных факторов транскрипции, таких как NF-κB и АП-1.

См. Редакцию А.А. Knowlton (страницы 7–8) в этом выпуске.

1 Введение

Белки теплового шока (Hsps) представляют собой семейство высококонсервативных молекулярных шаперонов, которые поддерживают растворимость белков, функцию цитоскелета и клеточный гомеостаз, а также защищают клетки от стресса окружающей среды и патофизиологических повреждений [1–3].У крыс тепловой шок (42 ° C в течение 15 минут) вызывает значительно повышенные уровни Hsp70 в сердце, и это связано с улучшением функционального восстановления сердца после глобальной ишемии [4]. Трансгенные мыши, экспрессирующие высокие уровни индуцибельного Hsp70 человека, продемонстрировали прямую роль Hsp70 в защите миокарда и нейронов гиппокампа от ишемического повреждения [5,6]. Недавно было показано, что лечение тепловым шоком с индуцированными высокими уровнями Hsp70 и Hsp27 защищает от индуцированной ангиотензином (Ang) II гипертензии и воспаления в аорте и сердце [7,8].Однако вопрос о том, регулируют ли повышенные уровни Hsps или другие изменения в экспрессии генов напрямую пути воспалительного внутриклеточного повреждения, остается открытым.

Различные гены теплового шока регулируются факторами транскрипции теплового шока (HSF), которые экспрессируются конститутивно [9]. В настоящее время идентифицировано четыре различных HSF, то есть HSF-1, HSF-2, HSF-3 и HSF-4, каждый из которых имеет различные характеристики. HSF-1 регулирует транскрипцию генов Hsp после экологического или патофизиологического стресса, который денатурирует или осаждает клеточные белки.HSF-2 и HSF-3 регулируют транскрипцию генов Hsp в определенных тканях, претерпевая процессы дифференцировки и развития, а HSF-3 был описан только у кур [9,10]. HSF-4 структурно связан с тремя другими HSF, однако он функционально отличается и не реагирует на стрессы, такие как тепло [11]. Более того, транскрипция генов Hsp70, Hsp90 и Hsp27 снижается при сверхэкспрессии HSF-4 [11]. Было высказано предположение, что HSF-4 не является фактором транскрипции, потому что он лишен карбоксиконцевого повтора, общего для HSF-1, HSF-2 и HSF-3 [11].HSF-1 является основным стресс-чувствительным HSF, опосредующим реакцию теплового шока в клетках млекопитающих [12]. HSF-1 конститутивно локализован в цитозоле и ядре и поддерживается в инактивированной форме за счет связывания с конститутивным белком теплового шока 70 кДа (Hsc70) или Hsp90. При различных формах клеточного стресса, таких как тепло, гипоксия, этанол и арсенит натрия, которые денатурируют белки, конститутивные Hsps рекрутируются на денатурированные белки, высвобождая HSF-1. Свободный HSF-1 фосфорилируется и перемещается из цитозольного компартмента в ядерный и организуется в активные ДНК-связывающие гомотримеры [9].

В настоящем исследовании мы использовали технологию РНК-интерференции (РНКи) для подавления экспрессии гена HSF-1 в гладкомышечных клетках сосудов (VSMC). Мы предположили, что (1) нокдаун HSF-1 также нарушит экспрессию нижележащих генов Hsps, и (2) нокдаун HSF-1 усугубит вызванное Ang II воспалительное повреждение VSMC. Такие данные подтверждают мнение о том, что белки теплового шока играют прямую роль в подавлении индуцированных Ang II воспалительных сигнальных путей и последующего воспаления.

2 метода

2,1 Культура клеток

Клеточная линия

VSMC, полученная из аорты плода крысы (клетки A10), была получена из Американской коллекции типовых культур (ATCC, Rockville, MD, Cat # CRL 1476). Клетки гладкой мускулатуры кишечника человека (клетки HISM) также были получены из АТСС (каталожный номер CRL 1692) и считаются клеточной линией VSMC [13]. Клетки культивировали рутинно в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS), пенициллин (50 Ед / мл) и стрептомицин (50 мкг / мл) при 37 ° C в 5% увлажненной атмосфере. CO ₂ и 95% воздуха.

2.2 Производство и трансфекция РНКи

миРНК HSF-1 была химически синтезирована компанией Ambion (Остин, Техас). Метод Эльбашира и соавт. [14] использовали для определения следующей целевой последовательности: 5′-AAGAGAAAGATCCCTCTGATG-3 ‘. Целевая последовательность находится в открытой рамке считывания гена HSF-1 крысы (номер доступа: xm_343270), на 613 нуклеотидов ниже стартового кодона. Отрицательный контроль миРНК, дуплекс 21-нуклеотидной РНК без известной гомологии последовательностей, также был приобретен у Ambion (каталожный № 4611).

Трансфекция миРНК в клетки была достигнута с использованием реагента олигофектамина (Invitrogen, Burlington, ON). Вкратце, 2 × 10 ⁴ клеток / лунку помещали в 24-луночные планшеты в течение ночи для достижения 50-70% конфлюэнтных монослоев. В день трансфекции культивированные клетки промывали DMEM без сыворотки или антибиотиков. Исходный олигонуклеотид и олигофектамин в 20 мкМ разбавляли и осторожно смешивали с DMEM для достижения конечной концентрации олигофектамина (рекомендация производителя, 2 мкл / лунка) и 1 × и 2 × для миРНК (1 × концентрация составляла 133 нМ).Затем в каждую лунку добавляли комплексы олигонуклеотид-олигофектамин и клетки инкубировали при 37 ° C в течение 4 часов. Затем к клеткам добавляли FBS для достижения конечной концентрации 10% в DMEM и инкубировали в течение 44 часов при 37 ° C в инкубаторе CO ₂ .

2.3 Анализ МТТ для определения жизнеспособности клеток

После трансфекции siRNA или фиктивной обработки культуральную среду заменяли на нормальную среду для выращивания с 450 мкл DMEM с 10% FBS. Тетразолиевая соль МТТ (Sigma, St.Louis, MI, Cat # M2128) 50 мкл, 5 мг / мл в PBS добавляли к клеткам до конечной концентрации 0,5 мг / мл и клетки инкубировали при 37 ° C в течение 4 часов. МТТ превращали в кристаллы формазана жизнеспособными клетками. Кристаллы формазана растворяли в 500 мкл солюбилизирующего буфера (0,1 М HCl и 10% SDS) путем инкубации клеток при 37 ° C в течение 1 часа. Оптическую плотность считывали при 562 нм в считывающем устройстве для микропланшетов, FL _x 800 (Bio-Tek instrument Inc., Winooski, VT). Жизнеспособность клеток выражали в процентах от ложно обработанных клеток.

2,4 Ангиотензин II и лечение тепловым шоком

После 48 часов трансфекции миРНК как трансфицированные, так и нетрансфицированные (фиктивные) клетки культивировали в течение 1 дня в бессывороточной среде DMEM для остановки роста перед обработкой Ang II или обработкой HS. Человеческий ангиотензин II (Sigma, № по каталогу A9525) добавляли в концентрации 100 нмоль / л. Для обработки тепловым шоком после остановки роста клетки инкубировали при 44 ° C в течение 20 мин в инкубаторе и восстанавливали при 37 ° C. Клетки собирали для исследования Hsp27, NF-κB и AP-1 в разные моменты времени после лечения ангиотензином II или HS.

2.5 Иммуноцитохимия

Для иммуноцитохимии клетки инкубировали с кроличьими поликлональными антителами против HSF-1 (1: 2000, StressGen, Виктория, Канада, Cat # SPA-901) или кроличьими поликлональными антителами против Hsp27 (1: 2000, StressGen, Cat # SPA -801). Первичные антитела HSF-1 и Hsp27 реагировали с вторичным антителом, козьим антикроличьим, конъюгированным с alexa-546 (1: 500, Molecular Probes, Юджин, штат Орегон). Цифровые изображения были получены с помощью камеры Zeiss Axiovert 200 и AxioCam HRc и системы захвата изображений.

2.6 Приготовление белковых экстрактов

Белков из различных условий, описанных выше, собирали и объединяли из 6 лунок 24-луночных планшетов, и все процедуры экстракции белков выполняли на льду. Клетки промывали холодным 0,1 М PBS и лизировали 50 мкл ледяного буфера A [10 мМ HEPES (pH 7,9), 1,5 мМ MgCl ₂ , 10 мМ KCl, 1 мМ 1,4-дитиотреитол (DTT), 0,5. мМ PMSF, 10 мкг / мл лейпептина, 10 мкг / мл апротинина, 0,1% Triton X-100]. После 10-минутной инкубации на льду гомогенаты центрифугировали при 4000 g в течение 4 минут при 4 ° C.Супернатанты хранили как цитоплазматические экстракты при -70 ° C. Осадки ресуспендировали в 40 мкл буфера B [20 мМ HEPES (pH 7,9), 25% глицерина, 420 мМ NaCl, 1,5 мМ MgCl ₂ , 0,2 мМ EDTA, 1 мМ DTT, 0,5 мМ PMSF, 10 мкг / мл лейпептина. , 10 мкг / мл апротинина]. Суспензию инкубировали 30 мин на льду. После центрифугирования при 20000 g в течение 15 минут при 4 ° C супернатанты аликвотами переносили в новые пробирки и хранили при -70 ° C до анализа. Концентрации белка определяли методом Lowry et al.[15].

2,7 Вестерн-анализ

Пробы белка (10 мкг) использовали для Вестерн-анализа по методу Chen et al. [7,8]. Блоты реагировали с антителом против HSF-1 (1: 5000), антителом против Hsp27 (1: 5000) или крысиным моноклональным антителом против HSF-2 (1: 5000, StressGen, Cat # SPA-960), а затем инкубацией с соответствующим конъюгированным с пероксидазой вторичным антителом (1: 2000, Vector Laboratories, Burlingame, CA). Уровень HSF-1, HSF-2 и Hsp27 определяли с помощью системы усиленной хемилюминесценции (Amersham Pharmacia) в соответствии с протоколом производителя, а затем подвергали воздействию пленок или детектировали с помощью системы Storm (Storm 840, Amersham Biosciences, Саннивейл, Калифорния). .Уровни белка определяли количественно сканирующей денситометрией с использованием систем анализа изображений (Scion Corp, Frederick, ML). Равные количества загрузки белка на дорожку проверяли окрашиванием амидным черным или вестерн-блоттингом с кроличьими поликлональными анти-актиновыми антителами (1: 200, Sigma, № по каталогу A2066).

2.8 Анализ сдвига электрофоретической подвижности (EMSA)

консенсусных олигонуклеотидных последовательностей NF-κB и AP-1 (5′-AGTGAGGGACTTCCCAGGC-3 ‘и 5′-CGCTTGATGAGTCAGCCGGAA-3′, соответственно) (Promega, Madison, WI) были использованы для EMSA в соответствии с протоколом, ранее описанным Chen et al. .[7,8]. Вкратце, реакции связывания, каждая из которых содержала 10 мкг ядерных экстрактов, разделяли на неденатурирующем 4% акриламидном геле. Гели сушили на бумаге Whatman 3 MM и экспонировали на рентгеновской пленке при -70 ° C в течение ночи. Чтобы установить специфичность реакции, конкурентные анализы с 50-кратным избытком немеченых специфических олигонуклеотидов-конкурентов и неспецифического конкурентного олигонуклеотида, SP-1 (5’-ATTCGATCGGGGCGGGGCGAGC-3 ‘) (Promega), проводили путем добавления немеченых зондов 10 мин. перед добавлением меченого зонда.Отрицательные контроли не содержали ядерных экстрактов. Для анализов сверхсдвига 2 мкг анти-p65 (sc-109 X, Santa Cruz Biotechnology, Санта-Крус, Калифорния), анти-p50 (sc-114 X, Santa Cruz Biotechnology) и анти-c-Fos (sc-52 , Santa Cruz Biotechnology), антитела добавляли к экстрактам ядерных белков и инкубировали в течение 1 ч после добавления меченого зонда. Активность связывания ДНК определяли количественно сканирующей денситометрией с использованием систем анализа изображений (Scion Corp).

2.9 Статистический анализ

Данные выражены как среднее ± SEM.Достоверность различий определяли с помощью дисперсионного анализа и теста множественного сравнения post hoc с использованием программного обеспечения SPSS 11.5 (SPSS, Чикаго, Иллинойс). P <0,05 считалось статистически значимым.

3 Результаты

3.1 РНКи подавляет экспрессию HSF-1 и Hsp27 в нестрессированных клетках A10

Иммуноцитохимия для обнаружения экспрессии HSF-1 в VSMC A10 (рис. 1A-E) показала, что существует значительный эффект нокдауна HSF-1 siRNA.В нетрансфицированных (фиктивных) клетках A10 HSF-1 в основном локализовался в ядрах и диффузно распределялся в цитоплазме (рис. 1А). Чтобы исключить эффект самой трансфекции, клетки трансфицировали контрольной миРНК в 1-кратной и 2-кратной дозировке. Не было очевидного влияния контрольной трансфекции siRNA на экспрессию HSF-1 (фиг. 1B, C). При трансфекции siRNA HSF-1 экспрессия HSF-1 снижалась дозозависимым образом (рис. 1D, E). Эффективность трансфекции составляла ~ 90%. Обработка клеток трансфекцией миРНК подавляла жизнеспособность клеток примерно до 70% от жизнеспособности фиктивно обработанных клеток ( P <0.05) (Рис. 1F). Однако не было существенной разницы между контрольной миРНК и обработкой миРНК HSF-1 как при 1-кратной, так и при 2-кратной дозировке.

Рис. 1

siRNA HSF-1 подавляет экспрессию HSF-1 и нижестоящего Hsp27 в клетках A10. (A) Ложно обработанные клетки имели в основном экспрессию HSF-1 в ядерной и диффузной цитоплазме. (B, C) Клетки, обработанные контрольной миРНК в 1 × и 2 × дозировках, соответственно, не имели видимых различий по сравнению с фиктивно обработанными клетками.(D и E) Клетки, обработанные миРНК HSF-1 в 1х и 2х дозах соответственно. Экспрессия HSF-1 подавлялась дозозависимым образом. (F) Жизнеспособность клеток, определенная с помощью анализа МТТ, показала, что трансфекция siRNA подавляла жизнеспособность клеток, однако не было значительной разницы между обработками трансфекции. (G) Вестерн-анализ подтвердил эффект подавления РНКи HSF-1 на экспрессию HSF-1, а также выявил, что миРНК HSF-1 (двукратная доза) подавляла экспрессию Hsp27.(H) Полуколичественная оценка западного анализа. Относительные уровни Hsp90, Hsp70 и Hsp27 были нормализованы до актина. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего и являются репрезентативными для 3 отдельных экспериментов. * P <0,05, ** P <0,01 по сравнению с фиктивным. Масштабная линейка в E = 100 мкм на панелях (A, B, C, D и E).

Рис. 1

миРНК HSF-1 подавляет экспрессию HSF-1 и нижестоящего Hsp27 в клетках A10. (A) Ложно обработанные клетки имели в основном экспрессию HSF-1 в ядерной и диффузной цитоплазме.(B, C) Клетки, обработанные контрольной миРНК в 1 × и 2 × дозировках, соответственно, не имели видимых различий по сравнению с фиктивно обработанными клетками. (D и E) Клетки, обработанные миРНК HSF-1 в 1х и 2х дозах соответственно. Экспрессия HSF-1 подавлялась дозозависимым образом. (F) Жизнеспособность клеток, определенная с помощью анализа МТТ, показала, что трансфекция siRNA подавляла жизнеспособность клеток, однако не было значительной разницы между обработками трансфекции. (G) Вестерн-анализ подтвердил эффект подавления РНКи HSF-1 на экспрессию HSF-1, а также выявил, что миРНК HSF-1 (двукратная доза) подавляла экспрессию Hsp27.(H) Полуколичественная оценка западного анализа. Относительные уровни Hsp90, Hsp70 и Hsp27 были нормализованы до актина. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего и являются репрезентативными для 3 отдельных экспериментов. * P <0,05, ** P <0,01 по сравнению с фиктивным. Масштабная линейка в E = 100 мкм на панелях (A, B, C, D и E).

Вестерн-анализ также подтвердил, что уровень HSF-1 снижался при обработке РНКи. Антитело против HSF-1 распознает один белок 85 кДа в цитоплазме и белки 85 кДа и 95 кДа в ядре, что соответствует молекулярным массам неактивной и активированной форм HSF-1, соответственно, на иммуноблотах SDS-PAGE ( Инжир.1G). SiRNA HSF-1 с 2-кратной дозировкой снижала уровни HSF-1 как в цитоплазме, так и в ядре, однако siRNA HSF-1 с 1-кратной дозой только снижала ядерный уровень HSF-1 (рис. 1G, H). Также было исследовано влияние РНКи HSF-1 на один из следующих белков теплового шока HSF-1, Hsp27. HSF-1 siRNA подавляла экспрессию Hsp27 в клетках A10 при 2-кратной дозировке (рис. 1G, H). HSF-1 siRNA не влияла ни на HSF-2, ни на уровни актина (рис. 1G).

3.2 РНКи подавляет экспрессию HSF-1 и Hsp27 в нестрессированных клетках HISM

HSF-1 локализовался в основном в ядрах нестрессированных клеток HISM.Обработка ложной и контрольной siRNA не привела к явной разнице в экспрессии HSF-1 (фиг. 2A, B). Обе дозы миРНК HSF-1 подавляли экспрессию HSF-1 в клетках HISM как в ядрах, так и в цитоплазме (рис. 2C, D). В нормальных клетках HISM Hsp27 локализован в основном в нуклеоплазме и слегка в цитоплазме (рис. 2E). Контрольная миРНК не оказывала явного влияния на экспрессию Hsp27 в клетках HISM (фиг. 2F). Интересно отметить, что обработка миРНК HSF-1 в дозе 1 × уменьшала ядерную экспрессию Hsp27 (рис.2G) и двукратная доза снижала как ядерную, так и цитоплазматическую экспрессию Hsp27 (фиг. 2H).

Рис. 2

siRNA HSF-1 подавляет экспрессию HSF-1 и Hsp27 в клетках HISM. (A) Ложно обработанные клетки показывают положительную экспрессию HSF-1 в ядерной цитоплазме. (B) Контрольные клетки, обработанные siRNA 1 ×, не показывают видимых различий по сравнению с клетками, обработанными имитацией. (C, D) Клетки, обработанные миРНК HSF-1 в дозозависимых дозах 1 и 2, показывают, что цитоплазма и ядерная экспрессия HSF-1 снижены дозозависимым образом.(E) Ложно обработанные клетки показывают положительную экспрессию Hsp27 в ядерной цитоплазме. (F) Контрольные клетки, обработанные siRNA 1 ×, не показывают видимых различий по сравнению с клетками, обработанными имитацией. (G, H) Клетки, обработанные миРНК HSF-1 в дозах 1 и 2, показывают, что экспрессия Hsp27 в ядре и цитоплазме снижена дозозависимым образом. Масштабная линейка на панелях (D и H) = 100 мкм в целом.

Рис. 2

миРНК HSF-1 подавляет экспрессию HSF-1 и Hsp27 в клетках HISM. (A) Ложно обработанные клетки показывают положительную экспрессию HSF-1 в ядерной цитоплазме.(B) Контрольные клетки, обработанные siRNA 1 ×, не показывают видимых различий по сравнению с клетками, обработанными имитацией. (C, D) Клетки, обработанные миРНК HSF-1 в дозозависимых дозах 1 и 2, показывают, что цитоплазма и ядерная экспрессия HSF-1 снижены дозозависимым образом. (E) Ложно обработанные клетки показывают положительную экспрессию Hsp27 в ядерной цитоплазме. (F) Контрольные клетки, обработанные siRNA 1 ×, не показывают видимых различий по сравнению с клетками, обработанными имитацией. (G, H) Клетки, обработанные миРНК HSF-1 в дозах 1 и 2, показывают, что экспрессия Hsp27 в ядре и цитоплазме снижена дозозависимым образом.Масштабная линейка на панелях (D и H) = 100 мкм в целом.

3.3 РНКи подавляет экспрессию Hsp27 в клетках A10, обработанных тепловым шоком или Ang II

Для исследования влияния РНКи на клетки, подвергшиеся стрессу, VSMC A10, трансфицированные siRNA HSF-1, обрабатывали тепловым шоком или Ang II. HSF-1 siRNA значительно подавляла экспрессию Hsp27 ( P <0,05) в клетках, не обработанных HS (0) и обработанных HS (фиг. 3A). В нетрансфицированных (фиктивных) клетках A10 обработка HS оказывала лишь минимальный эффект на экспрессию Hsp27, т.е.е. Hsp27 увеличивался только через 12 ч после обработки HS по сравнению с клетками, не обработанными HS (0). По сравнению с нетрансфицированными (фиктивными) клетками, трансфекция контрольной siRNA не оказывала явного влияния на экспрессию Hsp27.

Рис. 3

Вестерн-блот-анализ Hsp27 в (А) тепловом шоке или (В) обработанных ангиотензином II клетках А10. (A) Клетки A10 не подвергали трансфекции (имитация) или трансфицировали контрольной миРНК 1х или HSF-1 миРНК 2х в течение 2 дней с последующим 1 днем ​​бессывороточной инкубации перед обработкой HS.Клетки собирали для анализа без обработки HS (0) или через 6, 12, 24 или 48 часов после обработки HS. Обработка HS привела к умеренному увеличению экспрессии Hsp27 только через 12 ч после обработки HS. Трансфекция миРНК HSF-1 значительно подавляла экспрессию Hsp27 в необработанных HS (0) и обработанных HS клетках с восстановлением от 6 до 48 часов. По сравнению с имитацией трансфекция контрольной siRNA не оказывала заметного влияния на экспрессию Hsp27. (B) Клетки A10 не подвергали трансфекции (имитация) или трансфицировали контрольной миРНК 1х или HSF-1 миРНК 2х в течение 2 дней с последующим 1 днем ​​бессывороточной инкубации перед обработкой Ang II.Клетки собирали для анализа без обработки Ang II (0) или через 0,25, 1, 2, 6 или 24 часа обработки Ang II. В нетрансфицированных клетках (фиктивные) обработка Ang II увеличивала экспрессию Hsp27 через 1-6 часов. Трансфекция siRNA HSF-1 значительно подавляла экспрессию Hsp27 в Ang II, не обработанном (0), и обработанном клетками Ang II в течение от 0,25 до 24 часов. По сравнению с имитацией трансфекция контрольной siRNA не оказывала заметного влияния на экспрессию Hsp27. *, ** P <0,05 и 0,01 по сравнению с фиктивным без обработки HS или Ang II.#, ## P <0,05 и 0,01 HSF-1 siRNA, обработанная по сравнению с фиктивной или контрольной siRNA, обработанной в каждый момент времени. Экспрессию Hsp27 нормализовали до уровня актина, и эксперименты повторяли три раза.

Рис. 3

Вестерн-блот-анализ Hsp27 в (A) тепловом шоке или (B) обработанных ангиотензином II клетках A10. (A) Клетки A10 не подвергали трансфекции (имитация) или трансфицировали контрольной миРНК 1х или HSF-1 миРНК 2х в течение 2 дней с последующим 1 днем ​​бессывороточной инкубации перед обработкой HS.Клетки собирали для анализа без обработки HS (0) или через 6, 12, 24 или 48 часов после обработки HS. Обработка HS привела к умеренному увеличению экспрессии Hsp27 только через 12 ч после обработки HS. Трансфекция миРНК HSF-1 значительно подавляла экспрессию Hsp27 в необработанных HS (0) и обработанных HS клетках с восстановлением от 6 до 48 часов. По сравнению с имитацией трансфекция контрольной siRNA не оказывала заметного влияния на экспрессию Hsp27. (B) Клетки A10 не подвергали трансфекции (имитация) или трансфицировали контрольной миРНК 1х или HSF-1 миРНК 2х в течение 2 дней с последующим 1 днем ​​бессывороточной инкубации перед обработкой Ang II.Клетки собирали для анализа без обработки Ang II (0) или через 0,25, 1, 2, 6 или 24 часа обработки Ang II. В нетрансфицированных клетках (фиктивные) обработка Ang II увеличивала экспрессию Hsp27 через 1-6 часов. Трансфекция siRNA HSF-1 значительно подавляла экспрессию Hsp27 в Ang II, не обработанном (0), и обработанном клетками Ang II в течение от 0,25 до 24 часов. По сравнению с имитацией трансфекция контрольной siRNA не оказывала заметного влияния на экспрессию Hsp27. *, ** P <0,05 и 0,01 по сравнению с фиктивным без обработки HS или Ang II.#, ## P <0,05 и 0,01 HSF-1 siRNA, обработанная по сравнению с фиктивной или контрольной siRNA, обработанной в каждый момент времени. Экспрессию Hsp27 нормализовали до уровня актина, и эксперименты повторяли три раза.

миРНК HSF-1 значительно подавляла экспрессию Hsp27 ( P <0,05) в клетках, не обработанных Ang II и Ang II (фиг. 3B). В нетрансфицированных (фиктивных) клетках A10 обработка Ang II в течение 1-6 часов значительно увеличивала экспрессию Hsp27. По сравнению с нетрансфицированными (фиктивными) клетками, трансфекция контрольной siRNA не оказывала явного влияния на экспрессию Hsp27.

3.4 Эффект подавления экспрессии HSF-1 на Ang II-индуцированную активацию NF-κB

В нетрансфицированных (фиктивных) клетках обработка Ang II индуцировала значительную активацию NF-κB через 6 и 24 часа обработки ( P <0,05) как в клетках A10, так и в клетках HISM (фиг. 4). В клетках, трансфицированных siRNA HSF-1, ДНК-связывающая активность NF-κB, индуцированная Ang II, была значительно выше ( P <0,05) через 6 и 24 часа обработки Ang II по сравнению с таковой у нетрансфицированных (фиктивных) клеток. (Инжир.4). Не было явной разницы в контрольных клетках, трансфицированных siRNA, по сравнению с нетрансфицированными (фиктивными) клетками без обработки Ang II или с обработкой Ang II в течение 6 часов.

Рис. 4

Эффект подавления экспрессии HSF-1 на Ang II-индуцированную активацию ядерного фактора (NF) -κB. (A) Ячейки A10. (B) клетки HISM. Ang II индуцировал активацию NF-κB как в клетках A10, так и в HISM после обработки Ang II в течение 6 и 24 часов. Ang II индуцировал значительно более высокую активацию NF-κB в HSF-1 siRNA 2 × нокдаун клетках.Контрольная siRNA 1 × не оказывала явного влияния на активацию NF-κB, индуцированную Ang II. Конкурентный анализ подтвердил специфичность комплексов для NF-κB. Комплексы NF-κB были скомпрометированы добавлением антитела против p65 и p50 в A10 и были суперсмещены в клетках HISM. *, ** P <0,05 и 0,01 по сравнению с фиктивным без обработки Ang II, соответственно. #, ## P <0,05 и 0,01 HSF-1, обработанная миРНК, по сравнению с фиктивной или контрольной обработанной миРНК, соответственно. Данные представляют 3 отдельных эксперимента.

Рис. 4

Эффект подавления экспрессии HSF-1 на Ang II-индуцированную активацию ядерного фактора (NF) -κB. (A) Ячейки A10. (B) клетки HISM. Ang II индуцировал активацию NF-κB как в клетках A10, так и в HISM после обработки Ang II в течение 6 и 24 часов. Ang II индуцировал значительно более высокую активацию NF-κB в HSF-1 siRNA 2 × нокдаун клетках. Контрольная siRNA 1 × не оказывала явного влияния на активацию NF-κB, индуцированную Ang II. Конкурентный анализ подтвердил специфичность комплексов для NF-κB.Комплексы NF-κB были скомпрометированы добавлением антитела против p65 и p50 в A10 и были суперсмещены в клетках HISM. *, ** P <0,05 и 0,01 по сравнению с фиктивным без обработки Ang II, соответственно. #, ## P <0,05 и 0,01 HSF-1, обработанная миРНК, по сравнению с фиктивной или контрольной обработанной миРНК, соответственно. Данные представляют 3 отдельных эксперимента.

3.5 Эффект подавления экспрессии HSF-1 на Ang II-индуцированную активацию AP-1

В нетрансфицированных (фиктивных) клетках A10 обработка Ang II в течение 6 и 24 часов также индуцировала активацию AP-1 (рис.5А). Хотя обработка РНКи не вызывала значительно более высокой активности АР-1 через 6 часов по сравнению с фиктивной, обработка миРНК HSF-1 удваивала индуцированную Ang II активацию АР-1 через 24 часа. В нетрансфицированных (фиктивных) клетках HISM Ang II индуцировал активацию AP-1 только через 24 часа обработки (фиг. 5B). Напротив, в клетках, трансфицированных siRNA HSF-1, Ang II индуцировал значительно повышенную активацию AP-1 как через 6, так и через 24 часа обработки ( P <0,01). Кроме того, обработка миРНК HSF-1 значительно увеличилась ( P <0.01) Активация AP-1 через 6 и 24 часа обработки Ang II по сравнению с нетрансфицированными (фиктивными) клетками. Не было явной разницы в контрольных клетках, трансфицированных siRNA, по сравнению с нетрансфицированными (фиктивными) клетками без обработки Ang II или с обработкой Ang II в течение 6 часов.

Рис. 5

Эффект подавления экспрессии HSF-1 на Ang II-индуцированную активацию AP-1. (A) Ячейки A10. Ang II индуцировал активацию AP-1 после обработки в течение 6 и 24 часов. Ang II индуцировал значительно более высокую активацию AP-1 в siRNA HSF-1 в 2 × нокдаун клетках через 24 часа обработки ( P <0.05). (B) Ang II активировал AP-1 только через 24 часа в ложно обработанных клетках HISM, однако Ang II активировал AP-1 на значительно более высоком уровне как через 6, так и через 24 часа обработки в клетках, обработанных HSF-1 siRNA 2x. ( P <0,05). Контрольная миРНК 1х не оказывала заметного влияния на активацию АР-1, индуцированную Ang II. Конкурентный анализ подтвердил специфичность комплексов к АР-1. *, ** P <0,05 и 0,01 по сравнению с фиктивным без обработки Ang II, соответственно. ## P <0,01 Обработанная миРНК HSF-1 по сравнению сфиктивная или контрольная siRNA, обработанная. Данные представляют 3 отдельных эксперимента.

Рис. 5

Эффект подавления экспрессии HSF-1 на Ang II-индуцированную активацию AP-1. (A) Ячейки A10. Ang II индуцировал активацию AP-1 после обработки в течение 6 и 24 часов. Ang II индуцировал значительно более высокую активацию AP-1 в siRNA HSF-1 в 2 × нокдаун клетках через 24 часа обработки ( P <0,05). (B) Ang II активировал AP-1 только через 24 часа в ложно обработанных клетках HISM, однако Ang II активировал AP-1 на значительно более высоком уровне как через 6, так и через 24 часа обработки в клетках, обработанных HSF-1 siRNA 2x. ( П <0.05). Контрольная миРНК 1х не оказывала заметного влияния на активацию АР-1, индуцированную Ang II. Конкурентный анализ подтвердил специфичность комплексов к АР-1. *, ** P <0,05 и 0,01 по сравнению с фиктивным без обработки Ang II, соответственно. ## P <0,01 Обработанная миРНК HSF-1 по сравнению с обработанной фиктивной или контрольной миРНК. Данные представляют 3 отдельных эксперимента.

4 Обсуждение

В этом исследовании мы обнаружили, что миРНК HSF-1 специфически подавляла экспрессию HSF-1 в двух клеточных линиях, A10 и HISM.Подавление экспрессии HSF-1 с помощью HSF-1 РНКи впоследствии подавляло конститутивную и индуцибельную экспрессию одного белка теплового шока, Hsp27. Это подавление экспрессии HSF-1 и Hsp27 вызвало повышенную активацию NF-κB и AP-1 в VSMC после стимуляции Ang II воспалительных сигнальных путей.

В этом исследовании использовалась миРНК HSF-1 для подавления экспрессии HSF-1 в клетках A10 и HISM. Эта миРНК не оказывала явного влияния на экспрессию HSF-2 или актина и на морфологию клеток.Отрицательный контроль siRNA не влиял на экспрессию HSF-1 или Hsp27. Это предполагает, что РНКи представляет собой специфический и эффективный подход к подавлению экспрессии HSF-1. Поскольку количества олигофектамина были одинаковыми (2 мкл / лунка), и не было явной разницы между обработкой миРНК отрицательным контролем при 1х и 2х дозах на экспрессию HSF-1 и жизнеспособность клеток (рис.1), а также на HSF. -2 (данные не показаны), контрольную миРНК в 1-кратной дозе использовали в качестве контроля в остальных экспериментах.В этом исследовании экспрессия Hsp27 подавлялась в клетках, обработанных siRNA HSF-1, однако не исключена возможность снижения других Hsps.

В этом исследовании siRNA HSF-1 не только подавляла Hsp27 в нестрессированных клетках, но также подавляла уровни Hsp27 в клетках, обработанных HS или Ang II (рис. 3). В соответствии с данными van de Klundert et al. [16], обработка HS оказывала лишь минимальный эффект на экспрессию Hsp27 в нетрансфицированных клетках A10. Однако в клетках, трансфицированных siRNA HSF-1, обработка HS увеличивала уровни Hsp27 через 12 и 24 часа восстановления.Уровни Hsp27 снизились после 48 часов восстановления после обработки HS в клетках, трансфицированных HSF-1 siRNA. Обработка HS, по-видимому, временно противодействует эффекту siRNA HSF-1 через 12 и 24 часа восстановления, а эффект HS, по-видимому, исчезает через 48 часов.

Не совсем ясно, как белки теплового шока регулируют воспаление. Белки теплового шока — это высококонсервативные стрессовые белки, которые защищают клетки и организмы от стресса. Их индукция является быстрой и коррелирует с индукцией толерантности к высокой температуре и другим стрессам в самых разных клетках и организмах [17].Одна из функций белков теплового шока — защищать клетки от поврежденных и нефункциональных белков. Белки теплового шока идентифицируют поврежденные стрессом полипептиды и нацелены на их деградацию посредством внутренних протеолитических путей [17] или реактивируют поврежденные стрессом белки посредством роли молекулярных шаперонов Hsps, таких как Hsp70, Hsp60, Hsp90 и Hsp27 [17]. В стрессовых условиях конститутивные Hsps диссоциируют от HSF, рекрутируются на поврежденные или денатурированные белки и способствуют повторной укладке, сборке и стабилизации денатурированных белков [1,18].

Также накапливаются доказательства того, что Hsps могут взаимодействовать с клеточными сигнальными путями и регулировать их. Например, Hsp70 ингибирует стресс-индуцированный апоптоз, подавляя c-Jun NH ₂ -концевую киназу (JNK) [19] и прокаспазу-9 [20]. Hsp27 является цитопротектором против апоптоза, регулируя каспазу-3 [21] и цитохром c -зависимую активацию прокаспазы-9 [22].

Помимо регуляции апоптотических сигнальных путей, Hsps, по-видимому, также регулируют воспалительные пути передачи сигналов.Было обнаружено, что семейство Hsp60 индуцирует секрецию макрофагами провоспалительных медиаторов, таких как TNF-α, IL-6, IL-12 и оксид азота [23,24]. Напротив, другие исследования продемонстрировали противовоспалительную роль Hsps. Сверхэкспрессия Hsp70 ускоряет выздоровление мышей после эндотоксического заражения [25]. У мышей с дефицитом HSF-1 (HSF — / -), экспрессирующих низкие уровни конститутивного Hsps, экспрессируются большие количества провоспалительных цитокинов, и мыши более восприимчивы к летальности, опосредованной эндотоксином, по сравнению с мышами дикого типа [26].При аутоиммунных заболеваниях назальное введение пептидов Hsp60 180–188 индуцирует высокоэффективную защиту от индуцированного адъювантом артрита за счет образования регуляторных Т-клеток [27]. Также было обнаружено, что микобактериальные Hsp10 [28] и Hsp70 [29] подавляют индуцированный адъювантом артрит. Трансгенная сверхэкспрессия Hsp70 защищает от ишемии / реперфузионного повреждения сердца [5,30] и головного мозга [6,31].

Лечение тепловым шоком с сопутствующими высокими уровнями Hsp70 и Hsp27 и их фосфорилированием также защищает от вызванного Ang II сердечно-сосудистого воспаления, подавляя провоспалительный путь NF-κB [7,8].Наша работа [7,8] и другие [32,33] обнаружили, что обработка HS подавляет активацию NF-κB, ингибируя фосфорилирование и деградацию его ингибитора IκB-α. Обработка HS также ингибирует активацию киназы IκB (IKK) [33] и снижает цитоплазматический уровень IKK-α [8]. Обработка HS также приводит к нерастворимости комплекса IKK [34]. Интересно, что Hsp70 и Hsp27, как было обнаружено, взаимодействуют напрямую с NF-κB, IκB-α, IKK-α и IKK-β в подавлении индуцированной стимулами активации NF-κB [35–37].Кроме того, было показано, что Hsp70, индуцированный обработкой HS, подавляет другие провоспалительные пути, такие как JNK и p38 [38,39]. Хотя Hsps подавляют провоспалительные пути, их роль может быть более общей, если будет обнаружено, что они также регулируют противовоспалительные пути. Hsps может по-разному регулировать провоспалительные и противовоспалительные сигнальные пути [40].

Здесь мы показали, что подавление HSF-1 подавляет экспрессию Hsp27 и это усугубляет вызванное Ang II воспаление, вызывая значительно более высокую активацию NF-κB и AP-1 в VSMC.Это дает убедительные доказательства роли Hsps, и в частности Hsp27, в подавлении вызванного Ang II воспалительного повреждения.

В заключение, нокдаун HSF-1 с последующим подавлением Hsp27 обостряет Ang II-индуцированное воспаление в VSMC, что предполагает новую роль белков теплового шока в регуляции воспаления.

Благодарности

Авторы благодарят Синди Леопольд, Вэй Цзян и Кей Мерфи за их отличную техническую помощь.Мы также благодарим доктора Юндэ Пэна (Первая народная больница Шанхайского университета Цзяотун) за его помощь в разработке siRNA. Эта работа финансировалась за счет гранта Фонда сердца и инсульта Нью-Брансуика Р. Уильяму Карри. Ю Чен получил стипендии от Фонда Киллама и Фонда исследований в области здравоохранения Новой Шотландии.

Список литературы

[1]

Молекулярные шапероны в сворачивании клеточного белка

Природа

1996

381

571

579

[2]

Стресс-белки в воспалении

Ann N Y Acad Sci

1998

851

75

85

[3]

Стресс до смерти: регуляция апоптотических сигнальных путей белками теплового шока

Научно-исследовательский институт СТКЭ

2001

31

RE1

[4]

Реакция на тепловой шок связана с усилением постишемического восстановления желудочков

Circ Res

1988

63

543

549

[5]

и другие.

Трансгенные мыши, экспрессирующие человеческий белок теплового шока 70, улучшили постишемическое восстановление миокарда

J Clin Invest

1995

95

1854

1860

[6]

Трансгенные мыши, экспрессирующие индуцибельный Hsp70 человека, имеют нейроны гиппокампа, устойчивые к ишемическому повреждению

Шапероны клеточного стресса

1997

2

162

167

[7]

Обработка тепловым шоком защищает от гипертонии, вызванной ангиотензином II, и воспаления в аорте

Шапероны клеточного стресса

2004

9

99

107

[8]

Обработка тепловым шоком подавляет индуцированную ангиотензином II активацию пути NF-κB и воспаление сердца: роль в истощении IKK из-за теплового шока?

Am J Physiol

2004

287

х2104

h2114

[9]

Белки теплового шока и патофизиология сердечно-сосудистой системы

Physiol Rev

2001

81

1461

1497

[10]

Характеристика нового фактора транскрипции теплового шока цыплят, фактора теплового шока 3, предполагает новый регуляторный путь

Mol Cell Biol

1993

13

1983

1997

[11]

HSF4, новый член семейства факторов теплового шока человека, у которого отсутствуют свойства активатора транскрипции

Mol Cell Biol

1997

17

469

481

[12]

Молекулярное клонирование и экспрессия фактора теплового шока человека, HSF1

Proc Natl Acad Sci U S A

1991

88

6906

6910

[13]

Влияние инсулина и гепарина на вызванное глюкозой повреждение сосудов в культуре клеток

Почки Int

2000

57

2492

2501

[14]

Анализ функции генов в соматических клетках млекопитающих с использованием малых интерферирующих РНК

Методы

2002

26

199

213

[15]

Измерение белка с помощью реагента фолин-фенол

J Biol Chem

1951

193

265

275

[16]

Альфа-В-кристаллин и hsp25 в клетках сердца новорожденных — различия в клеточной локализации в условиях стресса

евро J Cell Biol

1998

75

38

45

[17]

Функция белков теплового шока при стрессоустойчивости: деградация и реактивация поврежденных белков

Annu Rev Genet

1993

27

437

496

[18]

и другие.

Регулирование олигомеризации Hsp27, функции шаперона и защитной активности против окислительного стресса / фактора некроза опухоли альфа путем фосфорилирования

J Biol Chem

1999

274

18947

18956

[19]

Hsp72 и стресс-киназа c-jun N-концевая киназа регулируют бид-зависимый путь апоптоза, индуцированного фактором некроза опухоли

Mol Cell Biol

2002

22

3415

3424

[20]

и другие.

Белок теплового шока 70 ингибирует апоптоз, предотвращая рекрутирование прокаспазы-9 в апоптосому Apaf-1

Nat Cell Biol

2000

2

469

475

[21]

и другие.

Белок теплового шока 27 увеличивается после андрогенной абляции и играет цитопротекторную роль при гормонорезистентном раке простаты

Рак Res

2004

64

6595

6602

[22]

HSP27 ингибирует цитохром c -зависимую активацию прокаспазы-9

FASEB J

1999

13

2061

2070

[23]

Передний край: белок теплового шока 60 является предполагаемым эндогенным лигандом комплекса толл-подобного рецептора-4

Дж Иммунол

2000

164

558

561

[24]

и другие.

Человеческий белок теплового шока 60 индуцирует созревание дендритных клеток по сравнению с Th2-стимулирующим фенотипом

Дж Иммунол

2003

170

2340

2348

[25]

Ускоренное восстановление после эндотоксического заражения у мышей, предварительно обработанных тепловым шоком

Am J Physiol

2002

282

R1374

R1381

[26]

и другие.

HSF1 необходим для внеэмбрионального развития, постнатального роста и защиты во время воспалительных реакций у мышей

EMBO J

1999

18

5943

5952

[27]

и другие.

Ингибирование адъювант-индуцированного артрита регулирующими клетками, управляемыми интерлейкином-10, индуцированное назальным введением пептидного аналога связанного с артритом белка теплового шока 60 Эпитоп Т-клеток

Rheum артрита

2002

46

1937

1946

[28]

и другие.

Профилактическое введение Mycobacterium tuberculosis Белок теплового шока (hsp10) массой 10 кДа подавляет адъювантный артрит у крыс Lewis

Инт Иммунофармакол

2002

2

463

474

[29]

Консервативная последовательность микобактериального белка теплового шока (hsp) 70 предотвращает адъювантный артрит при назальном введении и индуцирует продуцирующие IL-10 Т-клетки, которые перекрестно реагируют с собственным гомологом hsp70 млекопитающих

Дж Иммунол

2000

164

2711

2717

[30]

Сверхэкспрессия индуцируемого крысами белка теплового стресса массой 70 кДа у трансгенных мышей увеличивает устойчивость сердца к ишемическому повреждению

J Clin Invest

1995

95

1446

1456

[31]

и другие.

Нацеливание экспрессии hsp70i на дискретные популяции нейронов с использованием промотора Lmo-1: оценка нейрозащитных эффектов hsp70i in vivo и in vitro

J Cereb Blood Flow Metab

2001

21

972

981

[32]

и другие.

Индукция стрессовой реакции in vivo снижает активность ядерного фактора-каппа B в слизистой оболочке тощей кишки мышей с эндотоксемией

Arch Surg

2000

135

860

866

[33]

Противовоспалительный эффект индукции белка теплового шока связан со стабилизацией I каппа B альфа за счет предотвращения активации I каппа B киназы в клетках респираторного эпителия

Дж Иммунол

2000

164

5416

5423

[34]

Стресс-индуцированное ингибирование сигнального пути NF-κB является результатом перевода в нерастворимую форму киназного комплекса IκB после его диссоциации от белка теплового шока 90

Дж Иммунол

2005

174

384

394

[35]

Предварительная обработка липополисахаридом уменьшает размер инфаркта миокарда: возможный механизм, включающий 70-ингибирующий белок теплового шока комплекс каппа-B-альфа и ослабление ядерного фактора каппа-B

J Thorac Cardiovasc Surg

2002

124

933

941

[36]

Главный стрессовый белок Hsp70 взаимодействует с регуляторным комплексом NF-κB в клетках Т-лимфомы человека

Шапероны клеточного стресса

1997

2

132

139

[37]

Связь белка теплового шока 27 с киназным комплексом I каппа B регулирует активацию NF-каппа B, индуцированную фактором некроза опухоли альфа

J Biol Chem

2003

278

35272

35278

[38]

HSP70 и фактор теплового шока 1 взаимодействуют для репрессии индуцированной Ras транскрипционной активации гена c-fos

Шапероны клеточного стресса

2000

5

406

411

[39]

Ответ на тепловой шок подавляет экспрессию IL-18 через путь JNK в перитонеальных макрофагах мыши

Biochem Biophys Res Commun

2002

296

742

748

[40]

Обработка тепловым шоком подавляет индуцированные ангиотензином II SP-1 и AP-1 и стимулирует ДНК-связывающую активность Oct-1 в сердце

Inflamm Res

2005

54

Заметки автора

Авторские права © 2005, Европейское общество кардиологов

Набор инструментов для суровых погодных условий | Техасский центр безопасности школ

1.6 мокрый снег, снег, лед и сильный холод

В Техасе есть ограниченные районы штата, в которых наблюдается снег, мокрый снег, лед и сильный холод. Из-за нечастости такого рода погодных явлений в Техасе это может создать еще больше проблем для управления чрезвычайной ситуацией. Отсутствие достаточного количества оборудования для удаления снега и льда увеличивает вероятность того, что школы отложат время начала занятий или отменит занятия в школе, чтобы обеспечить безопасность учащихся. Школьные округа должны разработать процедуры для отсрочки или отмены занятий и согласовать эти планы и процедуры с соответствующими местными и региональными властями.Эта координация должна включать другие соседние школы и округа, которые могут быть затронуты закрытием округов. Сообщества часто основывают свои решения о закрытии работы на том, какие решения принимаются их школьным округом, поэтому сотрудничество и координация жизненно важны.

В

школьных округах Техаса также могут возникать сбои в электроснабжении в результате экстремальных зимних погодных условий. Эти экстремальные условия могут сопровождаться отключением электроэнергии, прекращением подачи природного газа, разрывами водопровода и перебоями в подаче воды.Во многих случаях это вынуждает округ отменить или отложить учебу. Если эти сбои происходят после того, как учащиеся пойдут в школу, досрочное увольнение может потребовать также отзыва автобусов для транспортировки.

Школы должны включать планирование на основе сценариев в разработку и обновление своих планов действий в чрезвычайных ситуациях, чтобы эффективно реагировать на любую ситуацию, которая может произойти. Связь с Национальной метеорологической службой (NWS) и местными, региональными и государственными службами реагирования поможет в выработке соответствующего ответа.Школы в районах с большей вероятностью экстремальных погодных явлений должны иметь запасы еды и воды на тот случай, если учащиеся будут вынуждены оставаться в школе по соображениям безопасности вне обычных школьных часов. Во время сильных морозов отказ муниципальной инфраструктуры может означать, что школьные помещения могут понадобиться в качестве временного убежища для населения. Поэтому школы должны отслеживать уведомления о погоде, поскольку погодные условия могут быстро развиваться в любое время в течение учебного дня или повлиять на занятия после школы.Школы должны планировать спортивные и другие мероприятия, когда существует вероятность выезда за пределы области. Мониторинг погоды в районах поездок за пределами школьного региона имеет важное значение для безопасности тех, кто путешествует. Заблаговременное планирование и предупреждение — ключ к готовности к экстремальным погодным условиям.

Экстремальная зимняя погода может нанести серьезный ущерб пострадавшим общинам. Сильный снегопад и ледяной дождь могут обездвижить регион и парализовать город, остановить путешественников, остановить поток припасов и нарушить работу служб экстренной помощи и оказания медицинской помощи.Скопление снега может привести к обрушению зданий и разрушению деревьев и линий электропередач. Когда снег сопровождается ветром, путешествие становится еще более опасным. Маршруты школьного автобуса могут быть заблокированы из-за снегопада, а поездка может быть затруднена из-за отсутствия белого света. Часто автобусы задерживаются или недоступны. Сильные скопления льда могут повредить деревья, инженерные сети и башни связи. Дороги покрываются льдом и становятся почти непроходимыми. Опять же, школьные автобусы могут задерживаться или быть недоступными.

Информационные сообщения о зимней погоде

Предупреждения о зимней погоде выпускаются NWS, когда ожидается, что погодные условия причинят значительные неудобства и могут быть опасными. Суровая зимняя погода может включать ледяной дождь или мокрый снег, снег и сильный ветер.

Часы Winter Storm

Вахта с зимним штормом выдается, когда в этом районе возможна зимняя буря. Подключайтесь к NOAA Weather Radio, коммерческому радио или телевидению для получения дополнительной информации. NWS выдает часы зимнего шторма, когда суровые зимние условия, такие как сильный снегопад и / или лед, могут повлиять на район, но местоположение и время все еще не определены.Вахта о зимнем шторме обычно выдается за 12–36 часов до возможного сильного шторма.

Предупреждение о зимнем шторме

Предупреждение о зимнем шторме выдается, когда суровая зимняя погода наступает или скоро наступит в этом районе.

Предупреждение о метели

Ожидается, что продолжительный ветер или частые порывы со скоростью до 35 миль в час или более и значительное количество падающего или метель (уменьшающего видимость до менее четверти мили) будут преобладать в течение трех часов или дольше.

Предупреждение об замерзании / замерзании

Ожидаются отрицательные температуры.

Ледяной дождь

Дождь, который замерзает при попадании на землю, образуя ледяной покров на дорогах, пешеходных дорожках, деревьях и линиях электропередач.

Sleet

Дождь, который, не достигнув земли, превращается в ледяную крупу. Из-за мокрого снега дороги замерзают и становятся скользкими.

Экстремальный холод и охлаждение ветром

Зимнюю бурю часто сопровождают очень низкие температуры.Продолжительное воздействие может вызвать обморожение или переохлаждение, что может стать опасным для жизни. Это может быть проблемой, особенно для детей, ожидающих на автобусных остановках, во время перемены на открытом воздухе или занятий спортом или изобразительным искусством. Обморожение и переохлаждение также могут быть проблемой для обслуживающего персонала, работающего на открытом воздухе; поэтому следует принять соответствующие меры предосторожности.

При очень низких температурах и усилении ветра тепло уносится от тела с ускоренной скоростью, что снижает температуру тела и в конечном итоге приводит к обморожению.

NWS предоставляет диаграмму охлаждения ветром, которая показывает разницу между температурой воздуха, воспринимаемой температурой и временем, по истечении которого может произойти обморожение. Wind Chill основан на скорости потери тепла через открытую кожу, вызванную комбинированным воздействием ветра и холода.

График охлаждения ветром

Болезнь, связанная с простудой

Заболевание, связанное с простудой, или холодовой стресс, может возникать, когда температура кожи человека снижается, а в конечном итоге — внутренняя температура тела.Это может вызвать серьезные проблемы со здоровьем; поэтому следует принимать меры предосторожности для предотвращения заболеваний, связанных с простудой.

Факторы риска стресса от холода

• Влажность / сырость, неподходящая для этих условий одежда и физическое истощение
• Существующие ранее состояния здоровья, такие как высокое кровяное давление, гипотиреоз, диабет или плохое физическое состояние
• Отсутствие физической адаптации к сильному холоду
• Психические проблемы или проблемы
• Употребление алкоголя и наркотиков

Обморожение

Обморожение может произойти, когда кожа и ткани тела подвергаются воздействию экстремальных морозных погодных условий.Например, потеря чувствительности в пальцах рук и ног, а также белый или бледный вид мочки ушей и лица являются некоторыми симптомами обморожения. Обязательно прикрывать открытые участки кожи. Однако, если произошло обморожение, не трите пораженный участок, пытаясь его согреть, а сразу обратитесь за медицинской помощью.

Гипотермия

Гипотермия возникает, когда человек испытывает опасно низкую температуру тела. Неконтролируемая дрожь, потеря памяти, дезориентация, бессвязная речь, невнятная речь, сонливость и явное истощение — общие симптомы, связанные с переохлаждением.При обнаружении симптомов переохлаждения измерьте температуру тела человека. Если температура тела человека ниже 95 °, немедленно обратитесь за медицинской помощью. Кроме того, перемещение пострадавшего в теплое место, снятие мокрой одежды и согревание центра тела человека путем укутывания человека одеялом или переодевания в сухую одежду также может уменьшить последствия переохлаждения. Также можно давать теплые напитки, если пострадавший находится в сознании. Всегда помните, что переохлаждение — серьезное заболевание, требующее немедленной неотложной медицинской помощи.

Мокрый снег, снег, лед и ресурсы с экстремально низкими температурами

Контрольный список рекомендаций и предупреждений о зимней погоде

NIOSH Fast Facts: защита от холодного стресса

CDC: Руководство по экстремальным холоду

причин, почему ваши водопроводные трубы издают стук | The Pink Plumber

Это может показаться чем-то из сказки о привидениях, но обычно есть простое объяснение того, почему водопроводная система в вашем доме издает стук. Иногда это происходит из-за проблем с давлением воды, а иногда из-за ослабленных труб или неисправного клапана.Если вы заметили громкий стук при включении воды или в любое время дня, вот несколько возможных объяснений.

Незакрепленные подводящие трубы

За годы эксплуатации трубы, которые подают горячую и холодную воду в смесители, могут отсоединиться от ремней, которыми они крепятся к дому. Давление воды, которое проходит через незакрепленные трубы, заставляет их биться о стену, вызывая тот стук, который вы слышите. Эта проблема возникает только тогда, когда вода течет, поэтому, если стук прекращается в тот момент, когда вы перекрываете воду, это хороший признак того, что виной всему являются ослабленные трубы.

Если можно дотянуться до труднодоступной трубы, вы можете прикрепить ленту к стене самостоятельно, стараясь не делать это слишком туго, чтобы труба могла расширяться и сжиматься из-за изменения температуры воды. Если трубы находятся внутри стены, вы можете избавиться от стука, набив прокладкой или пеной с каждого конца, где труба входит и выходит из стены.

Высокое давление воды

Если давление воды слишком высокое, ваши трубы могут дребезжать независимо от того, насколько хорошо они прикреплены к стене.В этом случае вы заметите, что, как и в случае с незакрепленными трубами, шум возникает только тогда, когда течет вода. Однако звук, который вы слышите, будет больше похож на тихий звук постукивания, чем на полный стук. Давление воды должно составлять от 40 до 80 фунтов на квадратный дюйм. Если давление вашей холодной воды превышает 80 фунтов на квадратный дюйм, вы можете установить редукционный клапан. Если проблема связана с горячей водой, попробуйте немного снизить температуру. Если это не помогает, подумайте об установке расширительного бачка для горячей воды.Это поглотит избыточное давление и защитит ваши трубы.

Гидравлический молот

Если вы замечаете громкий стук только , когда вы перекрываете воду, а не когда она течет, ваша сантехника, вероятно, страдает от гидроудара. Гидравлический удар вызывается внезапным закрытием клапана, в результате чего вода ударяется о клапан и воду перед ним.

Добавить комментарий Отменить ответ

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Комментарий *

Имя *

Email *

Сайт