Спекшаяся кровь: Запекшаяся кровь – КиноПоиск

Фильм Запекшаяся кровь (1996) смотреть онлайн в хорошем HD 1080 / 720 качестве

С самого детства Габриэла была одержима тягой к смерти. Самым ярким ее детским впечатлением был выпавший из окна человек и кровь на белой простыне, которой ее мама накрыла труп. Повзрослев, Габриэла не утратила своего интереса. Более того, она начинает интересоваться недавно появившимся серийным убийцей по прозвищу «убийца голубой крови». Данный убийца выделяется тем, что соблазняет богатую даму и, когда они остаются наедине, наносит своей жертве множество ножевых ранений, наслаждается ее безуспешными попытками остаться в живых, а затем отрезает голову. Но увлечения Габриэлы вызывают непонимание со стороны окружающих. В особенности Эдуардо, молодого человека, с которым Габриэла встречается.

Для удовлетворения своих интересов, Габриэла устраивается на работу в фирме, занимающейся уборкой мест преступления. Лоджер, начальник фирмы, решает устроить Габриэлу на испытательный срок, хотя боится, что ее то работа может очень сильно напугать. Для обучения, он представляет к ней боле опытную сотрудницу Елену. Вскоре, Елену начинает раздражать нездоровое детское любопытство Габриэлы по поводу убийств и несерьезное отношение к работе.

Последнее убийство у маньяка прошло весьма неудачно. Раненая жертва пытается написать маркером имя Пол Гуэль (настоящее имя маньяка). Пол это замечает и добивает жертву, однако стереть надпись и отрубить голову он не успевает, так как неожиданно пришли гости. Полу ничего не остается, кроме как бежать. Вскоре, Лоджер получает заказ убрать последнее место преступление «убийцы голубой крови». Никто из сотрудниц компании не желает работать там, даже за двойную оплату. Лишь Габриэла настаивает на том, чтобы там работать. Лоджер не хочет ее туда посылать, так как считает, что у нее слишком мало опыта в таких делах. Но Габриэла настаивает. Она утверждает, что ей нужны деньги, да и после такого, она сможет набрать необходимый опыт. Лоджер вынужден согласиться.

Габриэла и Елена пребывают на место преступления. Однако Пол прибыл туда первым. Он не успел стереть свое имя и, увидев уборщиц, спешит спрятаться в комнату для хранения вина. Пол успевает туда спрятаться, но случайно себя запирает, а попытки выбраться приводят лишь к ненужному шуму. Поэтому Полу ничего не остается, кроме как ждать ухода женщин. Во время работы Габриэла замечает написанное на полу имя убийцы, но предпочитает его скрыть от Елены. Пол это замечает и ему становиться весьма любопытно поведение девушки.

Этим же вечером, Габриэла возвращается в дом вместе с Эдуардо, чтобы похвастаться своим открытием. Однако Эдуардо не интересуют увлечения своей подруги, и он предпочел уйти. Габриэла остается в доме, включает музыку и начинает танцевать. Эдуардо все же решает вернуться за Габриэлой. Только Полу все же удалось выбраться. Он оглушает Эдуардо, прячет его, а затем решает поближе познакомиться с Габриэлой. Сначала он заставляет стереть свое имя, а затем начинает танцевать с ней. Габриэла начинает задавать вопросы по поводу убийств, но Пол предлагает ей самой восстановить картину преступления. Габриэле не только удается это сделать, но и правильно установить мотивацию маньяка. Несмотря на это, Пол решает убить Габриэлу. Ему это сделать не удается, так как поскальзывается на крови, ударяется головой и теряет сознание. Габриэла этим пользуется, чтобы проверить один мучивший ее вопрос. Габриэла убеждена, что отрезанная голова еще некоторое время способна жить и даже говорить. Девушка отрезает маньяка голову, берет ее в руки и получает удовлетворительный ответ на свой вопрос.

Кровь из уха у ребенка

Рейтинг статьи

5.00 (Проголосовало: 1)

Содержание

• Причины кровотечений из уха
  • Механические причины:
  • Болезни уха:
• Первая помощь при появлении крови из уха у ребенка
• Какие будут действия врача?

Появление крови из уха у ребенка обычно пугает родителей, так как, в отличие от носового кровотечения, кажется редким. Обнаружив кровянистые выделения, лучше сразу обратиться к врачу. Единственная ситуация, когда к отоларингологу можно не спешить, – это несильное механическое повреждение кожи ушной раковины. В остальных случаях только отоларинголог может правильно определить причину, проведя осмотр ушной полости, назначив лабораторные анализы и диагностические процедуры.

Причины кровотечений из уха

Можно выделить 2 основные группы источников крови из уха: механические причины и заболевания уха.

Механические причины:

• Повреждение кожи на ушной раковине или в наружном слуховом проходе (царапина, ссадина). Это единственный не серьезный вид кровотечения, который не несет угрозы для здоровья ребенка и не требует срочной врачебной помощи. Незначительные кровотечения останавливаются сами. Обратите внимание, что в данном случае место повреждения должно быть видно, или говорить о травме именно кожи уже нельзя. Также иногда грудные дети расчесывают уши. Дело может быть в прорезывании зубов, что вызывает сильный зуд. В таком случае лучше проконсультироваться у врача, чтобы убедиться в том, что причиной расчесывания стали режущиеся зубки.
• Повреждения барабанной перепонки. Возникают из-за неаккуратного использования ватных палочек, предметов, которые ребенок может сам засунуть себе в наружный слуховой проход, а также травмирования во время игр. Например, сильный удар мячом в голову может привести к разрыву барабанной перепонки. Помимо крови в таких случаях симптомами являются боль в ухе и снижение слуха.
• Инородное тело в ухе. Самое важное – не пытаться самостоятельно удалить предмет, даже если это кажется простым. Это грозит проталкиванием предмета глубже и более серьезными повреждениями. Только отоларинголог может безопасно удалить инородное тело и оценить масштаб повреждений, которые оно вызвало.
• Черепно-мозговые травмы. При переломе основания черепа в области височной кости часто появляется кровь из ушей.

Болезни уха:

• Отит. Воспалительный процесс в ухе также вызывает повышение температуры тела, сильную боль в ухе, слабость и головокружение. Чаще всего при отите кровь отходит вместе с гноем при вскрытии абсцесса. Контролировать течение болезни должен врач.
• Фурункулы. Кровь выходит вместе с гноем при вскрытии фурункула. Также повышается температура, в области уха появляются покраснения и отечность.
• Мирингит (инфекционное заболевание барабанной перепонки). Отличается сильной болью в ухе и подъемом температуры.
• Кандидоз уха. Часто возникает после приема курса антибиотиков, потому что ослабленный иммунитет и отсутствие микрофлоры формируют благотворную среду для размножения грибков. Это вызывает хрупкость сосудов и как следствие появление кровотечений из уха.
• Новообразования (доброкачественные или злокачественные). Опухоли уха, помимо появления крови, проявляют себя болью и шумом в ушах, головокружением, головной болью, снижением слуха.

Первая помощь при появлении крови из уха у ребенка

Прежде всего, необходимо очистить все возможные загрязнения ушной раковины теплой кипяченой водой. Если ранка на коже поверхностная, после обработки антисептическим препаратом (раствором хлоргексидина, перекисью водорода) ее можно также помазать йодом и закрыть пластырем так, чтобы тканевый отрезок закрывал рану. Если кровотечение сильное и место его возникновения не видно, нужно закрыть наружный слуховой проход тампоном из стерильной ваты или бинта, потом наложить повязку. После этого нужно доставить ребенка в больницу.

При подозрении на черепно-мозговую травму не надо трогать ухо и промывать его. Ребенка нужно уложить на ровную поверхность и вызвать скорую помощь.

Какие будут действия врача?

После внешнего осмотра органа слуха, если причину кровотечения не удалось установить сразу, врач может назначить сдать лабораторные анализы крови, мочи и мазка из уха. В некоторых случаях может быть проведена аппаратная диагностика. Дальнейшие назначения врача будут зависеть от причины образования крови из уха:

• при повреждении кожи — врач обработает место повреждения дезинфицирующим средством;
• при инородном теле в ухе — врач извлечет его;
• при заболеваниях уха ребенку назначат лекарства: антибиотики, обезболивающие, антибактериальные и противогрибковые препараты;
• при разрыве барабанной перепонки тактика лечения будет зависеть от тяжести повреждения; в некоторых случаях необходимо хирургическое вмешательство;
• при выявлении новообразования ребенка перенаправят к онкологу.

Наши лор-врачи всегда готовы помочь!

При обнаружении крови из уха у ребенка обращайтесь в нашу «Клинику уха, горла и носа» – опытные врачи-отоларингологи всегда рады оказать своим пациентам быструю и профессиональную помощь.

Запёкшаяся кровь — это… Что такое Запёкшаяся кровь?

«Запёкшаяся кровь» (англ. Curdled, исп. Tú asesina, que nosotras limpiamos la sangre — «Ты убиваешь, мы отмываем за тобой кровь») — фильм 1996 года американского режиссёра Реба Брэддока. Квентин Тарантино — один из сценаристов и продюсеров фильма. Премьера состоялась 6 сентября 1996 года в Канаде на международном кинофестивале в Торонто, 27 сентября — в США, 30 декабря — в Испании. В России она состоялась 27 ноября 2001 года.

Сюжет

Героиня этого фильма с детства была одержима тягой к смерти. Её самым ярким детским впечатлением была кровь на белой скатерти — из окна выбросили человека, мать выбежала на улицу и накрыла труп. Теперь она выросла и работает в фирме, занимающейся уборкой квартир после убийств.

Отличаясь болезненным любопытством, девушка собирает газетные вырезки о серийном убийце, получившем в прессе прозвище «убийца голубой крови». Однажды уборщицу посылают отмывать кровь в доме, где только что совершено очередное убийство. Одновременно туда приходит герой Болдуина чтобы стереть улики.

Съёмочая группа

• Реб Брэддок — режиссёр / сценарист
• Джон Маасс — продюсер / сценарист
• Рауль Пуйч — продюсер
• Джозеф Хулиан Гонсалес — автор песен
• Мэллори Готтлиб — редактор
• Шерман Уильямс — художник-постановщик
• Квентин Тарантино — исполнительный продюсер / сценарист
• Карен Верджин — художник по декорациям
• Беверли Сафир — художник по костюмам
• Питер Девлин — звукорежиссёр
• Мелани Гриф — первый ассистент режиссёра
• Стивен Бернстайн — оператор
• Ивон Касас — кастинг
• Шелли Глассер — поточный продюсер

В ролях

Актёр Роль Уильям Болдуин Пауль Гуэль Пауль Гуэль Анджела Джоунз Габриэла Габриэла Брюс Рэмси Эдуардо Эдуардо Лоис Чайлз Катрина Брандт Катрина Брандт Барри Корбин квартирант Мел Горэм Елена Елена Дейзи Фуэнтес Клара Клара Кармен Лопез Лурдес Лурдес Вивьен Сендейдиего Эва Эва

Актёр Роль Каридад Равело Жуан Жуан Сандра Тигпен Грейс Грейс Келли Престон Келли Хог Келли Хог Лупита Феррер Мари Клемент Мари Клемент Сабрина Коуан рыжая официантка Чарльз Такер Сан Барбэк Сан Барбэк Аллиса Тэчер Габриэла Габриэла в детстве Наттача Амадор Габриэлы мать Габриэлы

Релиз и критика

Премьера фильмы состоялась на Международном кинофестивале в Торонто 6 сентября 1996 года. Затем картина вышла ограниченным тиражом в США, Испании, Франции, Германии, Венгрии и России

[2]. За 2 недели американского проката на 13 экранах, лента собрала $49,5 тыс. при бюджете в $2,3 млн^[1]. Фильм не понравился большей части критиков. Он имеет лишь 17 % свежести на сайте Rotten Tomatoes (10 отрицательных, 12 нейтральных и всего 2 положительные рецензии). Средняя оценка — 4,3 (максимальная возможная оценка — 10). Только два рецензента нашли в этом фильме больше положительного, нежели отрицательного — это Стэйси Лэйн Уилсон из «Fantastica Daily» и Драган Антулов из «rec.arts.movies.reviews»^[3]. Уилсон написала: «Великолепное кино для психов!»^[3]. Антулов поставил фильму 6 баллов по 10-балльной шкале, сказав: «Фильм имеет свои очевидные недостатки (затянутость, нездоровые шутки об убийствах, огромное количество крови), но все они немного нивелируются, во многом, благодаря великолепной игре Анджелы Джонс. Она выглядит так искренне и невинно, что зрители начинают невольно симпатизировать ей, несмотря на то, что она психически больна» ^[3].

Среди семи топовых критиков, пятеро воздержались от оценки, и двое написали отрицательные рецензии. К последним относится и Роджер Эберт, который поставил картине две звезды из четырёх, отметив, в своём отзыве на страницах издания «Chicago Sun-Times», неплохую игру Анджелы Джонс и неудавшуюся попытку расширения короткометражного фильма до полнометражного. «Это не работает» — сказал он

[4]. «Длинная и нудная пародия на фильмы о серийных убийцах всего с одной шуткой» — написал Тод Маккарти в рецензии для «Variety»^[5]. Мик Ласель из «San Francisco Chronicle» подумал об имидже Квентина Тарантино: «Помещая своё имя в это барахло, Тарантино характеризует себя не лучшим образом»^[6]. А критик «Washington Post» Дессон Хоу отметил, что главная героиня фильма Габриэла слишком сильно наслаждается своей новой профессией^[7].

Связь с другими фильмами

Похожие работы

Релизы на DVD

• «Запёкшаяся кровь» (7 марта 2005, Disney)
• «Запёкшаяся кровь» (2 марта 2004, Miramax)

Примечания

Ссылки

Значение, Синонимы, Определение, Предложения . Что такое запекшаяся кровь

Это совершенно сухая, запекшаяся кровь.

Кровотечение из раны прекратилось, но состояние раненой оставалось ужасным: лицо, волосы, одежду густо покрывала запекшаяся кровь.

Лицо у Тома было вспухшее, синее, на губах и на подбородке чернела запекшаяся кровь.

Например, в японской и PAL версиях No More Heroes брызги крови и запекшаяся кровь удаляются из игрового процесса.

Другие результаты

Западной молодежи предоставляется кров в обмен на работу по утрам.

Вы заплатили ему гонорар, мадам, предоставили кров и стол в вашем доме на время исполнения заказа.

Коренные народы Северной Америки, жившие вдоль Миссури, исторически имели доступ к обильным запасам пищи, воды и крова.

Я пытался заполучить и изолировать кровавик, а из-за того, что ты не дала мне сделать мою работу, погибли лю… Да что это я?

Через некоторое время жертва, запертая в колбе, превратится в кровавое месиво.

Я их использовать не могу, так как получила запрет на полёты после своей подпитанной Кровавой Мэри панической атаки на высоте в 9 тысяч метров, из-за которой были госпитализированы три стюардессы.

Именно во время кровавой расправы Бонифаций сделал свое самое знаменитое записанное заявление.

Мусульманское восстание на северо-западе произошло из-за жестокой и кровавой междоусобицы между мусульманскими группировками Гедиму, Хафия и Джахрия.

Это ранние записи о Ла Шошейн и Кровавом Короле.

И вот человек, который возглавит нашу благородную борьбу за свободу только что одержавший триумфальную кровавую победу над пацифистами Туманности Ганди 25-звездочный генерал Запп Бранниган.

Она живо стащила повязку с головы тетушки Браун и, запустив ей в волосы одну руку, другой, в свою очередь, пустила ей из ноздрей кровавую струю.

Кровавые теракты, произошедшие в январе в Париже, подчеркнули ту опасность, которая назревает в Западной Европе по мере того, как джихадисты возвращаются с войны в Сирии и Ираке.

Затем последовали кровавые чистки и неумолимая экспансия в западном направлении, в ходе которой спустя столетие Иван Грозный воевал со шведами.

Зато бог-отец был похож на разбойника с дикого Запада, каких преподносят публике захватывающие кровавые американские фильмы.

Наутро Ив заметила кровавые пятна на простыне и поклялась, что он заплатит за ее унижение и позор.

Я помогла своему клиенту Мойше с очень запутанным делом по разделу земли, а он подкинул мне скидку на не кровавые алмазы.

Куда ни падал кровавый отблеск печи, всюду он освещал груды жутких предметов, заполнявших склеп.

План провалился, и война зашла в очень кровавый тупик на Западном фронте практически без движения вплоть до 1918 года.

Они выпустили первый оригинальный альбом в твердом переплете Кровавый флаг, триллер Джеймса У. Хьюстона, а также развернули издания четырех западных романов в мягкой обложке и электронных книгах.

Симптомы включают боль в животе, вздутие живота, рвоту, запор и кровавый стул.

Красная полоса над горизонтом исчезла; солнце больше не закатывалось — оно просто поднималось и опускалось на западе, становясь все более огромным и кровавым.

Ты будешь править хорошо или дурно, пока святые черепа не заплачут кровавыми слезами.

Если поддержание их власти и местная автономия является ценой, которую нужно заплатить за окончание войны, или хотя бы за сокращение числа кровавых инцидентов, Россия должна согласиться.

В результате этих трех кровавых столетий Тай начали мигрировать на юго-запад.

Дети вешают чулки возле своих кроватей, надеясь, что Санта Клаус ночью спустится через дымоход и заполнит их игрушками и конфетами.

Когда все уйдут, — думал я, — я добуду себе и пищу и платье, обойду весь магазин, узнаю его запасы и, пожалуй, даже посплю на одной из кроватей.

Кровь из заднего прохода – причины появления, диагностика и лечение кровотечения из анального отверстия

Кровь из заднего прохода — признак заболеваний прямой или толстой кишки, свидетельствующий о наличии источника выделения крови в данных отделах кишечника. В постановке диагноза важную роль играет цвет и характер кровотечения.

В случае появления такого симптома, как кровь из прямой кишки, как мужчине, так и женщине нужно срочно обратиться к колопроктологу. Колопроктолог, проктолог проведёт осмотр и поставит предварительный диагноз. Если понадобится более подробная диагностика, например, аноскопия или ректороманоскопия, то Вы можете провести её в тот же день. Для женщин в Клинике проктологии ведут приём женщины-проктологи.

Цены на прием проктолога

Первичный приём проктолога (оценка жалоб пациента, сбор анамнеза, наружный осмотр заднего прохода, пальцевое исследование прямой кишки, аноскопия по показаниям)

Первичный прием – обращение к врачу конкретной специальности в первый раз.

Записаться на прием

Причины кровотечений из заднего прохода

Если вы заметили кровь на туалетной бумаге после дефекации, даже в случае если процесс опорожнения кишечника проходит без боли, обязательно нужно обратиться к врачу проктологу за консультацией, чтобы установить причину кровотечения, своевременно начать лечение и избежать возможных осложнений.

Почему появляется кровь из заднего прохода после стула, как у мужчин, так и у женщин:

• Достаточно распространенный фактор — геморрой (расширение вен прямой кишки). Появляется алая кровь из заднего прохода при дефекации.
• Анальная трещина – вторая по частоте причина ректальных (прямокишечных) кровотечений. Заболевание характеризуется чувством жжения при испражнении, иногда сопровождается острой болью (больные описывают её как режущую, а потом сжимающую). Кровянистые выделения проявляются как небольшими, так и обильными порциями.
• Воспалительные заболевания толстой кишки.
• Наличие доброкачественных образований (полипов). Характерный симптом — выделение крови из прямой кишки после дефекации. Кровь более темная, достаточно часто со слизью.
• Наличие злокачественной опухоли прямой кишки. Может выделяться кровь различного цвета. Достаточно часто выделяемая кровь никак не отличается от крови, которая выделяется, например, из геморроидальной ткани. И если наличие геморроидальной болезни ухудшает только качество жизни (геморроидальная ткань никогда не перерождается в злокачественную опухоль), то наличие доброкачественного образования или злокачественной опухоли может нести вред здоровью и опасность для жизни, именно поэтому не стоит самостоятельно пытаться установить источник.

Установить истинную причину кровотечений из заднего прохода и подобрать соответствующее лечение сможет только врач-колопроктолог. Своевременная диагностика позволяет проводить эффективное консервативное и малоинвазивное лечение.

Цвет выделений и заболевание

• ярко-красная, алая кровь из заднего прохода на туалетной бумаге или нижнем белье, капли в конце акта дефекации (испражнении) — геморрой или анальная трещина;
• красный цвет крови при анальном кровотечении — раковая опухоль, полип кишки;
• сгустки крови тёмного цвета — опухоли дистальных отделов толстой кишки, дивертикулёз;
• вишневый цвет крови из анального отверстия — патологии ободочной кишки;
• черный, дёгтеобразный стул — заболевания желудка, 12-перстной кишки и тонкого кишечника.

ВАЖНО! Кровотечение является грозным симптомом, после появления которого нельзя откладывать визит к врачу. К сожалению, кровь из ануса может причиной такого заболевания как опухоль прямой или толстой кишки. И в худшем случае эта опухоль может оказаться злокачественной. Кровь может возникать также как следствие травмы полипа — доброкачественной опухоли. Существующий долгое время полипоз может стать признаком рака кишечника.

Характер кровотечения и заболевание

• Регулярные обильные кровяные, не связанные с опорожнением кишечника — дивертикулёз, полипоз, болезнь Крона, язвенный колит, рак прямой или ободочной кишки;
• Кровь, смешанная с калом — рак прямой и ободочной кишки;
• Кровотечение при диарее — дисбактериоз, синдром раздраженной кишки;
• Выделение крови со слизью или гноем — внутренний геморрой, выпадение прямой кишки или полипа;
• Сильные кровотечения со слизью — проктит, колит, рак прямой кишки.

Записаться на прием

Диагностика и лечение

Сталкиваясь с интимной проблемой, особенно такой, как кровотечение из заднего прохода при испражнении, можно растеряться, особенно, не зная о способах диагностики и лечения подобных недугов или не понимая, к какому врачу обратиться.

Проктолог или колопроктолог – это врач, который занимается диагностикой и лечением заболеваний толстой, прямой кишки и заднего прохода, а также проблемами крестца, копчика и промежности. Откладывать визит к этому специалисту, в случае если наблюдается кровь из заднего прохода после стула, не стоит.

Врач-проктолог выслушает жалобы и историю их появления, а для установления причины появления крови из прямой кишки, может провести следующие процедуры:

Пальцевое исследование прямой кишки: первичный метод исследования, который дает возможность оценить состояние анального отверстия, выявить возможные патологии в виде новообразований, анальных трещин, нехарактерных выделений, кровотечений.

После пальцевого исследования врач-колопроктолог при необходимости назначает дальнейшие способы диагностики посредством специального оборудования:

• Аноскопия. Это осмотр последних 3-7 см прямой кишки, именно в этой области располагается почти половина источников при видимом кровотечении. Есть несколько типов аноскопов (прямые, конические, с вырезом и без, прозрачные и не прозрачные), каждый из них применяется строго по показаниям, но любой из этих типов позволяет выполнить полноценный осмотр анального канала и нижнеампулярного отдела прямой кишки. Аноскопия применяется при выполнении малоинвазивных методик лечения геморроя (лигирование, склеротерапия), а также выполнения ряда хирургических вмешательств (биполярная коагуляция). Для выполнения диагностической аноскопии подготовка, как правило, не требуется, для аноскопии с лечебными целями требуется подготовка.
• Ректороманоскопия или ректоскопия (РРС или RRS) — диагностическая манипуляция с помощью специального прибора с камерой. Она дает возможность на первичном приеме быстро и без боли визуально оценить состояние слизистой оболочки прямой кишки, выявить наличие образований слизистой и сдавление кишки. При ректоскопии осматривается до 20 см кишки (вся прямая и место её перехода в сигмовидную). Для ректоскопии необходима подготовка.
• Колоноскопия — это наиболее информативная, в сравнении с другими, методика исследования толстого кишечника. Проводится при помощи гибкого фиброколоноскопа, оборудованного камерой с высоким разрешением, которая покажет даже мельчайшие источники кровотечения. Процедура также назначается с целью эндоскопического удаления образований толстой кишки. Колоноскопию выполняет врач-эндоскопист.

Подходящий способ лечения заболевания определяет и назначает врач. Не стоит заниматься самостоятельным лечением и пренебрегать обращением к колопроктологу.

Как подготовиться к осмотру?

Собственные исследования специалистов отделения проктологии клиники Альтермед позволили сделать посещение проктолога максимально легким и комфортным. Больше нет необходимости голодать накануне и планировать процедуру на утренние часы. В проктологических отделениях Альтермеда найден способ, позволяющий успешно справиться со всеми этими сложностями. Это подготовка кишечника Микролаксом.

Применение микроклизмы Микролакс делает ненужным голодание, не требует специального оборудования и помещения, экономит много времени. Слабительный эффект наступает через 5-15 мин после введения препарата. Качество очистки кишечника таково, что лечение можно начать тотчас после ректоскопии и аноскопии. При необходимости применения при беременности и в период лактации Микролакс не требует специальных мер предосторожности.

В Клинике проктологии осуществляется диагностика с помощью самого современного оборудования. К Вашим услугам лучшие врачи Санкт-Петербурга — как мужчины, так и женщины — и деликатный подход.

Врачи

Все врачи

Книга Запекшаяся кровь читать онлайн Михаил Март

Михаил Март. Запекшаяся кровь Мейнстрим — 3   ГЛАВА 1   1   «…Оборона не имела смысла. Я подавал Шкловскому ящики с пулеметными лентами, а он, оскалив зубы, стрелял, не видя перед собой противника. Выстрелы резко оборвались. Я бросил очередной ящик и поднялся в пулеметную башню. Гриша так и умер со злобным оскалом на лице, в его шее торчала стрела с белым оперением. Я стащил его вниз и уложил на стальном полу боевого отсека. Война закончилась. Я мог занять его место за пулеметом, но что это меняло? Вокруг тайга. Противник не идет в атаку с криками «Ура!», мы даже не видели его и понятия не имели, от кого обороняемся. Эти люди знают здесь каждый кустик и камень. Во время вылазки прошлой ночью мы не нашли ни одного трупа, половина боеприпасов израсходована впустую. Что дальше? Судя по стрелам, мы имеем дело с дикарями, но я не уверен, что они пришли сюда убивать нас. Скорее всего, на вершину горы их привело любопытство. Они не могли не видеть крушение нашего самолета, ночью на расстоянии около пяти километров к западу горели костры. Похоже, там их лагерь.   Мы прилетели с востока, с той стороны гора представляет собой отвесный каменистый обрыв высотой в полкилометра. На севере пики, похожие на острые подводные рифы. Юг? Но там глубокие расщелины, одному пройти невозможно, а я остался один. Кондрат Тополев погиб при посадке. Усов сломал ногу, а потом пропал. Следом исчез второй пилот Сурен Карапетян. Теперь убит Гриша Шкловский. Если я выживу, ночью похороню его. Меня не покидает мысль, что все можно было решить мирно. Дикарям ничего не стоило истребить нас в день катастрофы, но они только наблюдали за нами. Трое суток мы вырубали деревья вокруг самолета, делали подпорки под фюзеляж, ходили на разведку, били дичь и нас никто не трогал. Потом пропал Сурен. Я не думаю, что дикари хотели его убить, просто взяли «языка». Сумеют ли они понять друг друга? Шкловский все испортил. Не знаю, кого он боялся больше: своих или дикарей. Сторожевой пес сидел на золоте партии и отдал за него жизнь. Дурак! Мне удалось сделать некоторые расчеты по звездам. Результаты неутешительны. Мы отклонились от курса на тысячу километров к северу. Карт этих мест не существует, а если они есть, то засекречены и ни один пилот их не видел. Нам не повезло, рука диверсанта сбила приборы, не долила топлива в баки, испортила все средства связи. Ясно, что под «рукой» я подразумеваю группу диверсантов, одному человеку такое не под силу. Считаю своей обязанностью выжить. Я должен добраться до центра, сообщить местоположение самолета с сохранившимся грузом и предупредить, что в магаданском аэропорту действует диверсионная группа. Цель диверсии понятна. Страну надо лишить главного источника золотодобычи и привести ее к экономическому кризису в момент восстановления после разрушительной войны. Я обязан выполнить свой долг. До сих пор золото доставлялось на большую землю без перебоев, мы стали первой жертвой. За нами могут последовать другие. Этого допустить нельзя! Попытаюсь уйти ночью. Провизии хватит на три дня. Дикари отступили, они уверены, что перебили всех, я затаился. В самолет они не полезут. Мы неоднократно оставляли его без присмотра, уходя на разведку, и, возвращаясь, не замечали никаких изменений. Стальная махина их пугает, в пасть дракона они не полезут. Покойный Шкловский считал, что надо ждать помощи. Но ее не будет. Небо над нами девственное, здесь еще никто не летал. Ждать нечего. У меня есть оружие и есть цель. Если не я, то кто же? Буду идти, пока в жилах пульсирует кровь. Оставляю свой дневник. Верю, надеюсь и дерзаю. Командир Ту-4 Алексей Алешин». Октябрина захлопнула тетрадь. В глазах стояли слезы. — Да, это мой отец. Он жив, я в этом уверена. Он смелый, сильный и очень целеустремленный человек. Если мы смогли подняться на гору, то он мог спуститься. Команда Лизы Мазарук сидела в просторном бомбовом отсеке самолета.

«Запекшаяся кровь»

Запекшаяся кровь Curdled «This serial killer is about to meet his match» триллер, криминал, комедия 1996, США, 89 мин. бюджет: $2 300 000 статус: фильм вышел (с 1996-09-06) режиссёр: Рэб Брэддок сценарий: Рэб Брэддок, Джон Маасс, Квентин Тарантино в ролях: Уильям Болдуин, Анджела Джонс, Брюс Рэмсей, Лоис Чайлз, Бэрри Корбин, Мэл Горхэм, Дэйзи Фуэнтес, Кармен Лопес, Вивьенн Сендейдиего, Каридад Равело Рейтинг киносайтов: мировая премьера: 6 сентября 1996 г. выход DVD/online: 27 ноября 2001 г. Героиня этого фильма с детства была одержима тягой к смерти. Ее самым ярким детским впечатлением была кровь на белой скатерти — из окна выбросили человека, и мать выбежала на улицу и накрыла труп. Теперь она выросла и работает в фирме, занимающейся уборкой квартир после убийств. Отличаясь болезненным любопытством, девушка собирает газетные вырезки о серийном убийце, получившем в прессе прозвище «убийца голубой крови». Однажды нашу уборщицу посылают отмывать кровь в доме, где он только что совершил очередное убийство. Одновременно туда приходит герой Болдуина, чтобы стереть улики… Короче говоря, там они и встретились. Трейлер:

Номинации на премии:

Ссылки:

Создание модельных тканей с дендритными сосудистыми сетями с помощью жертвенных лазерно-спеченных углеводных шаблонов

1.

Замир, М. Фрактальные размеры и мультифрактильность при ветвлении сосудов. J. Theor. Биол. 212 , 183–190 (2001).

CAS PubMed Google Scholar

2.

Вест, Г. Б., Браун, Дж. Х. и Энквист, Б. Дж. Общая модель происхождения законов аллометрического масштабирования в биологии. Science 276 , 122–126 (1997).

CAS Google Scholar

3.

Вест, Г. Б., Браун, Дж. Х. и Энквист, Б. Дж. Общая модель онтогенетического роста. Nature 413 , 628–631 (2001).

CAS PubMed Google Scholar

4.

Монахан-Эрли, Р., Дворак, А. М. и Эйрд, У. К. Эволюционное происхождение кровеносной сосудистой системы и эндотелия. J. Thromb. Гемост. 11 , 46–66 (2013).

PubMed PubMed Central Google Scholar

5.

Новосел, Э. К., Кляйнханс, К. и Клюгер, П. Дж. Васкуляризация является ключевой проблемой тканевой инженерии. Adv. Препарат Делив. Ред. 63 , 300–311 (2011).

CAS PubMed Google Scholar

6.

Кинстлингер, И.С. и Миллер, Дж. С. 3D-печать жидкостных сетей в качестве сосудистой сети для инженерных тканей. Lab Chip 16 , 2025–2043 (2016).

CAS PubMed Google Scholar

7.

Cabodi, M. et al. Микрожидкостный биоматериал. J. Am. Chem. Soc. 127 , 13788–13789 (2005).

CAS PubMed Google Scholar

8.

Чробак, К.М., Поттер Д. Р. и Тиен Дж. Формирование перфузируемых функциональных микрососудистых трубок in vitro. Microvasc. Res. 71 , 185–196 (2006).

CAS PubMed Google Scholar

9.

Zhang, B. et al. Биоразлагаемый каркас со встроенной сосудистой сетью для инженерии «орган на чипе» и прямого хирургического анастомоза. Nat. Матер. 15 , 669–678 (2016).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

10.

Миллер, Дж. С. Конструкция из миллиарда клеток: приведет ли нас к этому трехмерная печать? PLoS Biol. 12 , e1001882 (2014).

PubMed PubMed Central Google Scholar

11.

Луо Ю., Лоде А. и Гелински М. Прямое построение трехмерных полых волоконных каркасов на основе концентрированных альгинатных паст для тканевой инженерии. Adv. Здоровьеc. Матер. 2 , 777–783 (2013).

CAS PubMed Google Scholar

12.

Christensen, K. et al. Струйная печать произвольной формы ячеистых структур с разветвлениями. Biotechnol. Bioeng. 112 , 1047–1055 (2015).

CAS PubMed Google Scholar

13.

Hinton, T. J. et al. Трехмерная печать сложных биологических структур путем обратимого встраивания суспендированных гидрогелей произвольной формы. Sci. Adv. 1 , e1500758 (2015).

PubMed PubMed Central Google Scholar

14.

Lee, A. et al. Трехмерная биопечать коллагена для восстановления компонентов сердца человека. Наука 365 , 482–487 (2019).

CAS PubMed Google Scholar

15.

Чжан Р. и Ларсен Н. Б. Стереолитографическая гидрогелевая печать трехмерных культуральных чипов с биофункциональными сложными трехмерными перфузионными сетями. Lab Chip 17 , 4273–4282 (2017).

CAS PubMed Google Scholar

16.

Meyer, W. et al. Мягкие полимеры для построения малых и мельчайших систем кровоснабжения с помощью стереолитографии. J. Funct. Биоматер. 3 , 257–268 (2012).

PubMed PubMed Central Google Scholar

17.

Бранденберг, Н.И Лутольф, М. П. Формирование паттерна микрофлюидных сетей in situ в трехмерных гидрогелях, нагруженных клетками. Adv. Матер. 28 , 7450–7456 (2016).

CAS PubMed Google Scholar

18.

Heintz, K. A. et al. Изготовление трехмерных биомиметических микрофлюидных сетей в гидрогелях. Adv. Здоровьеc. Матер. 5 , 2153–2160 (2016).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

19.

Аракава, К. К., Бадо, Б. А., Чжэн, Ю. и ДеФорест, С. А. Многоклеточные васкуляризованные инженерные ткани посредством программируемого пользователем фотодеградации биоматериалов. Adv. Мат. 29 , 1703156 (2017).

Google Scholar

20.

Григорян Б. и др. Функциональные внутрисосудистые топологии и мультиваскулярные сети в биосовместимых гидрогелях. Наука 364 , 458–464 (2019).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

21.

Голден, А. П. и Тиен, Дж. Изготовление микрофлюидных гидрогелей с использованием формованного желатина в качестве жертвенного элемента. Lab Chip 7 , 720–725 (2007).

CAS PubMed Google Scholar

22.

Miller, J. S. et al. Быстрое моделирование структурированных сосудистых сетей для трехмерных тканей, пригодных для перфузии. Nat. Матер. 11 , 768–774 (2012).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

23.

Bégin-Drolet, A. et al. Дизайн головки 3D-принтера для аддитивного производства сахарного стекла для приложений тканевой инженерии. Доп. Manuf. 15 , 29–39 (2017).

Google Scholar

24.

Гелбер, М. К., Херст, Г., Коми, Т. Дж. И Бхаргава, Р. Конструирование на основе моделей и описание высокоточного процесса 3D-печати для углеводного стекла. Доп. Manuf. 22 , 38–50 (2018).

CAS Google Scholar

25.

Homan, K. A. et al. Биопечать 3D извитых проксимальных канальцев почек на перфузионных чипах. Sci. Отчет 6 , 34845 (2016).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

26.

Колесский Д. Б. и др. Трехмерная биопечать васкуляризированных гетерогенных тканевых конструкций с клетками. Adv.Матер. 26 , 3124–3130 (2014).

CAS PubMed Google Scholar

27.

Колески Д. Б., Хоман К. А., Скайлар-Скотт М. А. и Льюис Дж. А. Трехмерная биопечать толстых васкуляризированных тканей. Proc. Natl Acad. Sci. США 113 , 3179–3184 (2016).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

28.

Скайлар-Скотт, М.А. и др. Биопроизводство органоспецифических тканей с высокой плотностью клеток и встроенными сосудистыми каналами. Sci. Adv. 5 , eaaw2459 (2019).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

29.

Ву, В., Деконинк, А. и Льюис, Дж. А. Всенаправленная печать трехмерных микрососудистых сетей. Adv. Матер. 23 , h278 – h283 (2011 г.).

CAS PubMed Google Scholar

30.

Сонг, К. Х., Хайли, К. Б., Рафф, А. и Бердик, Дж. А. Сложные микроканалы, напечатанные на 3D-принтере, в разлагаемых клетками гидрогелях. Adv. Функц. Матер. 28 , 1801331 (2018).

Google Scholar

31.

Pimentel, C. R. et al. Трехмерное изготовление толстых и густонаселенных мягких конструкций со сложной и активно перфузируемой сетью каналов. Acta Biomater. 65 , 174–184 (2018).

Google Scholar

32.

Kinstlinger, I. S. et al. Селективное лазерное спекание с открытым исходным кодом (OpenSLS) нейлона и биосовместимого поликапролактона. PLoS ONE 11 , e0147399 (2016).

PubMed PubMed Central Google Scholar

33.

Roszelle, B. N. et al. Эффект отводящего потока на гемодинамику церебральной аневризмы: сравнение телескопических стентов и трубопровода in vitro in vitro. Нейрорадиология 55 , 751–758 (2013).

PubMed Google Scholar

34.

Саггиомо В. и Велдерс А. Х. Простой метод снятия каркаса, напечатанный на 3D-принтере, для изготовления сложных микрофлюидных устройств. Adv. Sci. 2 , 1500125 (2015).

Google Scholar

35.

Nguyen, L.H. et al. Инженерия васкуляризированной костной ткани: подходы к потенциальному улучшению. Tissue Eng. Часть B 18 , 363–382 (2012).

CAS Google Scholar

36.

Нгуен, К. Т., Хванг, Ю., Чен, А. С., Варгезе, С. и Сах, Р. Л. Механические свойства гидрогелей поли (этиленгликоля) -диакрилата, подобные хрящам. Биоматериалы 33 , 6682–6690 (2012).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

37.

Partlow, B.P. et al. Эластомерные шелковые биоматериалы с высокой степенью настройки. Adv. Функц. Матер. 24 , 4615–4624 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

38.

Mooney, R., Tawil, B. & Mahoney, M. Специфические концентрации фибриногена и тромбина способствуют росту нейронов, а не глии, когда первичные нервные клетки засеваются внутри фибриновых гелей, полученных из плазмы. Tissue Eng.Часть A 16 , 1607–1619 (2010).

CAS PubMed Google Scholar

39.

Дуонг, Х., Ву, Б. и Тавил, Б. Модуляция трехмерной жесткости фибринового матрикса за счет собственных композиций фибриноген-тромбин и внешней клеточной активности. Tissue Eng. Часть A 15 , 1865–1876 (2009).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

40.

Субхаш, Г., Лю, К., Мур, Д. Ф., Ифджу, П. Г., Хейл, М. А. Концентрационная зависимость поведения при растяжении в агарозном геле с использованием корреляции цифровых изображений. Exp. Мех. 51 , 255–262 (2011).

CAS Google Scholar

41.

Feugier, F. G., Mochizuki, A. & Iwasa, Y. Самоорганизация сосудистой системы в листьях растений: взаимозависимая динамика потока ауксина и белков-носителей. Дж.Теор. Биол. 236 , 366–375 (2005).

CAS PubMed Google Scholar

42.

Fujita, H. & Mochizuki, A. Происхождение разнообразия рисунка жилкования листьев. Dev. Дин. 235 , 2710–2721 (2006).

PubMed Google Scholar

43.

Рунионс, А., Лейн, Б. и Прусинкевич, П. Моделирование деревьев с помощью алгоритма космической колонизации.В Proc. 3-я Еврографическая конференция по природным явлениям (Эдс Эберт, Д. и Мериллу, С.) 63–70 (Еврографическая ассоциация, 2007).

44.

Мюррей, К. Д. Физиологический принцип минимальной работы, применяемый к углу разветвления артерий. J. Gen. Physiol. 9 , 835–841 (1926).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

45.

Мигель А.Ф. Дендритный дизайн как архетип закономерностей роста в природе: фрактальные и конструктивные взгляды. Фронт. Phys. 2 , 9 (2014).

Google Scholar

46.

Moon, J. J. et al. Биомиметические гидрогели с проангиогенными свойствами. Биоматериалы 31 , 3840–3847 (2010).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

47.

Calderon, G. et al. Тубулогенез совместно культивируемых эндотелиальных клеток, полученных из ИПС человека, и мезенхимальных стволовых клеток человека в гелях фибрина и желатинметакрилата. Biomater. Sci. 5 , 1652–1660 (2017).

CAS PubMed Google Scholar

48.

Эскин, С. Г., Айвс, К., Макинтайр, Л. и Наварро, Л. Ответ культивируемых эндотелиальных клеток на установившийся поток. Microvasc. Res. 28 , 87–94 (1984).

CAS PubMed Google Scholar

49.

Ян, П. Дж., Теменофф, Дж.С. Инженерные ортопедические тканевые интерфейсы. Tissue Eng. Часть B 15 , 127–141 (2009).

CAS Google Scholar

50.

Eckes, B. et al. Взаимодействие фибробластов с матрицей при заживлении ран и фиброзе. Matrix Biol. 19 , 325–332 (2000).

CAS PubMed Google Scholar

51.

Лу, П., Уивер, В. М. и Верб, З.Внеклеточный матрикс: динамическая ниша в прогрессировании рака. J. Cell Biol. 196 , 395–406 (2012).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

52.

Radisic, M. et al. Градиенты кислорода коррелируют с плотностью и жизнеспособностью клеток в сконструированной сердечной ткани. Biotechnol. Bioeng. 93 , 332–343 (2006).

CAS PubMed Google Scholar

53.

Tocchio, A. et al. Универсальное изготовление васкуляризуемых каркасов для инженерии крупных тканей в биореакторах. Биоматериалы 45 , 124–131 (2015).

CAS PubMed Google Scholar

54.

Цанг, В. Л. и др. Изготовление трехмерных печеночных тканей путем аддитивного фотонного моделирования клеточных гидрогелей. FASEB J. 21 , 790–801 (2007).

CAS Google Scholar

55.

Krogh, A. Количество и распределение капилляров в мышцах с расчетами напора кислорода, необходимого для снабжения тканей. J. Physiol. 52 , 409–415 (1919).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

56.

Льюис, М.С., Макартур, Б.Д., Мальда, Дж., Петет, Г. и Плейс, К.П. Гетерогенная пролиферация в модифицированной хрящевой ткани: роль давления кислорода. Biotechnol. Bioeng. 91 , 607–615 (2005).

CAS PubMed Google Scholar

57.

Demol, J., Lambrechts, D., Geris, L., Schrooten, J. & Van Oosterwyck, H. К количественному пониманию эволюции напряжения кислорода и плотности клеток в фибриновых гидрогелях. Биоматериалы 32 , 107–118 (2011).

CAS PubMed Google Scholar

58.

Гу, В. Ю., Яо, Х., Хуанг, К. Ю. и Чунг, Х. С. Новое понимание деформационно-зависимой гидравлической проницаемости гелей и хрящей, а также динамического поведения гелей агарозы при ограниченном сжатии. J. Biomech. 36 , 593–598 (2003).

CAS PubMed Google Scholar

59.

Chuppa, S. et al. Температура ферментера как инструмент контроля перфузионных культур клеток млекопитающих с высокой плотностью. Biotechnol. Bioeng. 55 , 328–338 (1997).

CAS PubMed Google Scholar

60.

Дюкомман, П., Руффье, П. А., Кадури, А., фон Стокар, У. и Марисон, И. В. Мониторинг влияния температуры на метаболизм клеток животных в процессе плотного слоя. Biotechnol. Bioeng. 77 , 838–842 (2002).

CAS PubMed Google Scholar

61.

Jorjani, P. & Ozturk, S. S. Влияние плотности клеток и температуры на скорость потребления кислорода для различных линий клеток млекопитающих. Biotechnol. Bioeng. 64 , 349–356 (1999).

CAS PubMed Google Scholar

62.

Xiang, C. et al. Долгосрочное функциональное поддержание первичных гепатоцитов человека in vitro. Наука 364 , 399–402 (2019).

CAS PubMed Google Scholar

63.

Бхатиа, С. Н., Балис, У. Дж., Ярмуш, М. Л. и Тонер, М. Влияние межклеточных взаимодействий на сохранение клеточного фенотипа: совместное культивирование гепатоцитов и непаренхимных клеток. FASEB J. 13 , 1883–1900 (1999).

CAS PubMed Google Scholar

64.

Stevens, K. R. et al. Формование InVERT для масштабируемого управления микроархитектурой тканей. Nat. Commun. 4 , 1847 (2013).

CAS PubMed Google Scholar

65.

Stevens, K. R. et al. Экспансия in situ сконструированной ткани печени человека на мышиной модели хронического заболевания печени. Sci. Пер. Med. 9 , eaah5505 (2017).

PubMed PubMed Central Google Scholar

66.

Хетани С. Р. и Бхатиа С. Н. Микромасштабная культура клеток печени человека для разработки лекарств. Nat. Biotechnol. 26 , 120–126 (2008).

CAS PubMed Google Scholar

67.

Бхатиа, С. Н., Андерхилл, Г. Х., Зарет, К. С. и Фокс, И. Дж. Клеточная и тканевая инженерия при заболеваниях печени. Sci. Пер. Med. 6 , 245ср2 (2014).

PubMed PubMed Central Google Scholar

68.

Рафии, С., Батлер, Дж.М. и Дин, Б.-С. Ангиокринные функции органоспецифических эндотелиальных клеток. Природа 529 , 316–325 (2016).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

69.

Baranski, J. D. et al. Геометрический контроль сосудистых сетей для улучшения интеграции и функционирования инженерных тканей. Proc. Natl Acad. Sci USA 110 , 7586–7591 (2013).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

70.

Mirabella, T. et al. Напечатанные на 3D-принтере сосудистые сети направляют терапевтический ангиогенез при ишемии. Nat. Биомед. Англ. 1 , 0083 (2017).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

71.

Lindström, N.O. et al. Сохраненные и расходящиеся молекулярные и анатомические особенности формирования паттерна нефронов человека и мыши. J. Am. Soc. Нефрол. 29 , 825–840 (2018).

PubMed PubMed Central Google Scholar

72.

Bosco, D. et al. Уникальное расположение α- и β-клеток на островках Лангерганса человека. 59 , 1202–1210 (2010).

73.

Wang, X.-N. и другие. Трехмерный атлас кожных лейкоцитов, лимфатических сосудов и кровеносных сосудов человека. J. Invest. Дерматол. 134 , 965–974 (2014).

CAS PubMed Google Scholar

74.

Kang, H.-W. и другие. Система трехмерной биопечати для создания тканевых конструкций человеческого масштаба со структурной целостностью. Nat. Biotechnol. 34 , 312–319 (2016).

CAS PubMed Google Scholar

75.

Shapiro, A.J. et al. Трансплантация островков у семи пациентов с сахарным диабетом 1 типа с использованием иммуносупрессивного режима без глюкокортикоидов. N. Engl. J. Med. 343 , 230–238 (2000).

CAS PubMed Google Scholar

76.

Янсанте В., Митри Р. Р., Филиппи К., Фитцпатрик Э. и Дхаван А. Трансплантация гепатоцитов человека при заболеваниях печени: текущее состояние и перспективы на будущее. Педиатр. Res. 83 , 232–240 (2018).

CAS PubMed Google Scholar

77.

Parker Ponder, K. et al. Гепатоциты мыши мигрируют в паренхиму печени и функционируют неопределенно долго после трансплантации селезенки. Proc. Natl Acad.Sci. США 88 , 1217–1221 (1991).

Google Scholar

78.

Труслоу, Дж. Г. и Тиен, Дж. Перфузионные системы, которые минимизируют объемную долю сосудов в сконструированных тканях. Биомикрофлюидикс 5 , 022201 (2011).

PubMed Central Google Scholar

79.

Ронелленфич, Х. и Катифори, Э. Глобальная оптимизация, локальная адаптация и роль роста в распределительных сетях. Phys. Rev. Lett. 117 , 138301 (2016).

PubMed Google Scholar

80.

Freeman, R. Измерение свойств текучести консолидированных, кондиционированных и аэрированных порошков — сравнительное исследование с использованием порошкового реометра и ротационной сдвиговой ячейки. Порошок Технол. 174 , 25–33 (2007).

CAS Google Scholar

81.

Тадавирул Н., Павазант П. и Супапхол П. Разработка пористых каркасов из поликапролактона путем сочетания методов литья из растворителя, выщелачивания частиц и выщелачивания полимеров для инженерии костной ткани. J. Biomed. Матер. Res. А 102 , 3379–3392 (2013).

PubMed Google Scholar

82.

Miller, J. S. et al. Биоактивные гидрогели, изготовленные из макромеров ПЭГ-пептидов, полученных в результате ступенчатого роста. Биоматериалы 31 , 3736–3743 (2010).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

83.

Rockwood, D. N. et al. Изготовление материалов из фиброина шелка Bombyx mori . Nat. Protoc. 6 , 1612–1631 (2011).

CAS PubMed Google Scholar

84.

Ли В., Жермен Р. Н. и Гернер М. Ю. Мультиплекс, количественный клеточный анализ в больших объемах тканей с трехмерной микроскопией с улучшенным просветлением (C _e 3D). Proc. Natl Acad. Sci. США 114 , E7321 – E7330 (2017).

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

85.

Thielicke, W. & Stamhuis, E. J. PIVlab — к удобной, доступной и точной цифровой велосиметрии изображений частиц в MATLAB. J. Open Res. Софтв. 2 , e30 (2014).

Google Scholar

86.

Thielicke, W. Парящие птицы — анализ и применение . Кандидатская диссертация, Государственный университет Гронингена (2014).

87.

Thielicke, W. & Stamhuis, E. J. PIVlab — инструмент для измерения скорости цифрового изображения частиц с временным разрешением для MATLAB https://doi.org/10.6084/M9.FIGSHARE.1092508.V5 (2014).

88.

Cheng, N.-S. Формула вязкости смеси глицерин – вода. Ind. Eng. Chem. Res. 47 , 3285–3288 (2008).

CAS Google Scholar

89.

Volk, A. & Kähler, C.J. Модель плотности для водных растворов глицерина. Exp. Жидкости 59 , 75 (2018).

Google Scholar

90.

van de Loosdrecht, AA, Beelen, RH, Ossenkoppele, GJ, Broekhoven, MG & Langenhuijsen, MM Колориметрический анализ МТТ на основе тетразолия для количественного определения цитотоксичности, опосредованной моноцитами человека, в отношении клеточных линий острой лейкемии и лейкозных клеток. миелоидный лейкоз. J. Immunol. Методы 174 , 311–320 (1994).

PubMed Google Scholar

91.

Аренс, Дж., Гевеси, Б. и Ло, К. в Справочник по визуализации (ред. Хансен, К. Д. и Джонсон, К. Р.) 717–731 (2005).

Улучшенная регенерация костных дефектов с использованием спеченных пористых каркасов из Ti6Al4V, встроенных в мезенхимальные стволовые клетки и богатую тромбоцитами плазму

Для изготовления пористого каркаса из Ti6Al4V была использована новая контролируемая технология спекания порошка.Плазма, обогащенная тромбоцитами (PRP), была приготовлена ​​с использованием цельной крови. PRP использовали в качестве клеточного носителя для инъекции мезенхимальных стволовых клеток костного мозга (MSC) в поры каркаса Ti6Al4V в присутствии хлорида кальция и тромбина, а затем получали композитную конструкцию из пористого Ti6Al4V, нагруженного гелем PRP и MSC. . Чистый каркас Ti6Al4V и каркас Ti6Al4V, нагруженный MSC, использовали в качестве контроля. Характеристики и механические свойства каркаса, а также биологические свойства конструкций оценивали в серии экспериментов in vitro, и , in vivo, .Результаты показывают, что спеченный пористый Ti6Al4V имеет хорошую биосовместимость, высокую пористость и большой размер пор, что может обеспечить достаточное пространство и достаточную механическую поддержку для роста клеток и костей без очевидного эффекта защиты от напряжения. Однако Ti6Al4V / MSC / PRP показал значительно более высокую скорость пролиферации клеток, более высокую скорость роста костей, большее прорастание кости и более высокую межфазную прочность. Следовательно, пористые каркасы Ti6Al4V, объединенные с MSC и PRP, могут быть более эффективными для усиления регенерации кости и, как ожидается, будут использоваться для восстановления костных дефектов.

Эта статья в открытом доступе

Подождите, пока мы загрузим ваш контент… Что-то пошло не так. Попробуй еще раз?

Сладкий способ 3D-печати кровеносных сосудов

Сложные сахарные сети растворяются, создавая пути для крови в тканях, выращенных в лаборатории

Сахарная пудра — специальный ингредиент в рецепте Университета Райса, имитирующий сложные разветвленные кровеносные сосуды в тканях, выращенных в лаборатории.

В исследовании, опубликованном сегодня в журнале Nature Biomedical Engineering, биоинженеры Райса показали, что они могут поддерживать жизнь плотно упакованных клеток в течение двух недель в относительно больших конструкциях, создавая сложные сети кровеносных сосудов из шаблонов сахара, напечатанного на 3D-принтере.

«Одним из самых больших препятствий на пути к созданию клинически значимых тканей является упаковка большой тканевой структуры сотнями миллионов живых клеток», — сказал ведущий автор исследования Ян Кинстлингер, аспирант по биоинженерии инженерной школы Райс Браун.«Доставка достаточного количества кислорода и питательных веществ ко всем клеткам в этом большом объеме ткани становится грандиозной задачей».

Кинстлингер объясняет, что природа решила эту проблему путем эволюции сложных сосудистых сетей, которые переплетаются через наши ткани и органы, образуя узоры, напоминающие ветви деревьев. Сосуды одновременно становятся меньше по толщине, но их количество увеличивается по мере того, как они отходят от центрального ствола, что позволяет кислороду и питательным веществам эффективно доставляться к клеткам по всему телу.

Аспирант биоинженерии Университета Райса Ян Кинстлингер с шаблоном кровеносного сосуда, который он напечатал на 3D-принтере из сахарной пудры. Кинстлингер является ведущим соавтором исследования, которое показало, что выращенные в лаборатории ткани, сделанные из таких матриц, имеют достаточный кровоток для поддержания плотно упакованных клеток. (Фото Джеффа Фитлоу / Университет Райса)

«Разрабатывая новые технологии и материалы, имитирующие естественные сосудистые сети, мы приближаемся к тому моменту, когда мы можем обеспечить кислородом и питательными веществами достаточное количество клеток для достижения значимой долгосрочной терапевтической функции», — сказал Кинстлингер.

Сахарные шаблоны были напечатаны на 3D-принтере с помощью модифицированного лазерного резака с открытым исходным кодом в лаборатории, соавтором исследования, Джорданом Миллером, доцентом кафедры биоинженерии в Райс.

«Процесс 3D-печати, который мы здесь разработали, похож на приготовление очень точного крем-брюле», — сказал Миллер, чьим первоначальным вдохновением для проекта был замысловатый десерт.

Миллер сказал, что сложные, детализированные структуры стали возможными благодаря селективному лазерному спеканию, процессу 3D-печати, при котором мельчайшие частицы порошка превращаются в твердые 3D-объекты.В отличие от более распространенной экструзионной 3D-печати, где расплавленные нити материала осаждаются через сопло, лазерное спекание работает путем мягкого плавления и сплавления небольших участков в уплотненном слое сухого порошка. Как экструзия, так и лазерное спекание создают трехмерные формы по одному двухмерному слою за раз, но лазерный метод позволяет создавать структуры, которые в противном случае были бы склонны к разрушению при экструдировании, сказал он.

«Существуют определенные архитектуры, такие как нависающие структуры, разветвленные сети и многососудистые сети, с которыми вы действительно не справитесь с экструзионной печатью», — сказал Миллер, который продемонстрировал концепцию создания сахарных шаблонов с помощью 3D-экструзионного принтера во время своих постдокторских исследований. в Университете Пенсильвании.Миллер начал работу над методом лазерного спекания вскоре после прихода в Райс в 2013 году.

Джордан Миллер — доцент кафедры биоинженерии в Университете Райса (Фото Джеффа Фитлоу / Университет Райса)

«Селективное лазерное спекание дает нам гораздо больший контроль во всех трех измерениях, позволяя нам легко получать доступ к сложным топологиям, сохраняя при этом полезность сахарного материала», — сказал он.

Сахар особенно полезен при создании шаблонов кровеносных сосудов, поскольку он прочен в сухом состоянии и быстро растворяется в воде, не повреждая близлежащие клетки.Для изготовления салфеток Kinstlinger использует специальную смесь сахаров для печати шаблонов, а затем заполняет объем вокруг напечатанной сахарной сети смесью клеток в жидком геле. Гель становится полутвердым в течение нескольких минут, а затем сахар растворяется и смывается, оставляя открытый проход для питательных веществ и кислорода.

«Основным преимуществом этого подхода является скорость, с которой мы можем создать каждую тканевую структуру», — сказал Кинстлингер. «Мы можем создать одни из самых крупных моделей тканей, которые были продемонстрированы, менее чем за пять минут.”

Миллер сказал, что новое исследование отвечает на два важных вопроса: какие сахара могут быть спечены в когерентные структуры и какие вычислительные алгоритмы могут создавать сложные ветвящиеся архитектуры, имитирующие те, что встречаются в природе?

Вычислительный алгоритм, который сгенерировал древовидную сосудистую архитектуру в исследовании, был создан в сотрудничестве с Nervous System, дизайнерской студией, которая использует компьютерное моделирование для создания уникальных произведений искусства, украшений и предметов домашнего обихода, вдохновленных узорами, встречающимися в природе.

Образец шаблонов кровеносных сосудов, которые биоинженеры Университета Райса напечатали на 3D-принтере с использованием специальной смеси порошкообразных сахаров. (Фото Б. Мартина / Университет Райса)

«Мы используем алгоритмы, вдохновленные природой, для создания функциональных сетей для тканей», — сказала Джессика Розенкранц, соучредитель и креативный директор Nervous System и соавтор исследования. «Поскольку наш подход является алгоритмическим, можно создавать индивидуальные сети для различных целей».

После создания тканей, сформированных с помощью этих компьютерно сгенерированных сосудистых архитектур, команда продемонстрировала засева эндотелиальных клеток внутри каналов и сосредоточилась на изучении выживания и функции клеток, выросших в окружающей ткани, включая клетки печени грызунов, называемые гепатоцитами.Эксперименты с гепатоцитами проводились в сотрудничестве с биоинженером Вашингтонского университета (UW) и соавтором исследования Келли Стивенс, исследовательская группа которой специализируется на изучении хрупких клеток, которые, как известно, трудно поддерживать вне тела.

«Этот метод можно использовать с гораздо более широким спектром коктейлей из материалов, чем многие другие технологии биопечати», — сказал Стивенс. «Это делает его невероятно универсальным».

Миллер сказал: «Мы показали, что перфузия через трехмерные сосудистые сети позволяет нам поддерживать эти большие печеночные ткани.Хотя по-прежнему существуют давние проблемы, связанные с поддержанием функции гепатоцитов, способность как генерировать большие объемы ткани, так и поддерживать клетки в этих объемах в течение достаточного времени для оценки их функции является захватывающим шагом вперед ».

Аспирант Ян Кинстлингер готовит систему селективного лазерного спекания в лаборатории биоинженерии Миллера в Университете Райса. Kinstlinger использует систему для 3D-печати шаблонов кровеносных сосудов из сахарной пудры. Шаблоны позволяют биоинженерам создавать ткани, выращенные в лаборатории, с достаточным кровотоком для поддержания плотно упакованных клеток.(Фото Джеффа Фитлоу / Университет Райса)

Стивенс — доцент кафедры биоинженерии Инженерного колледжа UW, доцент кафедры патологии Медицинской школы UW и исследователь Медицинского института стволовых клеток и регенеративной медицины UW.

Дополнительные авторы: Жизель Кальдерон, Карен Васкес Руис, Дэвид Ялацки, Палваша Деме, Кевин Янсон, Даниэль Сазер и Сааранг Панчавати, все из Райс; Сара Сакстон и Фредрик Йоханссон, оба из UW; Джесси Луи-Розенберг из компании Nervous System; и Карл-Димитер Биссиг из медицинского колледжа Бейлора.

Работа была поддержана Фондом Роберта Дж. Клеберга-младшего и Хелен К. Клеберг, Национальными институтами здравоохранения и Научно-исследовательским институтом профилактики рака Техаса через Техасский консорциум гепатоцеллюлярной карциномы.

Разница между ePTFE и спеченной мембраной из PTFE

В чем разница между ePTFE и спеченным PTFE?

Ави Роббинс, вице-президент по глобальному развитию продуктов и исследований и разработок
13 декабря 2019 г.

Внутри многих обычных продуктов, таких как сотовые телефоны и фары, есть невидимые защитные вентиляционные отверстия (иногда называемые защитными вентиляционными отверстиями).Вентиляционные отверстия изготовлены из прочного универсального материала, называемого ПТФЭ или политетрафторэтилен.

В целом пористый ПТФЭ — это материал, который позволяет воздуху и другим газам проходить через удерживая более крупные молекулы, такие как вода, снаружи. Его уникальный состав делает его идеальным для защиты вентиляционных отверстий. Внутри сотового телефона, например, тонкий ПТФЭ размером с десять центов. пленка находится за микрофоном и действует как вентиляционное отверстие, позволяя воздуху течь сквозь, отталкивая загрязнения, такие как вода и пыль.

На самом деле существует два типа пористого PTFE: расширенный PTFE или ePTFE и спеченный PTFE.Какая разница? Позволь мне объяснить.

Вот как выглядит изображение ePTFE, полученное с помощью SEM:

ePTFE

А вот как выглядит SEM-изображение спеченного PTFE:

POREX Virtek спеченный PTFE

Расширенный ПТФЭ против спеченного ПТФЭ

Цель оба типа ПТФЭ должны обеспечивать воздухопроницаемый барьер, но вот чем они отличаются:

Подумайте о материале ePTFE как ткань. Он легко мнется, и чем больше вы с ним беретесь, тем больше вероятность это разорвать.

Спеченный ПТФЭ сильнее. Вы можете увидеть и почувствовать разницу в материале, а в отличие от ePTFE, он не сломается при прикосновении.

Поскольку материал ePTFE чувствительна к прикосновениям, часто требует поддержки. В результате многие расширенные ПТФЭ пленки, используемые в защитных вентиляционных отверстиях, ламинируются на ткань, чтобы минимизировать повреждение.

С спеченным ПТФЭ, дополнительная поддержка не требуется. Фактически, спеченный ПТФЭ можно ультразвуковая сварка к пластику.

Когда материал ePTFE При касании воздушный поток резко падает.Подумайте, что это может сделать с продукт, для работы которого необходим воздушный поток.

Испытания показывают воздух однако поток в вентиляционном отверстии из спеченного ПТФЭ остается неизменным при прикосновении.

ПТФЭ предназначен отталкивать воду, но ePTFE и спеченный PTFE по-разному справляются с водой. Когда вода встречается с ePTFE, он рассыпается и может быть унесен, но некоторая часть воды часто прилипает к пленке. Оставшаяся вода может создать проблему и быть засасывается, например, в ограждение.

Когда вода встречает спеченный PTFE, он также рассыпается и может быть удален, но капли воды не остаются без внимания и, как следствие, обеспечивают превосходную защиту продукта.

Заключение

Защитные вентиляционные отверстия, изготовленные из компонентов PTFE, можно найти в различных электрических, промышленных, медицинских и потребительских приложениях. Когда инженеры создают продукты, важно понимать разницу между ePTFE и спеченным PTFE. Чтобы сравнить материал ePTFE с спеченным PTFE POREX Virtek ™, посмотрите это видео или запросите образец, чтобы узнать, как мы можем защитить ваш продукт.

металлов | Бесплатный полнотекстовый | Деградация титана, спеченного с магнием: влияние поглощения водорода

1.Введение

Металлические имплантаты обычно применяются в ортопедической и черепно-лицевой хирургии, стоматологической практике и в качестве сосудистых стентов [1]. Титан и титановые сплавы из-за их высокой прочности, низкой плотности, высокой коррозионной стойкости, инертности по отношению к окружающей среде и отличной целостности костей широко используются от бедра до запястья и в качестве материалов для фиксации кости [2]. Исследования in vitro титановой пены и остеобластов человека показали, что клетки дифференцируются в зрелые костные клетки с остеоиндуктивными свойствами, что делает титан уникальным среди металлов [3].Магний, как биоразлагаемый металлический материал, предлагает дополнительные возможности благодаря своей биосовместимости, резорбируемости и антибактериальным свойствам [4]. Контролируемая деградация магниевых имплантатов уже используется в современной медицине (подтверждено недавними метааналитическими исследованиями клинических испытаний [5]), с потенциалом роста, поскольку роль Mg в заживлении костей становится более ясной [6]. Это вполне естественно, что прилагаются значительные усилия по объединению лучших свойств обоих материалов (Mg и Ti) с целью преодоления хорошо известных ограничений металлических имплантатов, таких как эффект защиты от напряжения [7] и восприимчивость к инфекциям [8].Гибридный материал имплантата, который состоит из постоянной Ti и временной Mg частей (биметаллических пар), может использоваться в случаях, когда требуется высокая прочность титана и стимуляция кости за счет разложения магния и / или ожидается только частичное ремоделирование кости, так как в случае ревизионных операций [9]. Эти гибридные материалы позволяют также конструировать устройства для доставки лекарств, то есть загружать постоянные и / или временные части лекарствами. Сообщалось, что нанесение пленок магния на пористый титан и локальное высвобождение ионов магния с поверхностей имплантата улучшают имплантат. задержка, остеогенез и ангиогенез [10,11,12].Было объявлено о разработке гибридной системы фиксации, которая включает комбинацию винтов Mg и Ti вместо винтов Ti [13,14]. Удалось не только уменьшить количество удалений винтов после заживления, но и улучшить регенерацию кости, подавить резорбцию кости и вызвать образование кровеносных сосудов в сочетании с антибактериальным эффектом. В модели кролика разрушающая нагрузка увеличилась на 30% после 12 недель применения [14]. Существуют особые требования к соединению, сочетающему части Ti и Mg: оно должно быть достаточно прочным для позиционирования имплантата в теле и, в В случае титановых сплавов возможная диффузия легирующих элементов из Ti-части в Mg-часть должна быть незначительной.Низкая растворимость между Ti и Mg является хорошим предположением для последнего требования, но может препятствовать прочному соединению в атомном масштабе [15]. Однако исследования пористых композитов Ti / Mg, где Mg играет роль разлагаемой анодной части, которая дает пространство для прорастающих ячеек, показывают, что сцепление между Mg и Ti является достаточным для надлежащих механических характеристик [16]. одновременное использование Ti и Mg — это большая разница в электрохимическом потенциале Mg и Ti, которая может привести к ускоренной деградации Mg.Исследования in vivo и in vitro показали, что расстояние 5 мм между частями Mg и Ti является критическим для разложения Mg. Скорее всего, кровеносные сосуды образуют хорошее электрическое соединение, которое усиливает деградацию Mg [17]. Чтобы преодолеть повышенную коррозию, можно использовать полимерный слой между деталями из Mg и Ti, как это применялось в гибридной системе фиксации [13]. . Другой возможностью является выбор подходящих сплавов Mg, таких как сплавы AZ, содержащие алюминий и цинк, которые все еще демонстрируют приемлемую скорость разложения при контакте с титановыми сплавами [18,19].Однако присутствие алюминия ограничивает их применение в качестве материала имплантата. В вышеупомянутых исследованиях было постулировано, что Ti-материал не подвержен деградации Mg. Чтобы выяснить, является ли это предположение оправданным, в настоящем исследовании мы построили гибридные образцы сплава Ti-Mg и сплава Ti64-Mg (здесь: Ti64, определяемого как сплав Ti-6Al-4V) с помощью метода порошковой металлургии. Технологии порошковой металлургии, основанные на спекании, такие как литье металла под давлением (MIM), часто используются для производства образцов с переменной формой и механическими характеристиками, а также применяются для Ti и его сплавов [20,21].Спекание порошка Mg является более сложной задачей [22,23] из-за более высокой температуры плавления оксидного слоя Mg, чем объемного Mg. Однако добавление небольшого количества Ca помогает разрушить поверхностный оксидный слой частиц Mg, который в противном случае препятствует спеканию. В принципе, спекание дает довольно хорошую механическую связь между Ti и Mg и может быть использовано для изготовления имплантатов [24]. Однако влияние разрушения на Ti-материал еще не исследовано. В настоящей работе была проведена деградация Mg-части гибридных образцов в физиологическом растворе и изучены связанные с этим возможные изменения в составе, фазовой структуре и механических свойствах Ti-части.Наблюдаются значительные изменения титановых деталей, которые следует учитывать при дальнейшем одновременном применении имплантатов Mg и Ti, и которые могут быть использованы для оптимизации свойств будущих имплантатов.

3. Результаты

После термической обработки спеканием дисков Mg-0.6Ca / Ti при 640 ° C в течение 8 часов между двумя материалами было получено плотное соединение (рис. 2), что и ожидалось из предыдущих исследований [24]. Для экспериментов по коррозии пары Mg-0.6Ca / Ti помещали в физиологический раствор (0.9 мас.% NaCl). Разложение Mg-сплава было очень быстрым (рис. 2). В отличие от несвязанного образца, деталь из магниевого сплава полностью растворилась всего лишь через два дня погружения. Впоследствии не было выделено дополнительных H ₂ . Это указывает на то, что Mg полностью растворился в результате следующей реакции:

Mg + 2h3O → MgOh3 + h3 ↑

(1)

Это согласуется с недавними исследованиями композитов Mg (-сплав) / Ti64, в которых чистые сплавы Mg и WE показали очень высокую скорость разложения [18] с полным разложением в течение 1-2 дней.Количество высвободившегося H ₂ (~ 800 мл) соответствовало общей массе Mg (0,819 г) согласно уравнению (1). После экспериментов по коррозии пластины из Ti были очищены хромовой кислотой от продуктов коррозии Mg. Следы Mg на пластинах Ti не обнаруживаются с помощью рентгенофлуоресцентного анализа. С другой стороны, пластина из титана частично изменила цвет (рис. 3), что обычно связано с изменением толщины оксидного слоя. Сравнение веса титановых пластин до и после коррозии Mg-детали показало увеличение веса (рис. 4).Здесь были проанализированы пять дисков Ti. Это означало, что титан поглощал некоторые элементы при коррозии Mg. Однако планки ошибок были довольно высокими, поэтому эффект оказался небольшим. На рисунке 4 показано сравнение образцов Ti, которые были обработаны аналогичным образом (экспозиция в физиологическом растворе и обработка хромовой кислотой), но без связи с Mg. Для химического анализа образцы после разложения Mg были разрезаны на более мелкие кусочков (~ 50 мг) и по сравнению с несвязанным Ti после такой же обработки.Химический анализ показал, что было небольшое изменение концентрации O и N и значительное увеличение содержания H (Рисунок 5). Следует отметить, что такое значительное увеличение содержания H с менее 50 мкг / г до более 1000 мкг / г происходило при комнатной температуре и являлось прямым результатом магниевой коррозии. Были проведены дополнительные испытания для проверки других возможных источников (обработка хромовой кислотой, одновременное нагревание Ti и Mg) загрузки H в рамках применяемого процесса.Однако результаты были отрицательными, и эти факторы не могли вызвать поглощение водорода Ti. При применении высоких температур (1100 ° C) и вакуума в течение 2 часов нагруженный водород снова высвобождался, поэтому концентрация упала ниже 1 мкг / г (рис. 5). Таким образом, было доказано, что действительно водород загружался в титан при комнатной температуре, что обычно не ожидается из-за присущего ему плотного и защитного оксидного слоя на Ti. Очень важно знать, как водород распределялся в Ti.СЭМ-изображения показали только некоторые темные области на поверхности титановых пластин, которые могли быть местом нагружения H (см. Дополнительные материалы, рисунок S1), а EDX не чувствителен к элементам с малым весом, таким как H. Чтобы решить эту проблему, мы выполнили рентгеновскую дифракцию скользящего падения. На рисунке 6 представлено сравнение диаграмм GIXRD исходного Ti и Ti, связанных с Mg после разложения Mg. Исходный образец титана показал практически только пики (100), (002), (101), (102), (110), (103), (112), (201) кристаллического αTi в гексагональной фазе P63 / mmc a = 2.9504 Å, c = 4,6933 Å (PDF 03-065-3362, данные 2015). Напротив, связанный образец Ti после разложения магния показал пики Ti (аналогичные исходному Ti) и дополнительные пики (111), (200), (220), (311), (222) от кубической фазы TiH ₂ ( fcc) a = 4,42 Å (PDF 00-009-0371, данные 2015). Результаты показывают, что водород, образующийся во время разложения Mg, насыщает Ti-фазу и приводит к образованию гидридов. Снова следует отметить, что превращение чистой гексагональной фазы Ti в смесь с гидридной фазой происходит при комнатной температуре.В промышленности процесс гидрирования применяется для некоторых целей. Однако обычно требуются технологические температуры в интервале от 600 ° C до 700 ° C. Хорошо известно, что введение большого количества H в Ti и образование гидридов титана довольно сильно меняют механические свойства титановых деталей [25 , 26]. Это может существенно повлиять на свойства имплантата в зависимости от области применения. Чтобы проверить эволюцию механических свойств с поглощением водорода, мы использовали образцы собачьей кости, произведенные MIM, состоящие из Ti64 и Mg-0.6Ca (рисунок 1). Даже если коррозионные свойства Ti и Ti64 не абсолютно идентичны [27] и Ti64 демонстрирует более высокую коррозионную стойкость в искусственных жидкостях тела, имитируемых Рингером, предполагается, что основные результаты, связанные с поглощением водорода, не будут затронуты в рамках этого исследования. После такой же процедуры термической обработки спеканием пластин были проведены испытания на растяжение после экспериментов по коррозии в 0,9 мас.% NaCl (рис. 1). Они сравнивались с испытаниями на растяжение спеченных несвязанных образцов Ti64.Как видно на Рисунке 7, несвязанный образец Ti64 показал упругие и пластические характеристики с удлинением до разрушения до 12%. Однако все гибридные образцы после коррозии Mg были рано разрушены в упругой области. Расположение трещин для всех гибридных образцов не в центре, как показано на рисунке 1d. В случае исходного Ti64 трещина всегда находилась в центре образца. Таким образом, из-за поглощения водорода пластичность была полностью потеряна. Среднее содержание водорода в титановой части образцов костей собаки после разложения Mg было примерно в два раза выше (2130 ± 98 мкг / г), чем в образцах пластин.Вероятно, это было связано с тем, что деталь из Mg почти полностью покрывала деталь из сплава Ti. Места трещин, вызванных испытанием на растяжение, были исследованы с помощью SEM. Для исходного образца (рис. 8, слева) белые и темные области были видны очень четко, что соответствует β (белый) — высокая растворимость водорода и α (темный) — низкая растворимость водородных фаз. После коррозии Mg (рис. 8, справа) оказалось, что структура стала более мелкой, и сравнение с псевдобинарной фазовой диаграммой Ti64-H [28] показало превращение в α ₂ (TiAl ₃ ) и δ (наибольшая растворимость водорода, TiH ₂ ) фазы с видимыми границами α / β.Это полностью соответствует результатам дифракционных экспериментов.

4. Обсуждение

Любые непреднамеренные изменения, наблюдаемые в материалах постоянных имплантатов, нежелательны. Изменение цвета и веса титановой детали после разложения магния требует особого внимания. Наблюдаемое увеличение веса связано с адсорбцией водорода и изменением толщины слоя оксида титана, что вызывает изменение цвета.

Известно, что водород вызывает охрупчивание большинства металлических материалов.Чистый титан менее восприимчив и показывает хорошую пластичность при содержании водорода до 25 ат.% [29]. В настоящем исследовании расчетная концентрация водорода (около 5–10 ат.%) Должна быть ниже предела, указанного выше, но нарушать стандарты ASTM (30). Испытания на растяжение показали, что фактическое количество адсорбированного водорода было выше, чем пластичность. предел для Ti64. Водород образует в основном гидрид TiH ₂ (гранецентрированный кубический), который может быть отнесен к δ-фазе и обычно наблюдается при загрузке водорода в титан при высоких температурах (~ 750 ° C [31]) или после катодной обработки. гидрирование при 80 ° C с последующей термодиффузией при 225 ° C [32].Согласно фазовой диаграмме Ti-H [33,34] образование δ-фазы происходит в диапазоне концентраций H от 51,2 до 66,7 ат.%. Поскольку мы не проводили гомогенизацию деталей из Ti и Ti64, возможно, что на поверхности Ti концентрация H была намного выше, чем среднее значение, полученное в результате химического анализа. Наблюдаемая загрузка большого количества водорода в титан требует поместите при комнатной температуре в условиях погружения и в присутствии солевого раствора высокой концентрации.Потенциально важным параметром является повышенное локальное давление. Известно, что из-за быстрой деградации Mg в композите Mg / Ti-сплавы давление газа образующегося водорода может быть настолько высоким, что он разрушает предварительно спеченный каркас из титана [18]. Другой фактор, который может способствовать абсорбции водорода, — это потеря стабильности оксидного слоя из-за присутствия и разложения Mg. Возможно, что часть кислорода мигрирует из слоя TiO ₂ в Mg из-за чрезвычайно высокого сродства Mg к кислороду.Это также могло быть причиной удивительно хорошего связывания двух металлов с очень низкой взаимной растворимостью при спекании [24]. Дестабилизация оксидного слоя делает поверхность Ti легко доступной для H, который образуется при разложении Mg. Наиболее подходящим местом является линия контакта Mg, Ti и растворителя. Следует отметить, что разрушение всех образцов после разложения Mg произошло именно в этой части образца (рис. 1г), а не в середине, как в исходных образцах.Рисунок 9 показывает, что профиль поглощения водорода не был постоянным и имел два максимума (~ 0 и ~ 25 мм) на линиях контакта Mg, Ti и растворителя. Максимум на 0 мм был значительно выше (здесь происходит разрушение). Причинами более высокого максимума при 0 мм могут быть более высокая локальная остаточная пористость Ti64 и / или немного большее количество Mg. Наблюдаемая водородная нагрузка может быть объяснена реакцией восстановления металла (MRR), которая широко используется в материаловедении [35 ]. Согласно механизму MRR, TiO ₂ восстанавливается до Ti с помощью Mg, который, в свою очередь, окисляется до MgO: в результате возникает прямой контакт между Mg и Ti, который приводит к переносу электронов от Mg (→ MgO ) до TiO ₂ (→ Ti) из-за разницы электрохимических потенциалов.Общая реакция коррозии магния (1) состоит из уравнения анодного окисления магния (3) и уравнений катодного восстановления воды (4) и (5). Впервые предложено Höche et al. [36] и затем подтверждено расчетами по теории функционала плотности (DFT), было показано, что последовательность реакций Фольмера – Гейровского является преобладающим и наиболее благоприятным с точки зрения энергетического барьера путем выделения водорода при разложении магния [37]. . Согласно Фольмеру, он начинается с этапа восстановления воды, сопровождаемого адсорбцией атомарного водорода на поверхности магния:

h3O + e − ↔OH− + Had Volmer

(4)

Адсорбированный водород реагирует с частично положительным атомом водорода молекулы воды на стадии Гейровского:

h3O + e− + Had↔OH− + h3 Гейровский

(5)

Следующая стадия — образование гидроксида:

Образовавшийся Mg (OH) ₂ не полностью пассивируется.Он не полностью блокирует доступ воды и соединений Cl к границе раздела MgO / Mg. Таким образом, коррозия Mg продолжается даже под объемным слоем Mg (OH) ₂ .

H _ad или H ₂ могут адсорбироваться титаном при высокой концентрации водорода, которой достаточно для образования гидридов в соответствии с уравнениями (7) и (8).

Температура 640 ° C, при которой детали из Ti и Mg выдерживались для получения хорошего соединения, очень важна для процесса MRR, и, скорее всего, без связывания загрузка H в Ti будет не такой высокой.

С другой стороны, недавно было описано восстановление TiO ₂ при комнатной температуре [38]. Было показано, что контакт между Mg и оксидом Ti вызывает прямой перенос электронов, что облегчает диффузию кислорода из межфазного TiO ₂ и сбор H из раствора HCl. Теоретические расчеты показали, что за счет соединения Mg и TiO ₂ энергия восстановления TiO ₂ уменьшается примерно на -1,27 эВ, и это отрицательное значение показывает, что процесс гидрирования является экзотермическим [38].Кроме того, энергия образования кислородных вакансий более чем на 1 эВ ниже для соединения Mg-TiO ₂ по сравнению с автономным TiO ₂ [38]. Аналогичный процесс был возможен в существующей системе (рис. 10). Происходит перенос электронов от Mg к TiO ₂ , что приводит к усиленному гидрированию. Давление из-за образования газа H ₂ увеличивается и играет важную роль в гидрировании, как показано в [38]. Образование гидридов на поверхности титановых имплантатов может быть важным фактором улучшения биосовместимости и обычно требует травление в кислотах или применение электрического разряда [39].Показано, что обработка концентрированной серной кислотой приводит к образованию гидридов титана с одновременным увеличением шероховатости поверхности и потерей веса образцов титана [40]. В настоящем исследовании гидриды были получены без такой агрессивной обработки. Мы предполагаем, что разложение Mg не только приводит к улучшенному росту костей из-за высвобождения ионов магния, но также потенциально может улучшить биосовместимость титановых имплантатов за счет образования гидридов. Выявленное образование гидридов дает дополнительное объяснение повышенной биосовместимости титановых имплантатов после нагрузки магнием, что недавно наблюдалось во многих случаях [10,11,12,41].Однако этот аспект не мог быть исследован в рамках данной работы.

Компания по проектированию спеченных компонентов

Стандартизированное обучение, которое мы предлагаем нашим сотрудникам

Ответственность за безопасность и здоровье распределяется между всеми уровнями занятости:

Обучение работе с манометрами

— этот класс посвящен конкретным измерениям, которые оператор будет выполнять в своей роли. Каждый будет участвовать в практических занятиях, чтобы убедиться, что измерения выполняются правильно.В этом курсе объясняется не только метод измерения, но и то, почему эти индивидуальные характеристики важны.

SPC / QDA Training — Уроки статистического управления процессами преподаются сотрудникам всех отделов, чтобы они могли познакомиться с основными статистическими концепциями и терминологией. Примеры интерактивных классов показывают, почему SPC является эффективным и полезным инструментом для уменьшения или устранения дефектов, что снижает стоимость качества.

Для реализации инициатив SPC мы отслеживаем измерения в производственных цехах с помощью автоматической системы сбора данных для обратной связи в режиме реального времени.Каждый оператор обучается тому, как его измерения интегрируются в эту систему, чтобы предоставлять устойчивые к ошибкам данные переменных и атрибутов.

Обучение распознаванию дефектов — Распознавание дефектов покрывается каждым сотрудником, поэтому они могут узнать общие термины и критерии клиентов для своих конкретных частей. Все операторы, выполняющие заключительный процесс перед отправкой, должны пройти сертификацию на обнаружение дефектов в смоделированном времени обработки. Этот сертификат ежегодно обновляется в качестве повышения квалификации для каждого из этих лиц.

Эффективность обучения — у нас есть целенаправленный подход к обучению, в котором используются стандартные материалы с многоуровневым процессом аудита для проверки эффективности. Это позволяет уменьшить вариации, которые обычно наблюдаются при использовании нескольких тренажеров. Обучение каждого отдела разбито на 4 уровня для поддержки этой деятельности. Используя этот подход, мы можем выявлять проблемы в тренировочном процессе на ранней стадии и соответствующим образом адаптироваться для обеспечения успешных результатов.

Заявка на патент США для карточек для хранения и доставки образцов, включающая патентную заявку на спеченный пористый пластик (заявка № 20140234891 от 21 августа 2014 г.)

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение предлагает карты, содержащие спеченный пористый пластик, которые можно использовать для сбора, хранения, транспортировки и / или доставки жидких проб в аналитическое устройство.

ИСТОРИЯ ВОПРОСА

Карты образцов, известные из уровня техники, изготовлены из целлюлозы и используются для сбора образцов крови. Такие карты включают в себя карты Whatman FTA, известные специалистам в данной области как карты DMPK-A, DMPK-B и DMPK-C. Некоторые из этих карт могут создавать проблемы с повышенным фоновым шумом или помехами в аналитических методах, таких как масс-спектроскопия, из-за мешающих веществ в карте. Эти карты также показывают длительное время высыхания после нанесения жидкого образца.Продукты на основе целлюлозы в некоторых случаях могут быть несовместимы с анализируемыми веществами, представляющими интерес для измерения. Соответственно, существует потребность в новых носителях, которые могут преодолеть недостатки существующих носителей для карточек с образцами и обеспечить надежную, быструю и широкую совместимость для сбора, хранения и последующего анализа образцов.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ

Эта заявка решает проблемы, присущие картам предшествующего уровня техники, и раскрывает карты, содержащие спеченный пористый пластик, который может использоваться для сбора, хранения, транспортировки и / или доставки жидких проб в аналитическое устройство.Это приложение также раскрывает способы изготовления и использования этих карт.

Эти карты состоят из спеченного пористого пластика, который используется для приема, транспортировки или хранения жидкой пробы. Эти области спеченного пористого пластика, на которые наносится образец, называются пятнами приема образца. Необязательно точки приема пробы могут быть связаны через каналы с местами хранения пробы. Эти каналы и места для хранения образцов также состоят из спеченного пористого пластика.

Пункты приема образцов расположены или настроены на карте.Если они присутствуют, каналы и места для хранения образцов также расположены или настроены на карте.

Области карты, отличные от пятна приема образца, канала и пятна хранения образца, содержат материалы, которые могут быть такими же, как спеченный пористый пластик, или отличаться от них. Эти области могут быть из спеченного пористого пластика, бумаги, картона, стекла, а также из прозрачного или непрозрачного твердого непористого пластика.

Точки приема образцов спеченного пористого пластика содержат спеченную пористую матрицу, полученную путем сплавления отдельных пластиковых частиц вместе в процессе спекания с образованием спеченной пористой матрицы.Эти места для приема образцов из спеченного пористого пластика, сконфигурированные в виде карты, обеспечивают уникальную пористую структуру, инертный субстрат, точную способность удерживать жидкость, быстро сохнут, их легко резать и обрабатывать.

Карта содержит одно или несколько точек приема жидкой пробы для приема жидкой пробы. В одном варианте осуществления часть пятна может быть позже удалена для последующей обработки и анализа пробы, содержащейся в пятне. В другом варианте осуществления все пятно приема пробы может быть позже удалено с карты для последующей обработки и анализа пробы, содержащейся в пятне.Периметр пятна приема образца может быть сконфигурирован так, чтобы его можно было легко снимать с карты.

Каждая спеченная пористая матрица в пятне приема жидкого образца, в канале и в пятне хранения образца необязательно содержит функциональные добавки. Функциональные добавки включают, помимо прочего: полиэлектролиты, модифицированный диоксид кремния C-18, C-8 или C-4, силикагель, ионообменный материал, контролируемое пористое стекло (CPG), среду для твердофазной экстракции (SPE), ячейку реагенты для лизиса, добавки, денатурирующие белок, химические вещества, денатурирующие или деактивирующие белки и / или лизирующие клетки, антиоксиданты, химические вещества, сохраняющие анализируемое вещество, подлежащее измерению в образце, ингибиторы ферментов, противомикробные средства, индикаторы изменения цвета, хелатирующие агенты, поверхностно-активные вещества , Стабилизирующие ДНК агенты, слабая кислота, такая как трис (гидроксиметил) аминометан (TRIS), хаотропный агент, антикоагулянт или их комбинация.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

РИС. 1. Схематическое изображение карты с образцами, показывающее три области A, B и C для размещения пятен образца, состоящие из спеченного пористого пластика, окруженные областью карты, которая не принимает образец.

РИС. 2. Схематическое изображение карточки с образцом, показывающее три области A, B и C приема пятен образца, состоящие из спеченного пористого пластика, окруженные областью карты, которая не принимает образец. По периметру каждого пятна пробы имеются слабые края для легкого отделения пятна приема пробы от карты.

РИС. 3. Схематическое изображение карточки с образцом, показывающее три области A, B и C приема пятен образца, состоящие из спеченного пористого пластика, окруженные областью карты, которая не принимает образец. Каждая область приема пятна пробы содержит неглубокую область, поскольку толщина карты в области приема пятна пробы меньше, чем окружающая область карточки, которая не принимает пробу.

РИС. 4. Схематическое изображение карты с образцами, показывающее три области A, B и C для размещения пятен образца, состоящие из спеченного пористого пластика, окруженные областью карты, которая не принимает образец.Каждая область приема пятна образца является гидрофильной, в то время как окружающая область карты, которая не принимает образец, является гидрофобной.

РИС. 5. Схематическое изображение карты гидрофильно-гидрофобных образцов. В центре карты находится точка приема гидрофильного образца, соединенная гидрофильными каналами с точками хранения гидрофильного образца, все состоящие из спеченного пористого пластика. Область карты, окружающая место приема гидрофильного образца, гидрофильные каналы и места хранения гидрофильного образца, является гидрофобной.

РИС. 6. Схематическое изображение острия спеченного пористого пластика, содержащего образец. После приложения напряжения заряженные частицы, содержащие образец, высвобождаются из острого наконечника и вводятся в масс-спектрометр для анализа выбранных аналитов.

РИС. 7. Схематическое изображение карточки с образцом, показывающее три области A, B и C приема пятен образца, состоящие из спеченного пористого пластика, окруженные областью карты, состоящей из бумаги, картона, стекла или твердого непористого пластика, который не принимает образец.Каждая область приема пятна пробы содержит неглубокую область, поскольку толщина карты в области приема пятна пробы меньше, чем окружающая область карточки, которая не принимает пробу.

РИС. 8. Стандартная кривая поглощения УФ-излучения для серийного разбавления кофеина водой.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

В этой заявке раскрыты карты, содержащие спеченный пористый пластик, который можно использовать для сбора, хранения, транспортировки и / или доставки жидких проб в аналитическое устройство.Это приложение также раскрывает способы изготовления и использования этих карт.

Эти карты состоят из спеченного пористого пластика, который используется для приема, транспортировки или хранения образца. Эти области спеченного пористого пластика, на которые наносится образец, называются пятнами приема образца. Необязательно точки приема пробы могут быть связаны через каналы с местами хранения пробы. Эти каналы и места для хранения образцов также состоят из спеченного пористого пластика.

Пункты приема образцов расположены или настроены на карте.Если они присутствуют, каналы и места для хранения образцов также расположены или настроены на карте.

Области карты, отличные от пятна приема пробы, канала и места хранения пробы, содержат материалы, которые могут быть такими же, как спеченный пористый пластик, или отличаться от них. Эти области могут быть из спеченного пористого пластика, бумаги, картона, стекла, а также из прозрачного или непрозрачного твердого непористого пластика.

Точки приема образцов спеченного пористого пластика содержат спеченную пористую матрицу, полученную путем сплавления отдельных пластиковых частиц вместе в процессе спекания с образованием спеченной пористой матрицы.Эти места для приема образцов из спеченного пористого пластика, сконфигурированные в виде карты, обеспечивают уникальную пористую структуру, инертный субстрат, точную способность удерживать жидкость, быстро сохнут, их легко резать и обрабатывать.

Карта содержит одно или несколько точек приема пробы для приема жидкой пробы. В одном варианте осуществления часть пятна может быть позже удалена для последующей обработки и анализа пробы, содержащейся в пятне. В другом варианте осуществления все пятно приема пробы может быть позже удалено с карты для последующей обработки и анализа пробы, содержащейся в пятне.Периметр пятна приема образца может быть сконфигурирован так, чтобы его можно было легко снимать с карты.

Каждая из спеченных пористых матриц в точке приема образца, в канале и в точке хранения образца может содержать функциональные добавки. Функциональные добавки включают, помимо прочего: полиэлектролиты, модифицированный диоксид кремния C-18, C-8 или C-4, силикагель, ионообменный материал, контролируемое пористое стекло (CPG), среду для твердофазной экстракции (SPE), ячейку реагенты для лизиса, добавки, денатурирующие белок, химические вещества, денатурирующие или деактивирующие белки и / или лизирующие клетки, антиоксиданты, химические вещества, сохраняющие анализируемое вещество, подлежащее измерению в образце, ингибиторы ферментов, противомикробные средства, индикаторы изменения цвета, хелатирующие агенты, поверхностно-активные вещества , Стабилизирующие ДНК агенты, слабая кислота, такая как трис (гидроксиметил) аминометан (TRIS), хаотропный агент, антикоагулянт или их комбинация.

Карты Состав и свойства карт

Карты состоят из одного или нескольких точек приема образца, содержащих спеченную пористую пластиковую матрицу, и областей, которые не принимают образец. Карты могут быть любой формы, включая круглую, продолговатую, многоугольную, треугольную, трапециевидную, прямоугольную или квадратную.

Пятна приема пробы

Спеченная пористая матрица в пятне приема пробы, канале или в месте хранения пробы может быть изготовлена ​​из различных пластиков, таких как полиэтилен.Полиэтилены (PE), которые можно использовать, включают, но не ограничиваются ими, полиэтилен высокой плотности (HDPE), полиэтилен низкой плотности (LDPE) или полиэтилен сверхвысокой молекулярной массы (UHMWPE) или их смесь. Спеченная пористая матрица также может быть изготовлена ​​из полипропилена (PP), поливинилиденфторида (PVDF), полистирола, полиамидов, полиакрилатов, полиакрилового нитрила (PAN), этилен-винилацетата (EVA), полиэфиров, поликарбонатов или политетрафторэтилена (PTFE), или их смесь. В одном варианте осуществления пластик представляет собой HDPE.В другом варианте осуществления пластик представляет собой UHMWPE, PP, полиамиды или полиакриловый нитрил или их смесь. Спеченная пористая матрица также может быть изготовлена ​​из смеси любых пластиков, описанных в этом параграфе. В других вариантах реализации, когда ПП и ПЭ объединены, ПП может присутствовать в диапазоне от примерно 100% до примерно 0%, а ПЭ может присутствовать в диапазоне от примерно 0 до примерно 100% (от 100% до 0%: 0 % до 100% масс.%). Когда ПЭ комбинируют с другими полимерами, ПЭ присутствует по меньшей мере примерно в 50% (мас.%).

В дополнение к пластику спеченная пористая матрица может также содержать гидрофильные полимеры, такие как целлюлозы, поливиниловый спирт (ПВС), полиэтиленгликоль (ПЭГ) или поливинилпирролидон (ПВП).

Спеченная пористая матрица имеет пористость от примерно 20% до примерно 80%, от примерно 25% до примерно 70%, от примерно 30% до примерно 60% или от примерно 30% до примерно 50%. Спеченная пористая матрица имеет размер пор от примерно 1 мкм до примерно 200 мкм, от примерно 10 мкм до примерно 100 мкм или от примерно 20 мкм до примерно 60 мкм.Пятна приема образца могут иметь толщину от примерно 100 микрон (мкм) до примерно 5 мм, или от примерно 200 мкм до примерно 3 мм, или от примерно 0,5 мм до примерно 2 мм.

Карты могут содержать одно или несколько точек приема проб. Количество точек приема образца на карточке, их диаметр и толщина выбираются на основе множества факторов, таких как объемная емкость отдельного пятна, предполагаемая концентрация аналита в образце, нанесенном на точку приема образца, и чувствительность анализа, а также объем образца, наносимый на отдельную точку.Пятно приема образца может иметь любую форму, включая круглую, продолговатую, многоугольную, треугольную, трапециевидную, прямоугольную или квадратную.

Пятно приема образца может быть гидрофобным или гидрофильным, и это свойство выбирается в зависимости от образца, который будет наноситься на пятно приема образца. В одном варианте осуществления точки приема образца являются гидрофильными, так что гидрофильные образцы могут абсорбироваться картой. Пятна приема гидрофильных образцов предпочтительны для использования с образцами крови. Пятна приема гидрофобного образца могут быть желательными, если образец содержит поверхностно-активное вещество или имеет поверхностное натяжение жидкого образца менее примерно 40 дин / см.

Количество абсорбированного образца регулируется площадью поперечного сечения, толщиной и объемом пор пятна приема образца на карте. В одном варианте осуществления проба абсорбируется в пятне приема пробы за счет капиллярной силы.

Емкость точки приема образца на карте может составлять от примерно 0,1 мкл до примерно 500 мкл, от примерно 1 мкл до примерно 250 мкл, от примерно 2 мкл до примерно 225 мкл, от примерно 3 мкл до примерно 200 мкл. от примерно 5 мкл до примерно 150 мкл, от примерно 10 мкл до примерно 100 мкл, от примерно 5 мкл до примерно 50 мкл, от примерно 10 мкл до примерно 40 мкл или от примерно 10 мкл до примерно 30 мкл.Объем пор пятна приема пробы на карте может быть больше примерно 1 мкл или меньше примерно 1000 мкл, или любое значение от примерно 1 мкл до примерно 1000 мкл, или от примерно 0,1 мкл до примерно 500 мкл, примерно от 1 мкл. мкл до примерно 250 мкл, от примерно 2 мкл до примерно 225 мкл, от примерно 3 мкл до примерно 200 мкл, от примерно 5 мкл до примерно 150 мкл, от примерно 10 мкл до примерно 100 мкл, от примерно 5 мкл до примерно 50 мкл от примерно 10 мкл до примерно 40 мкл или от примерно 10 мкл до примерно 30 мкл.

Области карты, которые не принимают образец

Области карты, которые не принимают образец, могут быть сделаны из пластика, бумаги, картона, стекла или других материалов.

Когда области карты, которые не принимают образец изготовлены из пластика, в разных вариантах исполнения они могут быть пористыми или непористыми.Можно использовать различные пластмассы, например полиэтилен. Полиэтилены (PE), которые можно использовать, включают, но не ограничиваются ими, полиэтилен высокой плотности (HDPE), полиэтилен низкой плотности (LDPE) или полиэтилен сверхвысокой молекулярной массы (UHMWPE) или их смесь. Другие пластмассы, которые могут быть использованы, включают полипропилен (PP), поливинилиденфторид (PVDF), полистирол, полиамиды, полиакрилаты, полиакриловый нитрил (PAN), этилен-винилацетат (EVA), полиэфиры, поликарбонаты или политетрафторэтилен (PTFE) или их смесь.В одном варианте осуществления пластик представляет собой HDPE. В другом варианте осуществления пластик представляет собой UHMWPE, PP, полиамиды или полиакриловый нитрил или их смесь. Также может быть использована смесь любых пластиков, описанных в этом параграфе. В других вариантах реализации, когда ПП и ПЭ объединены, ПП может присутствовать в диапазоне от примерно 100% до примерно 0%, а ПЭ может присутствовать в диапазоне от примерно 0 до примерно 100% (от 100% до 0%: 0 % до 100% масс.%). Когда ПЭ комбинируют с другими полимерами, ПЭ присутствует по меньшей мере примерно в 50% (мас.%).

Когда эти области карты, которые не принимают образец, состоят из спеченного пористого пластика, пористость составляет от примерно 20% до примерно 80%, от примерно 25% до примерно 70%, от примерно 30% до примерно 60%, или от примерно 30% до примерно 50%. Размер пор составляет от примерно 1 мкм до примерно 200 мкм, от примерно 10 мкм до примерно 100 мкм или от примерно 20 мкм до примерно 60 мкм. Эти области карты, которые не принимают образец, могут иметь толщину от примерно 100 мкм до примерно 5 мм, или от примерно 200 мкм до примерно 3 мм, или примерно от 0.От 5 мм до примерно 2 мм.

Эти области карты, которые не принимают образец, могут быть гидрофобными или гидрофильными.

Функциональные добавки

Пятна приема образца, содержащие спеченную пористую пластиковую матрицу, а также области карты, которые не принимают образец, могут содержать функциональные добавки. Функциональные добавки включают, но не ограничиваются следующим: полиэлектролиты, модифицированный диоксид кремния C-18, C-8 или C-4, силикагель, ионообменный материал, контролируемое пористое стекло (CPG), среду для твердофазной экстракции (SPE), ячейку реагенты для лизиса, денатурирующие белки добавки, химические вещества, денатурирующие или деактивирующие белки и / или лизирующие клетки, антиоксиданты, химические вещества, сохраняющие анализируемое вещество, подлежащее измерению в образце, ингибиторы ферментов, противомикробные препараты, индикаторы изменения цвета и т. д.Функциональные добавки обычно находятся в месте приема образца. Функциональные добавки добавляют в пятна приема образца во время процесса спекания или после процесса спекания с использованием обработки раствором, в зависимости от чувствительности и стабильности функциональной добавки к условиям спекания, как известно специалисту в данной области техники.

Функциональные добавки также включают, но не ограничиваются ими, хелатирующие агенты, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА), поверхностно-активные вещества, такие как анионное поверхностно-активное вещество, катионное поверхностно-активное вещество или неионное поверхностно-активное вещество, стабилизирующие ДНК агенты, такие как мочевая кислота или уратная соль, или слабая кислота, такая как трис (гидроксиметил) аминометан (ТРИС).Функциональные добавки также включают, но не ограничиваются ими, хаотропный агент, такой как мочевина, тиомочевина, хлорид гуанидиния или перхлорат лития. Карты также могут содержать антикоагулянт, такой как гепарин, цитрат и / или хелатирующие агенты. Поверхностно-активное вещество может представлять собой анионное поверхностно-активное вещество, например додецилсульфат натрия (SDS), додецилсульфат натрия (SDS), додецилбензолсульфонат натрия, лаурилсаркозинат натрия, ди-бис-этил-гексилсульфосукцинат натрия, лаурилсульфоацетат натрия или N-метил- N-олеоилтаурат, катионное поверхностно-активное вещество, такое как бромид цетилтриметиламмония (CTAB) или лаурилдиметилбензиламмонийхлорид, неионное поверхностно-активное вещество, такое как нонилфеноксиполиэтоксилэтанол (NP-40), твин-20, тритон-100 или поверхностно-активное вещество , такой как 3 — [(3-холамидопропил) диметиламмонио] -1-пропансульфонат.Также можно использовать фторированные ПАВ, такие как фторированное ПАВ Zonyl® от DuPont. Другие поверхностно-активные вещества могут быть использованы, как известно среднему специалисту в данной области.

Карты с образцами, включая точки приема образцов, а также другие области карты, также могут быть покрыты слоями полиэлектролитов, таких как полиэтиленимин, которые можно наносить в виде раствора. Покрытия из полиэлектролита необязательно могут быть объединены с поверхностно-активными веществами и / или антикоагулянтом, таким как гепарин.

Матрица из спеченного пористого пластика в точке приема образца, канале или точке хранения образца может содержать индикаторы изменения цвета, которые растворяются при контакте с жидкостью и указывают степень нанесения образца.В одном варианте осуществления пятно, принимающее образец, меняет цвет при контакте с жидким образцом. Такие индикаторы изменения цвета раскрыты в US 2008/0199363. В одном варианте осуществления пятно, принимающее образец, меняет цвет с белого на другой цвет, обеспечиваемый красителем, который растворяется при контакте с жидкостью, что указывает на степень нанесения образца. В другом варианте осуществления пятно приема образца может быть окрашено, и краситель растворяется при контакте с жидкостью, чтобы изменить или уменьшить окраску, что указывает на степень нанесения образца.Эти индикаторы изменения цвета представляют собой частицы, которые находятся в матрице из спеченного пористого пластика. Эти частицы индикаторов изменения цвета добавляются к частицам пластика и смешиваются перед спеканием, чтобы сформировать матрицу из спеченного пористого пластика в области пятна приема образца. В другом варианте осуществления эти частицы индикаторов изменения цвета добавляют к частицам пластика и смешивают перед спеканием с образованием спеченной пористой пластиковой матрицы в области пятна приема образца, а также в спеченной пористой пластиковой матрице в области карты. за пределами места приема пробы, чтобы указать, что объем пробы превысил место приема пробы.Эти частицы индикаторов изменения цвета сохраняют характеристики твердых частиц в матрице из спеченного пористого пластика, поскольку они имеют более высокую температуру плавления, чем частицы пластика. Когда используются частицы индикаторов изменения цвета, температура спекания выбирается для спекания пластиковых частиц, но не для плавления частиц красителя.

Производство карт

Карты могут изготавливаться разными способами в зависимости от состава карты. В одном варианте осуществления, когда карты полностью изготовлены из спеченного пористого пластика, карты изготавливаются путем помещения пластиковых частиц в форму желаемой формы и последующего спекания с использованием тепла для формирования карты.Температуры спекания конкретных пластиков известны среднему специалисту в данной области. Точки приема пробы и области, не принимающие пробы, на карте могут иметь одинаковый химический состав или различный химический состав. В этом варианте осуществления точки приема образцов используются для сбора, хранения, транспортировки и / или доставки образцов, а области, не принимающие образцы, используются для изготовления карты желаемой формы и обеспечения поверхности для маркировки карты. В зависимости от дизайна карты могут иметь различные формы и расположения.

В одном варианте осуществления пластиковые карты отливаются в форму. Условия формования и спекания для изготовления спеченных пористых карт зависят от полимера. Обычный специалист в данной области знаком с температурами и давлениями, которые подходят для конкретных полимеров.

Далее следует типичный метод изготовления однокомпонентной карты. Частицы пластика в некоторых вариантах реализации спекают при температуре от примерно 200 ° F до примерно 700 ° F. В других вариантах реализации частицы пластика спекают при температуре примерно от 300 ° F.до примерно 500 ° F. Температура спекания, согласно вариантам осуществления настоящего изобретения, зависит и выбирается в соответствии с идентичностью пластиковых частиц, как известно среднему специалисту в данной области.

Частицы пластика в некоторых вариантах осуществления спекаются в течение периода времени от примерно 30 секунд до примерно 30 минут. В других вариантах осуществления пластиковые частицы спекают в течение периода времени от примерно 1 минуты до примерно 15 минут или от примерно 5 минут до примерно 10 минут.В некоторых вариантах осуществления процесс спекания включает циклы нагрева, замачивания и / или тепловой обработки. Более того, в некоторых вариантах спекание пластиковых частиц проводят при атмосферном давлении (1 атм). В других вариантах осуществления спекание пластиковых частиц выполняется под давлением, превышающим давление окружающей среды.

Далее следует типичный способ изготовления двухкомпонентной карты с разными точками приема пробы и областями приема пробы. Первая смесь пластиковых частиц наносится на участок формы для приема образца.Вторая пластиковая смесь откладывается в части формы, не принимающей пробы, рядом с первой частью формы. Затем первая смесь пластиковых частиц и вторая смесь пластиковых частиц спекаются с образованием карт, содержащих область отбора проб и область без отбора проб с различными свойствами.

Первые частицы пластика и вторые частицы пластика в некоторых вариантах осуществления имеют средний размер в диапазоне от примерно 1 мкм до примерно 1 мм. В другом варианте осуществления первые пластиковые частицы и вторые пластиковые частицы имеют средний размер в диапазоне от примерно 10 мкм до примерно 900 мкм, от примерно 50 мкм до примерно 500 мкм или от примерно 100 мкм до примерно 400 мкм.В дополнительном варианте осуществления первые пластиковые частицы и вторые пластиковые частицы имеют средний размер в диапазоне от примерно 200 мкм до примерно 300 мкм. В некоторых вариантах реализации первые частицы пластика и вторые частицы пластика имеют средний размер менее примерно 1 мкм или более примерно 1 мм. Размеры первых пластиковых частиц и вторых пластиковых частиц в некоторых вариантах осуществления выбираются независимо.

Первые частицы пластика и вторые частицы пластика в некоторых вариантах реализации спекаются при температуре примерно от 200 ° F.до примерно 700 ° F. В некоторых вариантах реализации первые пластиковые частицы и вторые пластиковые частицы спекают при температуре в диапазоне от примерно 300 ° F до примерно 500 ° F. Температура спекания, согласно вариантам реализации настоящего изобретения, зависит от и выбираются в соответствии с идентичностью первых пластиковых частиц и вторых пластиковых частиц, как известно среднему специалисту в данной области.

Первые частицы пластика и вторые частицы пластика в некоторых вариантах осуществления спекаются в течение периода времени от примерно 30 секунд до примерно 30 минут.В других вариантах осуществления первые частицы пластика и вторые частицы пластика спекаются в течение периода времени от примерно 1 минуты до примерно 15 минут или от примерно 5 минут до примерно 10 минут. В некоторых вариантах осуществления процесс спекания включает циклы нагрева, замачивания и / или тепловой обработки. Кроме того, в некоторых вариантах осуществления спекание первых пластмассовых частиц и вторых пластмассовых частиц проводят при атмосферном давлении (1 атм). В других вариантах осуществления спекание первых пластмассовых частиц и вторых пластмассовых частиц проводят под давлением, превышающим давление окружающей среды.

Полимерный материал, такой как карта, полученный спеканием первых пластиковых частиц и вторых пластиковых частиц, в некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения, может содержать пятно приема образца и область без приема образца, причем пятно приема образца включает спеченные первые пластмассовые частицы, необязательно с другими добавками, и область, не принимающая пробы, содержит спеченные вторые пластмассовые частицы. Форма пресс-формы может быть любой желаемой, что позволяет производить легкое и одностадийное производство.

В другом варианте осуществления карта-образец из спеченного пористого пластика может быть спечена в виде листа на плоской движущейся ленте для нагрева. Температура нагрева и скорость движения ленты зависят от полимеров, как известно среднему специалисту в данной области. Затем спеченный пористый пластиковый лист может быть высечен с приданием ему желаемого размера и формы. Листу можно также термически придать желаемую форму.

В одном варианте осуществления карты изготавливаются таким образом, что периметр пятна приема образца несколько тоньше или слабее, чем точка приема образца или пластиковый материал за пределами периметра.Этот периметр может быть перфорирован более тонкими частями пластика. Такое расположение облегчает отделение пятна приема образца от окружающей пористой пластмассы за счет приложения силы к пятну приема образца.

В другом варианте осуществления карты изготавливаются таким образом, что периметр пятна приема образца несколько толще, чем центр пятна приема образца или пластиковый материал за пределами периметра. Такое расположение облегчает удержание нанесенного образца в желаемом месте.Размер и форма области карты заранее определяются конструкцией формы.

В еще одном варианте осуществления карты изготавливаются таким образом, что периметр пятна приема образца несколько тоньше или слабее, чем центр пятна приема образца или пластиковый материал за пределами периметра пятна приема образца. Такое расположение облегчает отделение пятна приема образца от окружающей пористой пластмассы за счет приложения силы к пятну приема образца.В одном варианте осуществления периметр пятна приема образца может казаться перфорированным с неоднородностями в спеченном пористом пластике, где происходит перфорация. Эти карты также содержат несколько более толстую область пластика по периметру более тонкой или более слабой зоны. Такое расположение облегчает удержание нанесенного образца в желаемом месте, а также способствует отделению пятна приема образца от окружающего пористого пластика посредством приложения силы к пятну приема образца.

В другом варианте осуществления карты изготавливаются таким образом, что пятно для приема пробы имеет гидрофобность, отличную от участков, не принимающих пробы. В конкретном варианте осуществления пятно, принимающее образец, является гидрофильным, а область, не принимающая образец, является гидрофобной. Образец крови только смачивается и впитывается в точку приема гидрофильного образца. Метод изготовления участков из дискретного гидрофобного и гидрофильного пористого пластика описан в публикации заявки на патент США № US2003134100.Карты могут быть изготовлены в пресс-форме или методом термоформования. Термоформование — это процесс формования профилированного изделия из плоского листа путем приложения тепла и давления к выбранным участкам плоского листа. В настоящем изобретении в одном варианте осуществления плоский лист спеченного пористого пластика пропускают через нагретую матрицу с профилем, который создает желаемый узор.

В другом варианте осуществления карта содержит точки приема образца, содержащие спеченную пористую пластиковую матрицу, и области непористого пластика, окружающие точки приема образца.В одном варианте осуществления эта карта изготавливается с использованием процесса литья под давлением с отверстием, которое вмещает компоненты из спеченного пористого пластика, такие как место приема образца, канал или место хранения образца. Эти спеченные пористые пластиковые компоненты вставляются в отверстие в карте. В другом варианте осуществления, в котором точки приема образца содержатся на бумаге, картоне, стекле или непористой пластиковой карте, точки приема образца и, необязательно, каналы и точки хранения образца выполнены путем спекания пластика с получением спеченной пористой пластиковой матрицы.Пятна приема пробы и, необязательно, каналы и места хранения пробы затем вставляются в предварительно сформованную бумажную, картонную, стеклянную или непористую пластиковую карту, содержащую отверстия, сконфигурированные для приема мест приема пробы, и, необязательно, каналы и места хранения пробы. Такая вставка может быть выполнена посредством посадки с трением. В другом варианте осуществления предварительно сформованная карта из бумаги, картона, стекла или непористого пластика содержит отверстия с фланцами, сконфигурированными для приема мест приема пробы, и, возможно, каналов и мест хранения пробы.

Работа карты.

На карту наносится жидкая проба. В одном варианте осуществления образец требует, чтобы он поддерживался во влажном состоянии, а карта хранилась во влажной среде для последующего использования или транспортировки, например, для отправки по почте. В другом варианте осуществления образцу дают высохнуть. В одном варианте осуществления карта может затем храниться для последующего использования или транспортировки, например, для отправки по почте. В качестве альтернативы, после высыхания образца часть карты, содержащая образец, может быть получена путем разрезания карты ножом, ножницами, острым перфоратором желаемой формы на режущей поверхности или другим инструментом, известным специалисту в данной области. Изобразительное искусство.В другом варианте осуществления пятно приема образца может быть отбито от карты путем приложения силы к пятну приема образца, особенно в вариантах осуществления, в которых периметр пятна приема образца несколько тоньше или слабее, чем пластиковый материал с обеих сторон. Когда индикаторы изменения цвета включены в пятно приема образца, острый штамп желаемой формы может быть нанесен на область пятна приема образца, которая изменила цвет при нанесении жидкого образца.На данный момент существует несколько вариантов. Отрезанная часть пятна приема образца может быть закрыта и храниться до подходящего времени для проведения испытания содержащегося в нем образца. В качестве альтернативы, отрезанная часть пятна приема пробы может быть обработана для выполнения желаемого теста для обнаружения выбранного аналита. В одном варианте осуществления вырезанная часть пятна приема пробы с острым краем может быть обработана ионным раствором и затем помещена в масс-спектрометр для аэрозолизации аналитов на пятне приема пробы.Ионный раствор может быть любым раствором, используемым для ионизации электрораспылением, например, раствором, содержащим 5 мМ бикарбоната аммония и 100 мМ ацетата аммония, pH = 7,8. Могут использоваться другие ионные растворы, как известно среднему специалисту в данной области. Эта аэрозолизация может быть достигнута с помощью различных средств, таких как приложение напряжения к острой кромке фрагмента пятна, принимающего образец. Когда точка приема образца имеет многоугольную форму, например треугольную форму, вырезание точки приема образца может не потребоваться, поскольку при пробивании треугольной точки приема образца с карты образуется острая кромка.Затем угол треугольного пятна приема пробы можно обработать ионным раствором и затем поместить в масс-спектрометр для аэрозолизации аналитов на пятне приема пробы.

В качестве альтернативы пятно приема пробы или ее фрагмент может быть добавлено в емкость, такую ​​как пробирка, центрифужная пробирка или пробирка для анализа, и проба может быть обработана, например, путем элюирования пробы для анализа аналита в пример. Место приема образца или его фрагмент может быть вырезан или пробит в приемнике в зависимости от конструкции карты и требований.Такие емкости могут также содержать реагенты, пригодные для проведения анализа одного или нескольких аналитов в образце. Соответствующие реагенты известны среднему специалисту в данной области и выбираются в зависимости от анализируемого вещества, подлежащего измерению. Например, специфичные для аналита антитела, необязательно в дополнение к колориметрическому индикатору, могут быть использованы для связывания с белком и развития окраски. В одном варианте осуществления образец может содержать белок или пептид, и элюция белка или пептида из пятна или его фрагмента делает белок или пептид доступным для измерения с помощью иммуноферментного анализа (ELISA) или радиоиммуноанализа (RIA). .В другом варианте осуществления образец может содержать другой тип биологической молекулы, такой как липид, нуклеиновая кислота (например, ДНК или РНК), или нейромедиатор (такой как катехоламины, индоламины, ацетилхолин) или их метаболиты.

Образец карты по настоящему изобретению можно использовать аналогично описанному GE Healthcare на их веб-сайте (http://www.whatman.com) и в их литературе, касающейся карты GE DMPK FTA на основе целлюлозы. Карта-образец настоящего изобретения имеет аналогичные применения и может использоваться аналогичными способами, как описано в следующих патентах США или заявках на патенты: U.С. Пат. № 6,627,226, США 2001/0000149, США 2007/0259445, Патент США. № 5,496,542, патент США. № 5,756,126, Патент США. № 5,807,527, Патент США. № 5,985,327, Патент США. № 6,168,922, Патент США. № 6447804, Патент США. № 6746841 и патенте США. № 6,958,392.

Корпус

Карту можно использовать без корпуса. Карта обладает хорошей механической прочностью, жесткостью и может использоваться самостоятельно. Печать может быть нанесена на карту для обозначения логотипа компании, для маркировки мест приема образцов, для маркировки типа карты или других желаемых этикеток.Штрих-код и код быстрого ответа (QR) также можно напечатать прямо на карте. Карта также может содержать магнитную полосу для хранения информации.

Карту можно ламинировать с другими материалами, такими как картон или пластиковый лист, с использованием методов, известных специалисту в данной области техники. Карту также можно вставить в рамочный лист с использованием методов, известных рядовому специалисту в данной области техники.

Карту можно поместить в соответствующие условия хранения, пока оператор не решит провести анализ пробы.Карты могут необязательно содержать агент, стабилизирующий накопление, такой как осушитель или поглотитель кислорода. Карты необязательно могут храниться со стабилизатором хранения, таким как осушитель или поглотитель кислорода.

Типы образцов

Жидкие образцы включают, помимо прочего, биологические и небиологические жидкости. Биологические жидкости включают, помимо прочего, жидкости организма, такие как кровь, плазма, моча, перитонеальная жидкость, легочная жидкость, перикардиальная жидкость, слезы, слюна, спинномозговая жидкость, лимфатические жидкости, желудочно-кишечные жидкости, кал, жидкости репродуктивной системы, и околоплодные воды.Другие биологические жидкости включают, но не ограничиваются ими, культуральную среду, такую ​​как среда для культивирования клеток или тканей. Небиологические жидкости включают образцы воды, включая образцы пресной воды, морской воды и сточных вод, образцы органических растворов, образцы неорганических растворов, образцы из нефтехимической промышленности, такие как образцы с нефтяных месторождений, образцы окружающей среды и образцы пищевых продуктов. Биологические и небиологические жидкости могут содержать клетки.

В одном варианте осуществления, когда биологический образец представляет собой кровь, пятно, принимающее образец, может содержать консерванты, хелатирующие агенты или химические вещества, полезные для лизирования клеток и / или денатурирующих белков, включая ферменты.Образцы также включают, но не ограничиваются ими, ткани, клетки животных или растений, микроорганизмы (например, бактерии, вирусы, плесень и грибки) и плазмиды. Клетки включают, но не ограничиваются ими, культивируемые клетки, эпителиальные клетки, мезотелиальные клетки, эндотелиальные клетки и стволовые клетки или другие клетки-предшественники. Клетки могут быть получены из тканей, органов и биологических жидкостей с использованием методик, известных среднему специалисту в данной области.

Целевые аналиты включают любой желаемый аналит, такой как нуклеиновая кислота (ДНК, РНК), углеводы, липиды, белки, пептиды, гормоны, антитела, метаболиты, нейротрансмиттеры, иммуномодуляторы, лекарства, метаболиты лекарственных средств, алкоголь, ионы или электролиты.Следующие ниже примеры будут служить для дополнительной иллюстрации настоящего изобретения, но в то же время, однако, не будут ограничивать его. Напротив, следует четко понимать, что можно прибегнуть к различным вариантам осуществления, их модификациям и эквивалентам, которые после прочтения приведенного здесь описания могут быть предложены специалистам в данной области техники без отхода от сущности изобретения.

ПРИМЕР 1 Пористая пластиковая карта для использования при доставке проб крови небольшого объема для анализа

Молодым крысам весом 100 г вводят лекарство и отбирают пробы крови с течением времени, чтобы проверить концентрацию лекарственного средства и его метаболитов в чтобы установить фармакокинетический и метаболический профиль.

Крысу анестезируют, и ее хвостовую вену используют для получения 10 мкл образца крови с помощью капиллярной трубки. Образец объемом 10 мкл наносят на место приема образца на пористой пластиковой карте и сушат. Этот процесс отбора проб продолжается каждые 30 минут в течение 4 часов, и каждые 10 мкл образца наносят на другое место приема образца. Карточка, содержащая 10 мкл образцов крови, хранится до времени, выбранного для анализа.

Затем с помощью пробойника круглой формы получают образец каждого пятна крови.Перфорированная круглая область карты, содержащая образец, затем помещается во флакон центрифуги. Раствор метанола вводится во флакон для извлечения метаболитов лекарства. Прозрачный раствор вводят в ЖХ-МС, чтобы отделить, обнаружить и проанализировать лекарство и его метаболиты и установить фармакокинетический и метаболический профиль.

ПРИМЕР 2 Пористая пластиковая карта для использования при доставке проб крови небольшого объема в масс-спектрометр

Молодой крысе весом 100 г вводят лекарство и отбирают пробы крови с течением времени, чтобы проверить концентрацию лекарства и его метаболитов. чтобы установить фармакокинетический и метаболический профиль.

Крысу анестезируют, и ее хвостовую вену используют для получения 10 мкл образца крови с помощью капиллярной трубки. Образец объемом 10 мкл наносят на место приема образца на пористой пластиковой карте и сушат. Этот процесс отбора проб продолжается каждые 30 минут в течение 4 часов, и каждые 10 мкл образца наносят на другое место приема образца. Карточка, содержащая 10 мкл образцов крови, хранится до времени, выбранного для анализа.

Затем с помощью пробойника треугольной формы получают образец каждого пятна крови.Перфорированная треугольная область карты, содержащая образец, затем вводится в масс-спектрометр для обнаружения и анализа лекарственного средства и его метаболитов и установления фармакокинетического и метаболического профиля.

ПРИМЕР 3 Карта из пористого пластика для использования в судебно-медицинской патологии

Следователь на месте преступления прибывает на место преступления с множественными брызгами крови. Исследователь с помощью пипетки наносит 5 мкл пробы крови на отдельные точки приема пробы на пористой пластиковой карте.Ультрафиолетовый анализ места преступления выявляет несколько проб репродуктивных жидкостей, которые собираются и наносятся на точки приема проб на другой пористой пластиковой карточке. Карты хранятся до тех пор, пока лаборатория не станет доступна для анализа ДНК. Образец элюируется из каждого пятна, и полимеразная цепная реакция используется для геномного анализа ДНК, содержащейся в лейкоцитах и ​​в репродуктивных жидкостях. Результаты используются для идентификации жертвы преступления и преступника.

ПРИМЕР 4 Многоканальная гидрофильная / гидрофобная пористая пластиковая карта для использования при доставке проб крови небольшого объема для анализа

Молодым крысам массой 100 г вводят лекарство и отбирают пробы крови с течением времени для проверки концентрации препарат и его метаболиты с целью установления фармакокинетического и метаболического профиля.

Крысу анестезируют, и ее хвостовую вену используют для получения 100 мкл пробы крови с помощью капиллярной трубки. 100 мкл образца наносят на место приема образца на многоканальной гидрофильно-гидрофобной пористой пластиковой карте (фиг. 5). Кровь проходит через гидрофильные каналы и достигает мест хранения образцов. Карта высохла. Карточка, содержащая 100 мкл образца крови, хранится до времени, выбранного для анализа.

Затем с помощью пробойника круглой формы получают пробу крови из каждого места хранения пробы.Перфорированная круглая область карты, содержащая образец, затем помещается во флакон центрифуги. Различные места хранения могут быть пробиты в разные флаконы для разных анализов или с использованием разных протоколов. Некоторые места для хранения могут быть сохранены для будущих анализов.

ПРИМЕР 5 Карта спеченной пористой сухой крови

Порошкообразный полиэтилен, имеющий средний размер частиц около 150 мкм, помещали в форму из металлического листа (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″), нагретую до 350 ° F. в течение примерно трех минут, а затем охлаждали до комнатной температуры примерно за пять минут.Спеченный пористый полиэтиленовый лист имел средний размер пор около 30 мкм и объем пор около 40%.

ПРИМЕР 6 Карта спеченной пористой сухой крови

Порошковый полиэтилен из сверхвысокомолекулярного полиэтилена со средним размером частиц около 30 мкм помещали в форму из металлического листа (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″), нагретую до 350 ° F. y в течение примерно трех минут, а затем охлаждают до комнатной температуры примерно за пять минут. Спеченный пористый лист UHMWPE имел средний размер пор около 10 мкм и объем пор около 40%.

ПРИМЕР 7 Карта спеченной пористой сухой крови

Порошкообразный полиэтилен высокой плотности (HDPE), имеющий средний размер частиц около 300 мкм, помещали в форму из металлического листа (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″), нагревая. до 350 ° F в течение примерно трех минут с последующим охлаждением до комнатной температуры примерно за пять минут. Спеченный пористый лист HDPE имел средний размер пор около 80 мкм и объем пор около 40%.

ПРИМЕР 8 Карта спеченной пористой сухой крови

Порошковый полистирол, имеющий средний размер частиц около 180 мкм, помещали в форму из металлического листа (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″), нагретую до 370 ° F.в течение примерно трех минут, а затем охлаждали до комнатной температуры примерно за пять минут. Спеченный пористый полиэтиленовый лист имел средний размер пор около 45 мкм и объем пор около 40%.

ПРИМЕР 9 Карта гидрофильной спеченной пористой сухой крови

Карты спеченной пористой сухой крови из примеров 5-8 обрабатывали плазмой низкого давления. Карты с образцами обрабатывали кислородной плазмой при 100 мторр и 100 Вт (Вт) в течение 10 минут в плазменной машине (Europlasma, Oudenaards, Бельгия).Карты стали гидрофильными и адсорбировали 20 мкл деионизированной воды менее чем за 3 секунды, когда 20 мкл деионизированной воды были помещены на них с помощью пипетки.

ПРИМЕР 10 Карточка с гидрофильной спеченной пористой сухой кровью

Карточки с спеченной пористой сухой кровью из примеров 5-8 обрабатывали поверхностно-активными веществами. Карты с образцами погружали в раствор, содержащий 79% деионизированной воды, 20% изопропилового спирта и 1% Tween® 20, при комнатной температуре в течение 12 часов и сушили при 70 ° F.на 8 часов в духовке. Карты стали гидрофильными и адсорбировали 20 мкл деионизированной воды менее чем за 3 секунды, когда 20 мкл деионизированной воды были помещены на них с помощью пипетки.

ПРИМЕР 11

Спеченная гидрофильная пористая сухая карта крови, содержащая сухое анионное поверхностно-активное вещество

Порошкообразная смесь, содержащая 99,5% полиэтиленовых порошков со средним размером частиц около 150 мкм и 0,5% додецилсульфата натрия (SDS), помещалась в металлический лист (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″), нагретый до 350 ° F.в течение примерно трех минут, а затем охлаждали до комнатной температуры примерно за пять минут. Полученный в результате спеченный пористый полиэтиленовый лист имел средний размер пор примерно 30 мкм и объем пор примерно 40%. Карты были гидрофильными и адсорбировали 20 мкл деионизированной воды менее чем за 3 секунды, когда 20 мкл деионизированной воды помещали на них пипеткой.

ПРИМЕР 12

Карта спеченной гидрофильной пористой сухой крови, содержащая сухое анионное поверхностно-активное вещество

Порошкообразная смесь, содержащая 99.5% полиэтилена UHMWPE, имеющего средний размер частиц около 30 мкм, и 0,5% порошка додецилсульфата натрия (SDS) помещают в форму из металлического листа (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″) и нагревают до 350 °. F. в течение примерно трех минут, а затем охлаждают до комнатной температуры примерно за пять минут. Полученный в результате спеченный пористый лист СВМПЭ имеет средний размер пор около 10 мкм и объем пор около 40%. Карты являются гидрофильными и адсорбируют 20 мкл деионизированной воды менее чем за 3 секунды, когда 20 мкл деионизированной воды помещается на них с помощью пипетки.

ПРИМЕР 13

Карта спеченной гидрофильной пористой сухой крови, содержащая сухое катионное поверхностно-активное вещество

Порошковая смесь, содержащая 99% полиэтиленовых порошков со средним размером частиц около 150 мкм и 1% бромида цетилтриметиламмония (CTAB), размещается в металле. листовой (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″) пресс-формы, нагретой до 350 ° F в течение примерно трех минут и затем охлажденной до комнатной температуры примерно за пять минут. Полученный в результате спеченный пористый полиэтиленовый лист имеет средний размер пор около 30 мкм и объем пор около 40%.Карты являются гидрофильными и адсорбируют 20 мкл деионизированной воды менее чем за 3 секунды, когда 20 мкл деионизированной воды помещается на них с помощью пипетки.

ПРИМЕР 14

Спеченная гидрофильная пористая сухая карта крови, содержащая сухое катионное поверхностно-активное вещество

Порошковая смесь, содержащая 99% полиэтилена UHMWPE, имеющего средний размер частиц около 30 мкм, и 1% цетилтриметиламмонийбромида (CTAB) размещается в металле. листовая (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″) форма, нагретая до 350 ° F.в течение примерно трех минут, а затем охлаждали до комнатной температуры примерно за пять минут. Полученный в результате спеченный пористый полиэтиленовый лист имеет средний размер пор около 10 мкм и объем пор около 40%. Карты являются гидрофильными и адсорбируют 20 мкл деионизированной воды менее чем за 3 секунды, когда 20 мкл деионизированной воды помещается на них с помощью пипетки.

ПРИМЕР 15

Гидрофильная спеченная пористая сухая карта крови с многослойным полиэлектролитным покрытием

Спеченная пористая сухая кровяная карта из примера 9 была дополнительно обработана раствором полиэлектролита для улучшения гидрофильной стабильности.Карточки с образцами, обработанными свежей плазмой, погружали в водно-спиртовой раствор 0,25% полиэтиленимина (750 кДа) (80% деионизированной воды и 20% изопропилового спирта) при комнатной температуре на 10 минут, сушили при 50 ° F в течение 10 минут в печи. погружали в водно-спиртовой раствор 0,25% полиакриловой кислоты (250 кДа) (80% деионизированной воды и 20% изопропилового спирта) при комнатной температуре на 10 минут и сушили при 50 ° F в течение 10 минут. Карты были гидрофильными и адсорбировали 20 мкл деионизированной воды менее чем за 3 секунды, когда 20 мкл деионизированной воды помещали на них пипеткой.

ПРИМЕР 16

Гидрофильная спеченная пористая сухая карта крови с полиэлектролитом и поверхностно-активным покрытием

Спеченная пористая сухая карта крови из примера 9 была дополнительно обработана раствором полиэлектролита для улучшения гидрофильной стабильности. Карточки с образцами, обработанными свежей плазмой, были погружены в водно-спиртовой раствор 0,25% полиэтиленимина (750 кДа) (80% деионизированной воды и 20% изопропилового спирта) при комнатной температуре на 10 минут, высушены при 50 градусах в течение 10 минут в печи, погружены в воду. в 0.1% водно-спиртовой раствор Zonyl® FSK (80% деионизированной воды и 20% изопропилового спирта) при комнатной температуре в течение 10 минут и сушить при 50 ° F в течение 10 минут. Карты были гидрофильными и адсорбировали 20 мкл деионизированной воды менее чем за 3 секунды, когда 20 мкл деионизированной воды помещали на них пипеткой.

ПРИМЕР 17

Гидрофильная спеченная пористая сухая карта крови с гепарином

Спеченная пористая сухая карта крови из примеров 5-8 обрабатывают поверхностно-активным веществом и гепарином.Карты с образцами погружают в водно-изопропиловый спирт (80:20), содержащий 1% Tween® 20 и 0,5% натриевую соль гепарина, при комнатной температуре в течение 12 часов и сушат при 70 ° F в течение 8 часов в печи. Карты становятся гидрофильными и адсорбируют 20 мкл деионизированной воды менее чем за 3 секунды, когда 20 мкл деионизированной воды помещается на них с помощью пипетки.

ПРИМЕР 18

Гидрофильная спеченная пористая сухая карта крови с полиэлектролитом и гепариновым покрытием

Спеченная пористая сухая карта крови из примера 9 дополнительно обрабатывается раствором полиэлектролита и раствором гепарина для улучшения совместимости с кровью.Карточки с образцами, обработанными свежей плазмой, погружают в водно-спиртовой раствор 0,25% полиэтиленимина (750 кДа) (80% деионизированная вода: 20% изопропиловый спирт) при комнатной температуре на 10 минут, сушат при 50 ° F в течение 10 минут в печи. а затем погружают в 0,1% водный раствор натриевой соли гепарина (80% деионизированной воды: 20% изопропиловый спирт) при комнатной температуре на 10 минут и сушат при 50 ° F в течение 10 минут. Карты являются гидрофильными и адсорбируют 20 мкл деионизированной воды менее более 3 секунд, когда 20 мкл деионизированной воды помещают на карты с помощью пипетки.

ПРИМЕР 19

Карта спеченной гидрофильной пористой сухой крови, содержащая силикагель C-18

Порошковая смесь, содержащая 70% полиэтилена UHMWPE, имеющего средний размер частиц около 30 мкм, и 30% силикагеля C-18 со средними частицами размером 30 мкм помещают в форму из металлического листа (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″), нагревают до 350 ° F в течение примерно трех минут и затем охлаждают до комнатной температуры примерно за пять минут. Спеченный пористый композитный лист имеет средний размер пор около 10 мкм и объем пор около 40%.Карты необязательно дополнительно обрабатываются раствором поверхностно-активного вещества для обеспечения гидрофильности.

ПРИМЕР 20

Карта спеченной гидрофильной пористой сухой крови, содержащая ионообменные смолы

Порошкообразная смесь, содержащая 70% полиэтилена UHMWPE, имеющего средний размер частиц около 30 мкм, и 30% мелкоячеистой смолы Dowex® 50WX2 (от 200 до 400 сетки) со средним размером частиц 50 мкм помещают в форму из металлического листа (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″), нагревают до 350 ° F в течение примерно трех минут и затем охлаждают до комнатной температуры примерно за пять минут.Спеченный пористый композитный лист имеет средний размер пор около 12 мкм и объем пор около 40%. Карты необязательно дополнительно обрабатываются раствором поверхностно-активного вещества для обеспечения гидрофильности.

ПРИМЕР 21

Спеченная гидрофильная пористая сухая карта крови, содержащая хелатирующие агенты

Порошковая смесь, содержащая 95% полиэтилена UHMWPE, имеющего средний размер частиц около 30 мкм, и 5% порошка этилендиаминтетрауксусной кислоты (EDTA) со средним размером частиц 50 мкм помещается в форму из металлического листа (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″), нагретую до 350 ° F.в течение примерно трех минут, а затем охлаждали до комнатной температуры примерно за пять минут. Спеченный пористый композитный лист имеет средний размер пор около 10 мкм и объем пор около 40%. Карты необязательно дополнительно обрабатываются раствором поверхностно-активного вещества для обеспечения гидрофильности.

ПРИМЕР 22

Карта спеченной гидрофильной пористой сухой крови, содержащая стабилизирующие ДНК агенты

Порошковая смесь, содержащая 98% полиэтилена сверхвысокомолекулярного полиэтилена, имеющего средний размер частиц около 30 мкм, и 2% порошка мочевой кислоты со средним размером частиц 50 мкм. размещается в форме из металлического листа (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″), нагретой до 350 ° F.в течение примерно трех минут, а затем охлаждали до комнатной температуры примерно за пять минут. Спеченный пористый композитный лист имеет средний размер пор около 10 мкм и объем пор около 40%. Карты необязательно дополнительно обрабатываются раствором поверхностно-активного вещества для обеспечения гидрофильности.

ПРИМЕР 23

Спеченная гидрофильная пористая сухая карта крови, содержащая хаотропные агенты

Порошковая смесь, содержащая 98% полиэтилена UHMWPE, имеющего средний размер частиц около 30 мкм, и 2% порошка гуанидиния хлорида со средним размером частиц 50 мкм. размещены в форме из металлического листа (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″), нагретой до 350 ° F.в течение примерно трех минут, а затем охлаждали до комнатной температуры примерно за пять минут. Спеченный пористый композитный лист имеет средний размер пор около 10 мкм и объем пор около 40%. Карты необязательно дополнительно обрабатываются раствором поверхностно-активного вещества для обеспечения гидрофильности.

ПРИМЕР 24

Карта спеченной гидрофильной пористой сухой крови, содержащая множество добавок для консервации крови

Порошковая смесь, содержащая 90% полиэтилена сверхвысокомолекулярного полиэтилена, имеющего средний размер частиц около 30 мкм, и 2% порошка мочевой кислоты со средним размером частиц 50 мкм, 2% порошка гуанидиния хлорида со средним размером частиц 50 мкм, 5% порошка этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) со средним размером частиц 50 мкм и 1% порошка додецилсульфата натрия (SDS) размещены на металлическом листе. (8 ″ × 11 ″ × 1/16 ″) формы, нагретой до 350 ° F.в течение примерно трех минут, а затем охлаждали до комнатной температуры примерно за пять минут. Спеченный пористый композитный лист имеет средний размер пор около 12 мкм и объем пор около 40%. Карты являются гидрофильными и адсорбируют 20 мкл деионизированной воды менее чем за 3 секунды, когда 20 мкл деионизированной воды помещается на них с помощью пипетки.

ПРИМЕР 25

Извлечение кофеина из спеченных гидрофильных пористых карт

Три гидрофильных спеченных полиэтиленовых листа были выбраны для свойств тестовых образцов.Листы имели разные размеры пор (100 мкм, 50 мкм и 8 мкм) с толщиной 1,6 мм, 1,6 мм и 0,25 мм соответственно, как показано в таблицах 1 и 2. Лист 100 мкм содержал 0,2% анионного поверхностно-активного вещества. N-метил-N-олеоилтаурат натрия. Лист толщиной 50 мкм содержал 0,2% анионного поверхностно-активного вещества N-метил-N-олеоилтаурата натрия. Процент поверхностно-активного вещества представляет собой процентную долю смешанной массы перед спеканием. Лист 8 мкм обрабатывали плазменной активацией и последовательно обрабатывали водным раствором 0.25% полиэтиленимин — водный раствор 0,25% поли (акриловой кислоты).

В состав искусственной плазмы входили фосфатный буфер, красный пищевой краситель, бычий сывороточный альбумин и азид натрия. Кофеин был получен от Sigma Aldrich. Кофеин смешивали с искусственной плазмой с образованием раствора 10 мг / мл. Готовили стандартный раствор кофеина (10 мг кофеина / мл) и серийно разбавляли в растворе деионизированной воды. Стандартная кривая УФ-поглощения для этих серийно разбавленных растворов кофеина показана на фиг.8. Поглощение УФ-излучения измеряли на приборе Thermo-Fisher NanoDrop 2000. Кофеин измеряли на длине волны 273 нм. Выбор длины волны был основан на кривой УФ-поглощения кофеина и кривой УФ-поглощения для искусственной плазмы.

20 мкл искусственной плазмы пипеткой наносили на каждый гидрофильный лист. Различные листы имели четко видимые различия в диаметрах пятен образцов, как указано в таблице 1. Свойства образцов листов перечислены в таблице 1. Эти образцы использовали в качестве фонового измерения для измерения образцов кофеина.

ТАБЛИЦА 1 Искусственное плазменное пятно на образцах карт. Листы Porex Размер образца (мкл) Диаметр пятна (мм) Толщина (мм) 100 мкм 2061,650 мкм 2081,6 8 мкм 20180,25

20 мкл искусственной плазмы, содержащей 10 мг / мл кофеина (всего 200 мкг кофеина ) пипеткой наносили на отдельные листовые образцы с одинаковыми свойствами. Образцы сушили при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем пятна образца пробивали бумажным дыроколом диаметром 6 мм.Полученные диски диаметром 6 мм отдельно переносили в стеклянные флаконы на 7 мл. Образцы во флаконах экстрагировали 1 мл деионизированной воды в течение 2 часов. УФ-поглощение этих водных экстрактов было измерено для образцов с искусственной плазмой и образцов с кофеином в искусственной плазме. Разница для одного и того же образца с кофеином и без него была измерена для кофеина, высвобожденного из карточек отбора проб. Показания оценивали с точностью до 5 мкг / мл, используя стандартную кривую для деионизированной воды с кофеином.Результаты в таблице 2 показывают выход кофеина от 65% до 87,5%.

ТАБЛИЦА 2 Извлечение кофеина из листов Porex. UVFactorPorexAbsorption (размер таблицы punchMeasured CaffeineRecoverySheets (273 нм)) Концентрация (мкг)% 100 мкм 0,77117587,550 мкм0,351,7815075 8 мкм0,065

5

целостность. Следует понимать, что вышеизложенное относится только к предпочтительным вариантам осуществления настоящего изобретения и что в него могут быть внесены многочисленные модификации или изменения, не выходящие за рамки сущности и объема настоящего изобретения, как определено в следующей формуле изобретения.